TSH抑制疗法对分化型甲状腺癌患者术后血清Tg、VEGF、TSGF、CD44V6、sIL-2R及T淋巴细胞亚群水平的影响

目的:探讨促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)抑制疗法对分化型甲状腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)患者术后血清甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、肿瘤特异性生长因子(tumors pecific growth factor,TSGF)、白细胞分化抗原44变异型6(CD44V6)、可溶性白细胞介素-2受体(soluble interleukin-2receptor,sIL-2R)及T淋巴细胞亚群水平的影响。方法:选择2014年1月~2017年1月我院收治的接受甲状腺全切手术治疗的100例DTC患者,随机分为对照组和实验组,各50例。对照组患者常规给予甲状腺素替代治疗,实验组患者给予TSH抑制疗法(口服左甲状腺素钠片,控制血清TSH水平低于0.1mU/L),两组患者均给予治疗1个月。比较两组患者治疗前后血清Tg、VEGF、TSGF、CD44V6、sIL-2R水平及外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+水平。结果:两组治疗前的血清Tg、VEGF、TSGF、CD44V6、sIL-2R水平比较,均无显著性差异(P>0.05);两组治疗后的血清Tg、VEGF、TSGF、CD44V6、sIL-2R水平相比治疗前均较低,且实验组治疗后血清Tg、VEGF、TSGF、CD44V6、sIL-2R水平变化均显著优于对照组(P<0.05)。两组治疗前的外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+水平比较,均无显著性差异(P>0.05);两组治疗后的外周血CD3^+、CD4^+水平相比治疗前均较高、CD8^+水平相比治疗前均较低,且实验组治疗后血外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+水平变化均优于对照组,具有显著性差异(P<0.05)。结论:DTC行甲状腺全切手术治疗后接受TSH抑制疗法能够有效降低血清Tg、VEGF、TSGF、CD44V6、sIL-2R水平,改善细胞免疫功能,值得在临床上推广应用。

人源化CD25单克隆抗体对外周血T淋巴细胞活化和增殖的影响

本研究探讨人源化重组CD25单克隆抗体(rhCD25MAb)对外周血T淋巴细胞活化、增殖的影响。应用植物血凝素(PHA)刺激外周血单个核细胞,不加或同时加rhCD25MAb或环孢菌素A(CsA)进行体外培养,或先用PHA刺激T细胞活化后再加入rhCD25MAb继续进行培养。用MTT法检测淋巴细胞增殖率;流式细胞术检测T淋巴细胞表面抗原CD3、CD25的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中可溶性IL-2R(sIL-2R)水平。结果显示:rh-CD25MAb和CsA均能有效抑制PHA活化的T细胞的增殖,且随浓度的升高而增强,总体比较,CsA对T细胞的增殖抑制作用更强。虽然CsA和rhCD25MAb均能降低细胞培养上清中的sIL-2R的水平及CD25+/CD3+的比例,但rhCD25MAb的作用明显强于CsA。rhCD25MAb无论是在T细胞活化前还是活化后均能抑制T细胞表达CD25抗原和分泌sIL-2R。结论:rhCD25MAb具有很强的免疫抑制作用,它能抑制T细胞活化及抑制活化的T细胞增殖,临床上它不仅可用于治疗急性移植物抗宿主病(aGVHD),还可用于预防aGVHD。

血清可溶性CD105、糖类抗原CA125和CA724水平检测在宫颈癌联合化疗中的价值研究

目的:探讨血清可溶性CD105、糖类抗原125和糖类抗原724(CA125和CA724)水平检测在紫杉醇联合顺铂治疗宫颈癌中的应用价值。方法:选取42例行宫颈癌手术的患者,按照随机数表法将其分为观察组和对照组,每组21例。观察组给予静脉滴注紫杉醇135 mg/m^2,于3 h后静脉滴注顺铂60 mg/m^2;对照组仅给予静脉滴注顺铂。化疗2个疗程,每次化疗间隔21 d。治疗前及治疗后检测两组患者的血清可溶性CD105、CA125和CA724水平,并结合疗效进行对比分析。结果:观察组与对照组比较,其血清可溶性CD105、CA125和CA724水平较低,差异有统计学意义(t=19.119,t=22.493,t=15.46;P<0.05)。血清可溶性CD105、CA125和CA724水平与临床疗效呈负相关关系(r_s=-0.427,r_s=-0.335,r_s=-0.408;P<0.05)。结论:紫杉醇联合顺铂对宫颈癌有较好的临床疗效,其机制与降低血清可溶性CD105、CA125和CA724水平相关。

