桃花粉可育基因连锁的RAPD标记与SCAR标记的转化

桃品种以重阳红(花粉不育)×大久保(花粉可育)的52株F1代群体为试材,应用RAPD技术,结合集群分组分析法(Bulked Segregate Analysis,BSA)构建花粉可育/不育基因池,利用180个随机引物,筛选在花粉可育基因池中稳定扩增的一个RAPD标记OPW03-900。经过重复性验证和群体单株验证,该标记仅在花粉可育个体(重组型除去)中出现,与桃花粉可育/不育位点的连锁距离为5.80cM。将该特异性片段回收、克隆、测序,并设计一对特异SCAR引物,再对F1代个体进行PCR扩增,发现该特异带的位点及重组型个体的数目与RAPD扩增结果一致,片段大小为906bp,命名为SCW03-906,表明RAPD标记已成功转化为与桃花粉可育基因连锁的SCAR标记。该序列已被GenBank收录,登录号为DQ659676。

关于西非高粱细胞质中含有A_2雄性不育可育基因的论证

关于西非高粱细胞质中含有Ａ_２雄性不育可育基因的论证ＡＤｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎｏｎｍｅＥｘｉｓｔａｎｃｅｏｆＦｅｒｔｉｌｅＧｅｎｅｆｏｒＡ_２ＭａｌｅＳｔｅｒｉｌｅｉｎＣｙｔｏｐｌａｓｍｏｆＷｅｓｔＡｆｒｉｃａｎＳｏｒｇｈｕｍ张福耀，钱章强（山西省农...

关于西非高粱细胞质中含有A_2雄性不育可育基因的推论

过去有关文献都认为西非高粱具有细胞质雄性不育基因，本文以植物雄性不育综合理论为依据，并根据一些高粱品种对Ａ１Ａ２两种雄性不育类型的反应结果论证了西非高粱细胞质中不仅有Ａ１型雄性不育基因，同时含有Ａ２型可育基因。

通过卡那霉素选择体系再生可育小麦转基因植株

使用卡那霉素作为选择剂建立起一套有效的小麦转化体系,预培养3d的未成熟胚在基因枪轰击前后进行高渗处理,轰击后于26℃、黑暗条件培养2周,然后用150mg/L硫酸卡那霉素选择培养2周,再转至含150mg/L硫酸卡那霉素的再生培养基进行光照培养。再生植株在温室中长出2～3片新叶后用2.5％硫酸卡那霉素水溶液喷洒;4周内,非转化体完全白化并枯萎,而转基因植株生长正常,用水稻Actinl启动子控制nptⅡ基因,卡那霉素选择体系的平均转化频率达到2.6％,高渗处理明显促进瞬间表达效果和稳定转化频率。目前已得到23个转基因小麦株系,大多数已经产生种子。Southern分析表明这些转基因株系均整合有不同拷贝的nptⅡ基因。

微弹射击将大麦黄矮病毒外壳蛋白基因转入小麦获可育植株

以小麦品种济南１７７、３８４、４７１的幼胚和济南１７７的胚性愈伤组织为材料，质粒为ｐＰＰＩ２［含大麦黄矮病毒外壳蛋白（ＣＰ）基因和ＧＵＳ（β－葡萄糖苷酸酶）基因］；ｐＰＰＩ５（含ＣＰ基因）＋ｐＥｍｕＧＮ（含ＧＵＳ基因），用高速基因枪轰击钨粉质粒进入幼胚和胚性愈伤组织细胞．ＧＵＳ基因的瞬间表达平均频率幼胚约为４２％，愈伤组织为１８．５％．转化处理后用ＰＣＲ扩增技术检测植株中ＣＰ基因是否存在并稳定遗传．检测结果表明，来源于幼胚的Ｔ０代转化频率为２～９％（１９９３～１９９４年），并获得Ｔ１、Ｔ２和Ｔ３代稳定表达的转化植株．用愈伤组织转化，其转化频率３月龄者为０．４％；２年龄者为零．潮霉素（Ｈｍ）用于对转化幼胚和愈伤组织的筛选，低浓度时不能抑制非转化细胞的生长，高浓度则使细胞受伤害。

繁殖方法对滇Ⅰ型粳稻不育系群体中可育株类型和频率的影响

连续4 a调查了以袋繁和自繁方式生产的4个滇Ⅰ型不育系的11个群体,发现"可育株"的出现频率为0.087 1%,其表型与相应保持系一致。采用测交和分子标记技术分析了这些"可育株"的基因型,发现袋繁不育系群体存在核恢复基因位点基因型为rf/rf的"保持株"和Rf/rf的"回复株"2种类型,而自繁不育系群体还新出现基因型为RfRf的"纯合株"类型。与袋繁群体比,自繁群体出现"可育株"的频率提高了74.7%,其中"保持株"频率提高了42.6%,"回复株"频率提高了149.3%。基于不育系繁殖方法不同,不育系中出现"可育株"混杂的几率不同,为获得高纯度的不育系种子,滇I型不育系繁殖应在袋繁基础上,扩大自繁群体,减少自繁次数。