可溶性HLA-G1、-G2的原核表达及其蛋白质产物的功能检测

sHLA-G存在于整个妊娠期母胎接触面及母体血循环中,目前被认为是妊娠期一种特异性免疫抑制分子。实验将sHLA-G1、sHLA-G2基因克隆于原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导实现目标融合蛋白的高效表达,并通过Ni2+-NTA柱纯化、蛋白质透析梯度复性获得纯化的His-sHLA-G1、His-sHLA-G2融合蛋白。融合蛋白再经凝血酶酶切、苯甲脒琼脂糖凝胶吸附去除6-His标签后,用于体外功能鉴定。结果显示:sHLA-G2与sHLA-G1一样,同样具有抑制T细胞增殖、抑制NK细胞杀伤活性的功能,提示sHLA-G2为一种免疫致耐分子。

类风湿关节炎患者血清可溶性HLA-G的表达水平

目的探讨血清可溶性HLA-G(sHLA-G)在类风湿关节炎(RA)患者血清中水平。方法用ELISA法检测37例RA患者与60例健康人血清sHLA-G水平。结果RA患者血清sHLA-G水平(16±11.3)ng/m l显著低于健康人对照组(35±33.2)ng/m l,P<0.01;血清sHLA-G水平与抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)、CRP和ESR无显著相关性(P>0.05)。结论RA患者血清中sHLA-G水平降低,sHLA-G在RA疾病发生、发展中可能发挥了一定的作用。

可溶性HLA免疫生物学研究进展

可溶性人类白细胞抗原 (SolubleHumanLeukocyteAntigen ,sHLA)与细胞膜表面HLA分子一样 ,在体内参与免疫应答 ,具有免疫调节功能 ,可诱导产生免疫耐受 ,抑制细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的溶细胞作用。在器官移植、感染性疾病及某些自身免疫性疾病等病人血清中 ,sHLA有明显的变化。健康个体血清中sHLA含量很低 ,变动范围为 0 5～ 2 5 μg/ml。临床上血清sHLA水平可作为预测移植物排斥反应、评估移植预后、反映感染性疾病及某些自身免疫性疾病活动状态。

HLA-A,B基因型别对可溶性HLAⅠ类抗原含量的影响

目的了解HLAA,B基因型别对可溶性HLAⅠ类抗原含量的影响。方法HLAA,B基因型别用反相PCRSSO技术检测,可溶性HLAI类抗原的含量用夹心ELISA方法测定。结果在福建省汉族人群中基因型别为HLAA24的个体,可溶性HLAⅠ类抗原的含量显著高于平均水平;HLAA2和A33基因的携带者可溶性HLAⅠ类抗原的含量显著低于平均水平;HLAA11、B15、B40和B58的个体可溶性HLAⅠ类抗原的含量与平均水平比较无显著差异。结论HLAA基因型别的不同可能造成可溶性HLAⅠ类抗原含量的差异。

类风湿性关节炎患者血清可溶性HLA-G的表达水平

目的:探讨血清可溶性HLA-G(SHLA-G)在类风湿关节炎(RA)患者血清中水平。方法:用ELISA法检测27例RA患者与50例健康人血清SHLA-G水平。结果:RA患者血清SHLA-G水平(16±11.3)ng/ml显著低于健康人对照组(35±33.2)ng/ml,P<0.01;血清SHLA-G水平与抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)、CRP和ESR无显著相关性(P>0.05)。结论:RA患者血清中SHLA-G水平降低,SHLA-G在RA疾病发生、发展中可能发挥了一定作用。

p210^(bcr-abl)抗原的T细胞表位鉴定及其特异性CTL细胞检测

目的:探讨p210bcr-abl抗原的免疫原性,预测并鉴定该蛋白来源的HLA-A2限制性T细胞表位,并在慢性粒细胞白血病患者中检测其特异性CTL细胞分布。方法:首先利用生物信息学软件预测并选取2个p210bcr-abl来源的表位:BCR-ABL642与BCR-ABL926m;T2细胞亲和力实验鉴定短肽与HLA-A2分子的亲和力;然后制备分别锚合这2种表位的可溶性HLA-A2四聚体,流式检测术检测其特异性CTL细胞在CML患者外周血CD8+T细胞中的频率。结果:与健康人群相比,BCR-ABL642和BCR-ABL926m肽表位限制性CTL细胞的频率在CML患者均明显升高(P<0.01);而来自流感病毒短肽的特异性CTL细胞在两个群体中无统计学差异(P>0.05);另外,BCR-ABL642特异性CTL细胞的频率在CML慢性期和急变期之间有统计学差异(P<0.05)。结论:所选2种肽表位均具有免疫原性,可建立基于这2种短肽的免疫治疗措施。

应用微量淋巴细胞毒抑制试验检测细胞转染液与血清人白细胞抗原方法的建立

应用微量淋巴细胞毒抑制试验对细胞转染液9个型（HLA－A2、A3、A（11）、A（26）、HLA－B5、B（13）、B（17）、B（27）、B（44）），血清19个型（HLA－A1、A2、A3、A9、A（11）、A（26）、A（30）、A（34）；HLA－B5、B7、B（13）、B（15）、B（16）、B（17）、B（22）、B（27）、B（35）、B（44）、B（46））可溶性HLA抗原进行检测，都获得成功，说明应用该法检测这些型的可溶性HLA抗原是可行的。

肾移植术后供者特异性抗体与群体反应性抗体的比较研究

肾移植术后发生排斥的重要因素之一是群体反应性抗体（PRA）的参与，特别是肾移植术后产生抗供者特异性抗体（DSA）。抗体监测系统（AMS）是一个可靠的检测供者特异性可溶性HLAⅠ类和Ⅱ类抗原的IgG抗体的酶联免疫吸附交叉试验。