日本血吸虫可溶性成虫抗原和虫卵抗原对CD4^+ T淋巴细胞凋亡和细胞周期的影响

目的观察并比较日本血吸虫可溶性成虫抗原(SWA)、可溶性虫卵抗原(SEA)对小鼠CD4+T淋巴细胞凋亡和细胞周期的影响。方法以免疫磁珠分选正常小鼠脾细胞中的CD4+T淋巴细胞后,与羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯标记的抗原递呈细胞共培养,并分别以PBS、SWA、SEA刺激。36h后以流式细胞术(FCM)结合caspase-3荧光抗体标记技术检测CD4+T淋巴细胞的凋亡水平;96h后以碘化丙锭染色结合FCM分析CD4+T淋巴细胞周期分布情况。结果凋亡分析结果显示,经SEA和SWA刺激后,外周CD4+T细胞的凋亡百分比分别为(1.24±0.29)%和(1.52±0.38)%,两者差异无统计学意义(P>0.05)。细胞周期分析表明,SWA组处于G1期、S期和G2/M期的细胞百分比分别为(78.91±2.98)%、(7.39±0.85%)和(10.69±1.05)%;与之相比,SEA组G1期细胞百分比[(59.42±1.32)%]显著降低,S期[(21.07±0.88)%]和G2/M期[(18.88±1.21)%]显著增加,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论SWA、SEA均可诱导CD4+T淋巴细胞凋亡,SEA促进CD4+T淋巴细胞进入分裂周期的作用更明显。

卵巢癌细胞系SKOV3冻融抗原诱导CTL特异性杀瘤效应的研究

目的探讨卵巢癌冻融抗原对T淋巴细胞的增殖作用及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在体外杀伤卵巢癌细胞的抗原特异性细胞毒性效应。方法采用免疫磁珠分离法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离纯化正常人外周血CD+3T细胞,体外以SKOV3卵巢癌细胞中提取的可溶性肿瘤抗原加以刺激。溴标法检测肿瘤抗原对T细胞增殖的影响;MTT法测定肿瘤抗原诱导的CTL体外杀伤卵巢癌细胞的能力;利用绒毛膜癌细胞抗原对比观察肿瘤抗原诱导CTL杀伤肿瘤细胞的抗原特异性。结果卵巢癌细胞抗原有很强的促进T淋巴细胞增殖的作用,且存在时间依赖性,在24h时促进作用最强。SKOV3抗原诱导的CTL在体外对SKOV3细胞的杀伤率为68.38%,显著高于它对JAR绒毛膜癌细胞的杀伤率(18.31%);而JAR细胞抗原诱导的CTL对JAR和SKOV3细胞的杀伤率分别为61.02%和14.79%,有显著的抗原特异性(P=0.0001)。结论卵巢癌细胞冻融抗原诱导的CTL在体外具有很强的增殖能力和抗原特异性杀伤卵巢癌细胞的作用。

人脐血源性间充质干细胞的体外培养及生物学鉴定

目的建立体外培养、扩增人脐带血间充质干细胞(MSCs)的方法,初步鉴定其生物学特性。方法无菌条件下取正常足月剖宫产的脐带血,用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞,以偏酸性的MesencultTM作为培养基进行培养和纯化获得贴壁细胞层,测定MSCs的生长曲线,用流式细胞技术分析细胞的表面抗原。结果来源于脐血的单个核细胞在体外用合适的培养基培养,细胞贴壁后出现破骨样及间充质样的细胞。间充质细胞为成纤维样的细胞形态,并表达MSCs相关的抗原CD29、CD44、CD105,但不表达CD34、CD45、CD106和HLADR。这与源于骨髓的MSCs一致。结论脐带血中含有的MSCs可在体外培养、扩增,能够为实验和临床的应用提供一种新的间充质干细胞来源。

