FACE对武香粳14各生育期功能叶片及根系可溶蛋白含量的影响

开放式大气CO2浓度增加(Free-air CO2 Enrichment,FACE)的处理普遍降低了作物含氮率,研究作物体内各种氮形态尤其是可溶蛋白的含量特征,对于解析FACE条件下氮代谢机制具有重要意义。在大田栽培条件下,研究了开放式大气CO2浓度增加200μmol.mol-1的处理对粳稻品种武香粳14各生育期功能叶片及根系可溶蛋白含量的影响。结果表明:(1)FACE处理显著增加了高、中氮水平下抽穗期顶叶的可溶蛋白含量,增幅分别为4%和7%,相反,不同氮水平下成熟期顶叶可溶蛋白含量显著低于对照,而拔节期及孕穗期顶叶可溶蛋白含量与对照无显著差异;(2)FACE处理显著提高了高、中氮水平下抽穗期倒二叶可溶蛋白的含量,增幅分别为16%和14%,但明显降低了不同氮水平下拔节期、孕穗期和成熟期倒二叶可溶蛋白的含量;(3)FACE处理显著提高了拔节期、孕穗期和抽穗期根系可溶蛋白的含量,增幅分别达18%、19%和12%,而成熟期根系可溶蛋白含量与对照无显著差异;(4)CO2和N处理对水稻拔节期、抽穗期和成熟期倒二叶以及抽穗期剑叶可溶性蛋白含量的互作效应均达显著或极显著水平。在此基础上,对FACE条件下功能叶片及根可溶蛋白含量变化的可能机制进行了讨论。

响应面法优化海藻酸钠絮凝回收带鱼鱼糜漂洗水可溶蛋白工艺

在鱼糜加工中,鱼肉往往要进行漂洗,导致大量可溶蛋白的流失。为回收漂洗水中的可溶蛋白,本文优化了以海藻酸钠作为絮凝剂回收鱼糜漂洗水可溶蛋白的工艺条件。在单因素试验基础上,根据Box-Behnken中心组合设计,以絮凝剂添加量、絮凝温度及时间为自变量,蛋白回收率为因变量,利用响应面程序进行分析,确定了海藻酸钠絮凝回收鱼糜漂洗水可溶蛋白的最优工艺:絮凝温度13℃,海藻酸钠添加量0.82 mg·m L-1,絮凝时间2 h,p H值5.0,在此条件下蛋白回收率为82.36%。该条件是海藻酸钠絮凝回收水溶性蛋白的最佳工艺条件,能为蛋白资源的再利用、环境污染的减轻提供理论基础。

两种沼虾胚胎发育中可溶蛋白的组成及含量变化

采用生物化学方法测定了罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、日本沼虾(M.japonicus)成熟卵细胞和胚胎发育时期可溶蛋白的组成及含量。结果显示,2种沼虾的可溶蛋白在组成和含量上体现了较高的相似特性。可溶蛋白的含量在胚胎发育过程中逐渐降低;在成熟卵细胞和胚胎期,可溶蛋白在组成上以89 ku和100 ku的卵黄磷蛋白(Vitellin,Vn)为主,同时还存在243 ku1、81 ku6、7 ku5、4 ku和31 ku等其他一些蛋白亚基。40 ku蛋白亚基仅出现在成熟卵细胞中,推测可能参与执行了特定的生殖功能。可溶蛋白随着胚胎的发育呈现出蛋白亚基经水解逐渐由大分子变成小分子的趋势。前状幼体期和状幼体期出现的74 ku蛋白亚基可能与其在胚胎后期发育的功能有关。可溶蛋白在不同物种胚胎发育时期不同的变化,显示了每个物种在卵黄蛋白的组成、利用以及组织结构蛋白的形成中各自的特点。

不同弱光环境下番茄幼苗叶绿素和可溶蛋白含量的变化

试验研究了10个不同基因型的番茄品系幼苗在不同弱光下叶绿素和可溶蛋白含量的变化。结果表明,50%对照光强使chla、chlb、总叶绿素相对值增加,且在处理初期和后期增幅较大;25%对照光强处理期间大部分品系chla含量降低,chlb含量增加,总叶绿素含量在处理初期和后期增加。各品系在不同弱光处理时chl b/a表现出较大差异,但多数品系在25%对照光强时高于50%对照光强。弱光使各品系可溶蛋白含量降低,且25%对照光强处理时降幅更大,而品系间存在明显差异。

西洋参和人参的可溶蛋白电泳鉴别

The soluble protein of Panax quinquelium L. and P. gingseng C. A. Mey were analyzed by mean of PAGE. When the concentration of separating gel is 12%, P. quinquelium presents a characteristic strip C3 (Mw 150 00), while P. gingseng presents two characteristic strips A1 (Mw 927 00) and C2 (Mw 194 00). This method is used for distinguishing P. quinquelium and P. gingseng simplely.