腹腔感染致脓毒症患者外周血血浆CTLA-4、sCD28水平及其在淋巴细胞、粒细胞的表达

目的:探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、人可溶性CD28(sCD28)在腹腔感染致脓毒症患者血浆中的浓度水平,及其在CD4+、CD8+T和粒细胞上的表达情况。方法:收集2016-02-2017-09期间连云港市某人民医院普外科及重症监护病房收治的37例腹腔感染致脓毒症患者为研究对象,分为脓毒症组20例和感染性休克组17例;另选取20例健康体验者为对照组。患者在入院时抽取外周血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测52例样本血浆中CTLA-4和sCD28的浓度水平,采用流式细胞仪检测CTLA-4和sCD28在CD4+、CD8+T及粒细胞上的表达情况。结果:与健康对照组比,脓毒症组、感染性休克组外周血血浆中CTLA-4和sCD28浓度均降低,感染性休克组更低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组比,脓毒症组、感染性休克组CTLA-4在CD4+、CD8+T淋巴细胞及粒细胞上的表达上调,而sCD28的表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05);脓毒症组与感染性休克组相比,sCD28在CD8+T上的表达下调,CTLA-4在CD8+T上的表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05),而sCD28和CTLA-4在CD4+T的表达差异无有统计学意义。结论:外周血血浆CTLA-4和sCD28水平及其在CD4+、CD8+T淋巴细胞及粒细胞上表达的改变可能反应早期腹腔感染致脓毒症患者的免疫紊乱状态。

抗血管生成因子在子痫前期早期诊断及治疗中的应用

子痫前期是妊娠期高血压疾病的一种类型,以广泛的母体血管内皮损伤为特征。胎盘抗血管生成因子表达的改变与疾病的临床表现相关,可致内皮损伤,导致高血压、蛋白尿及子痫前期的多脏器病变。目前的抗血管生成因子有可溶性fms-样酪氨酸激酶受体-1(sFlt1)和可溶性CD105淋巴细胞抗原(sEng),两者在其调节因子包括血红素氧合酶1(HO-1)和抗血管紧张素Ⅱ-1型受体自身抗体(AT1-AA)的作用下,以及血管生成因子[血管内皮生长因子(VEGF)和胎盘生长因子(PLGF)]与抗血管生成因子平衡失调的情况下,sFlt1和sEng可在子痫前期临床症状凸显前几周就发生改变,血清中表达增加。因此,可作为预测子痫前期的生物学标记,为临床早期诊断提供依据。并且恢复血管生成因子和抗血管生成因子之间的平衡也是治疗子痫前期的新思路之一。

Soluble endoglin和sFlt-1在子痫前期患者血清中的表达

目的探讨可溶性CD105淋巴细胞抗原及可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)在子痫前期患者血清中表达水平的变化及意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定子痫前期组、子痫前期各个亚组及正常晚期妊娠组血清sEng及sFlt-1的水平。结果①子痫前期组孕妇血清sEng、sFlt-1水平分别为(5.27±1.05)ng/mL、(391.14±70.25)pg/mL,正常晚期妊娠组分别为(1.26±0.40)ng/mL、(27.57±4.36)pg/mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);②轻度子痫前期组sEng水平与重度子痫前期组比较差异有统计学意义(P<0.01),两组sFlt-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05);③早发型重度子痫前期组sEng水平与晚发型重度子痫前期组比较差异有统计学意义(P<0.01),两组sFlt-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论子痫前期患者血清中sEngs、Flt-1水平显著升高,sEng在早发型重度子痫前期血清中升高更显著,对早期诊断子痫前期有重要意义。