川半夏资源可溶蛋白图谱遗传多样性分析

目的为阐明川半夏资源间亲缘关系,准确鉴定半夏药材提供更多证据。方法采用SDS-PAGE技术分析对以川半夏资源为主的23份半夏材料以及2份掌叶半夏材料的叶片和块茎可溶性蛋白进行分析;采用NTSYS软件计算材料间相似系数,并用UPGMA法构建了系统树。结果叶片共分离出19条迁移率不同的谱带,3条带纹为所有材料共有,每份材料可分离出11～18条比较清晰的带,平均14.5条。块茎共分离出12条迁移率不同的带纹,3条带纹为所有材料共有,每份材料可分离出4～12条比较清晰的带,平均9.4条。与块茎可溶蛋白图谱相比较,叶片可溶蛋白图谱能更好的鉴定半夏与掌叶半夏;无论是块茎还是叶片,其可溶蛋白在GS值为0.817水平上所有材料都可以聚为五大类,染色体数目相同或相近的材料有聚在一起的趋势。结论川半夏资源具有较丰富的可溶蛋白遗传多样性;叶片可溶蛋白图谱可用于鉴别半夏与掌叶半夏,但块茎可溶蛋白图谱难以区分二者。

黄连可溶蛋白SDS-PAGE电泳鉴别

目的对雅连、峨眉野连、云连及6个不同产地的味连进行电泳鉴别。方法采用SDS-PAGE电泳方法。结果味连与雅连具有显著差异,味连与峨眉野连之间几乎无差异,不同产地的味连差异小,云连仅一条极弱的条带。结论SDS-PAGE电泳可以作为黄连质量控制的鉴别依据。

小麦体细胞胚胎发生过程中核酸和可溶性蛋白质的变化

研究了小麦原生质体培养形成的体细胞胚胎发生过程中DNA、RNA和可溶性蛋白质含量的变化,并对可溶性蛋白质进行了SDS-PAGE分析。结果表明,胚性愈伤组织开始分化后,DNA、RNA和可溶性蛋白质含量迅速增加,到胚状体形成时达到高峰。蛋白质组分也发生了深刻的变化,产生了分子量为71KD、58KD、51KD、31KD、26KD、25.5KD和27KD7条新蛋白质谱带,其中,58KD是胚特异性蛋白。

聚乙二醇处理大豆种子子叶中几种酶活性和可溶性蛋白含量的变化

聚乙二醇处理的大豆种子的异柠檬酸裂解酶、苹果酸脱氢酶、过氧化氢酶、超氧物歧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶的活性明显高于受低温吸胀冷害的种子子叶的活性,相关的酶活性协同地增长,而蛋白质的含量没有明显的变化。这些酶活性的提高可能是渗透调控处理对细胞膜系统修补的结果。

低温胁迫下凤眼莲叶片的适应——脱落酸和可溶性蛋白质含量升高

本文报道低温胁迫下风眼莲叶片脱落酸(ABA)、可溶性蛋白质和水势的测定结果。低温胁迫时脱落酸和可溶性蛋白质含量远高于对照,(前者含量最高可达对照的4倍,后者可达到对照的2.75倍),而且脱落酸和蛋白质含量随温度降低而升高。蛋白质的生物合成抑制剂亚胺环己酮证明,可溶性蛋白质含量升高,原因是有部分是新合成的。在各种低温处理下获得了几乎相同于对照的叶片水势。我们推测:低温胁迫下,脱落酸水平的相应变化不是由于低温诱导水分胁迫所致,而是低温胁迫本身诱导。

可溶性野生大豆蛋白的提取工艺优化

利用中心旋转实验设计对影响野生大豆蛋白提取的因素水平进行了综合考察,优化野生大豆蛋白的提取工艺参数。采用部分析因实验设计(FFD),考察了提取液pH值、液料比、提取温度、NaCl浓度和提取时间等因素对野生大豆可溶性蛋白提取率和提取液浓度的影响,通过对进行FFD实验结果分析,筛选出了影响蛋白提取率和浓度的关键性因素。结合所筛选的关键因素应用响应面分析法研究了提取液pH值、液料比、提取温度等关键因素对蛋白提取率和浓度的影响,采用多元回归技术。拟合二次多项实验模型,并通过对各变量与响应值的等高图的叠加,结合计算机模拟优化,得到了最佳的综合因素水平,分别为:pH为8.5、液料比为22.3:1、温度为46.3℃,在此条件下可溶性蛋白的提取率为43.17g/100 g,蛋白浓度为21.57mg/mL,期望值为68.6%。验证性实验所得相应条件下得蛋白含量为(42.22±1.92)g/100g;蛋白浓度为(20.83±2.05)mg/mL,结果表明采用响应面法来寻求野生大豆蛋白最佳提取条件是可行的。

响应面实验优化野生大豆可溶性蛋白的提取条件

结合所筛选的关键因素,应用响应面分析法研究了提取液pH值、液料比、提取温度等关键因素对蛋白提取率和浓度的影响,拟合二次多项实验模型,并通过对各变量与响应值的等高图的叠加,结合计算机模拟优化,得到了最佳的综合因素水平,分别为:pH8.5、液料比22.3∶1、温度46.3℃,在此条件下可溶性蛋白的提取率为43.17g/100g,蛋白浓度为21.57g/L,期望值为68.6%。验证性试验所得相应条件下得蛋白含量为42.22g/100g±1.92g/100g;蛋白浓度为20.83g/L±2.05g/L。

和厚朴酚抑制线粒体可溶蛋白诱导小胶质细胞活化的体外实验研究

目的:探讨线粒体可溶蛋白诱导小胶质细胞活化作用及和厚朴酚对小胶质细胞活化的影响。方法:培养BV2小胶质细胞,分空白对照组(control)、线粒体可溶蛋白组(MDP)、和厚朴酚干预组(HNK)。ELISA检测不同浓度线粒体可溶蛋白(MSP)刺激不同时间的细胞上清液中IL-6和TNF-α含量;RT-PCR半定量法测定各组转录因子Klf4的表达情况;倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化。结果:1.ELISA:MSP(10μg/ml,100μg/ml)处理7h时,IL-6和TNF-α含量与control组比较显著升高(P<0.05);100μg/ml MSP处理1、3、5、7h时,IL-6和TNF-α表达与control组比较明显升高(P<0.05),且7h时HNK组含量明显低于MDP组(P<0.05)。2.RT-PCR结果显示MDP组KLP4的表达显著高于空白对照组和HNK组(P<0.05)。3.倒置相差显微镜观察示空白组胶质细胞形态呈静息状态;MDP组小胶质细胞的胞体变圆或者椭圆,突起消失,呈"阿米巴"状;HNK组活化状态的小胶质细胞明显减少。结论:线粒体可溶蛋白可以激活小胶质细胞,促进白细胞介素IL-6和TNF-α的释放,和厚朴酚能够有效地抑制线粒体可溶蛋白诱导的小胶质细胞活化,其机制可能是通过下调Klf4的表达发挥作用。

人Eppin蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达

目的构建人类附睾蛋白酶抑制剂Eppin蛋白原核表达质粒,诱导、表达与纯化后获得到可溶重组蛋白,并检测其免疫学活性。方法将目的基因克隆到表达载体pMALc,转化大肠杆菌表达菌株Rossetta2-OrigamiB(DE3),用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过Ni-NTA亲和层析柱及Superdex 200分子筛层析进行纯化后,使用Thrombin酶切,并对目标蛋白进行质谱及Western印迹鉴定。结果成功构建pMALc-Eppin重组质粒,诱导后在上清中检测到Mr57 000大小的可溶MBP-Eppin融合蛋白。目标蛋白纯化与酶切后仍可溶,SDS-PAGE分析显示重组Eppin蛋白相对分子质量约15 000。肽指纹图谱分析证实目标蛋白的序列与人Eppin蛋白吻合,Western印迹显示其具有抗原性。结论经过优化,Eppin蛋白可在原核系统中以可溶形式表达,为以后研究该蛋白的生物活性、避孕免疫机制及制备避孕疫苗奠定坚实的基础。