子痫前期与Soluble Endoglin水平的关系

目的:探讨子痫前期临床症状出现前及出现时可溶性Endoglin(soluble Endoglin,sEng)水平。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测47例子痫前期妇女和40例正常晚孕妇女血清中sEng水平。结果:①在正常对照组,sEng维持在低水平至33～36孕周,之后逐渐升高直至分娩。早发型重度子痫前期患者发病前sEng水平在17～20孕周即开始升高,之后随孕周逐渐升高,至临床症状出现时达到高峰,均显著高于对照组(P<0.001)。晚发型重度子痫前期患者发病前sEng水平在29～32孕周开始升高,至33～36孕周明显升高,至临床症状出现时达到高峰,均显著高于对照组(P<0.001)。②sEng水平在子痫前期组显著高于对照组(P<0.05)。重度子痫前期组显著高于轻度子痫前期组(P<0.05),其中晚发型重度子痫前期组显著高于早发型重度子痫前期组(P<0.05)。结论:sEng水平在子痫前期临床症状出现前数周就开始升高,且随子痫前期病情加重而增加,对预测或早期诊断子痫前期意义重大。

布鲁氏菌病患者外周血CTLA-4和CD14表达及其相关性分析

目的探讨外周血细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、可溶性CD14(sCD14)和膜结合性CD14(mCD14)在布鲁氏菌病患者中表达水平及其相关性。方法选取2019-06-01-2021-06-01郑州市第六人民医院收治的116例布鲁氏菌患者为研究对象,其中急性布鲁氏菌患者63例(急性布鲁病组),慢性布鲁氏菌患者53例(慢性布鲁病组)。选取同期同院116例体检健康者为对照组。酶联免疫吸附法检测血清中CTLA-4、sCD14、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-2水平,采用流式细胞术检测外周血单个细胞核mCD14表达水平。采用Pearson法分析血清CTLA-4、sCD14水平与TNF-α、IL-6、IL-2的相关性。多因素Logistic回归分析布鲁氏菌病的影响因素。结果与对照组sCD14[(943.47±124.28)ng/mL]、CTLA-4[(41.27±8.17)pg/mL]、mCD14[(7.25±1.63)%]相比,慢性布鲁病组外周血血清sCD14水平[(1568.17±309.52)ng/mL]、CTLA-4水平[(76.28±14.39)pg/mL]、外周血单个核细胞中mCD14[(11.72±3.08)%]表达较高,均P<0.05;与慢性布鲁病组相比,急性布鲁病组血清sCD14水平[(2075.48±325.16)ng/mL]、CTLA-4水平[(126.73±28.44)pg/mL]、外周血单个核细胞中mCD14[(27.49±6.05)%]表达较高,均P<0.05。与慢性布鲁病组TNF-α[(22.94±5.02)pg/mL]、IL-6[(23.84±5.61)pg/mL]、IL-2[(2.94±0.62)pg/mL]相比,急性布鲁病组血清TNF-α水平[(30.28±5.86)pg/mL,t=7.169,P<0.001]、IL-6水平[(58.73±6.68)pg/mL,t=30.120,P<0.001]较高,血清IL-2水平[(2.32±0.51)pg/mL,t=5.912,P<0.001]降低。Pearson法分析结果显示,CTLA-4、sCD14与TNF-α、IL-6呈正相关(P<0.001),与IL-2呈负相关(P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,CTLA-4(OR=1.941,95%CI为1.251~3.011,P=0.004)、TNF-α(OR=1.914,95%CI为1.053~3.479,P=0.033)、IL-6(OR=2.111,95%CI为1.152~3.868,P=0.015)、sCD14(OR=2.229,95%CI为1.454~3.417,P<0.001)是布鲁氏菌病的独立危险因素,IL-2(OR=0.502,95%CI为0.315~0.799,P=0.004)是布鲁氏菌病的保护因素。结论外周血CD14及血清CTLA-4在布鲁氏菌病患者中高表达,CTLA-4、CD14共同参与布鲁氏菌对宿主的免疫调控作用。