用FPLC系统提纯可溶型Ⅱ型胶原蛋白

目的采用 FPL C系统提取纯化可溶型 型胶原蛋白 (C )。方法采用鸡剑突软骨 ,经胃蛋白酶消化离心 ,再使用 FPL C系统进行 DEAE Sepharose FF高效液相离子交换层析和脱盐柱脱盐 ,得到纯化的 C 。结果自提的 C 纯品与C 标准品电泳结果带型一致。结论本法提纯蛋白效率高 ,重复性好 ,快速简便。

SDS可溶性菌体蛋白在分枝杆菌菌型鉴定中的应用研究

用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对比分析了未经超声破碎,而直接以SDS、2-巯基乙醇、EDTA提取的四种分枝杆菌菌体蛋白图谱,显示人型结核分枝杆菌H_(37)R_v株与牛型分枝杆菌BCG株的图谱极相似,尤其在95KD、85KD、67/66KD、60KD及50/49KD 5条主带上完全对应,而堪萨斯及鸟分枝杆菌具有自己独特图谱。从而证实电泳对分枝杆菌的分种具有实际意义。

不同种源地蒙古莸可溶蛋白含量与环境因子相关分析

蒙古莸因含有丰富的可溶蛋白,可以作为蛋白类饲料。本文采用考马斯亮蓝法测定了15个种源蒙古莸可溶蛋白的含量,为今后更好地利用蒙古莸提供依据。结果表明,第一,蒙古莸可溶蛋白含量从多到少种源地依次为靖边、大青山、呼伦贝尔、宁夏贺兰山、蛮汉山、萨拉齐、刘家店、鄂尔多斯布拉沟、乌海、鄂托克、西苏旗扁桃基地、锡盟东苏旗、阿拉善、二连浩特;第二,对蒙古莸可溶蛋白含量进行聚类分析,可以将15个种源大致分为三类,其中以二连浩特、阿拉善为一类,以靖边、大青山、呼伦贝尔、宁夏贺兰山、蛮汉山为一类,以萨拉齐、刘家店、鄂尔多斯布拉沟、乌海、鄂托克、西苏旗扁桃基地、锡盟东苏旗为一类;第三,研究蒙古莸可溶蛋白含量与年均温、降水量、无霜期的关系,回归方程相关系数分别为0.270、0.831、0.097,皮尔逊相关系数分别为0.873、0.341、0.205,表明降水量与蒙古莸可溶蛋白含量相关性最大,而年均温、无霜期对其影响较小。

小鼠干扰素epsilon在大肠杆菌中的可溶性表达

目的构建小鼠干扰素epsilon蛋白的原核表达质粒,诱导表达和纯化后获得稳定的可溶性重组蛋白。方法将目的基因克隆到表达载体p ET28a-SUMO,与能同时表达3个分子伴侣gro ES、gro EL和tig的质粒p G-tf2一起转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过Ni-NTA亲和层析柱、Desalting柱、Q-HP柱及Superdex75分子筛层析经行纯化后,用Ulp1酶切,并对目标蛋白进行质谱分析。对目标蛋白抑制肿瘤细胞增长活性、刺激细胞产生抗病毒蛋白的活性进行鉴定。结果成功构建了重组质粒p ET28a-SUMO-IFN-ε和分子伴侣共表达,获得较多可溶性蛋白。目标蛋白酶切后仍可溶,SDS-PAGE分析显示重组IFN-ε蛋白表观相对分子质量为22 000。质谱分析证实目标蛋白的序列和小鼠IFN-ε的序列吻合。小鼠IFN-ε能够抑制肿瘤细胞的生长并能诱导细胞产生抗病毒蛋白Mx A。结论小鼠IFN-ε蛋白可以和分子伴侣一起在原核系统中以可溶形式表达,并证明此蛋白具有生物学活性。

麦谷蛋白与面条品质关系的研究

研究了酸可溶麦谷蛋白、酸不溶性麦谷蛋白、高相对分子质量麦谷蛋白亚基、低相对分子质量麦谷蛋白亚基对面条质构品质的影响.结果表明:酸不溶性麦谷蛋白能增强熟面条的硬度、粘结性、粘合性、咀嚼性、最大剪切应力和拉断力;低相对分子质量麦谷蛋白亚基能增强熟面条的硬度、粘合性、咀嚼性、回复性、拉断力和拉伸应变.