沙葱(Allium mongolicum Regel)离体培养再生可育植株

沙葱 (AlliummongolicumRegel)的叶基切段作外植体 ,成功地诱导出愈伤组织和再生植株。诱导愈伤组织的培养基为附加 2mgL- 1 2 ,4-D和 0 .2mgL- 1 KT的MS培养基。愈伤组织转移到附加 2mgL- 1 6BA和 0 .4mgL- 1 NAA的MS培养基后分化出大量的苗。分化苗在含有IBA 1mgL- 1 的 1 /2MS培养基上生根最佳。再生植株移栽成活率在 95 %以上 ,移栽到田间的植株第二年以后可正常开花结实。

微弹射击将大麦黄矮病毒外壳蛋白基因转入小麦获可育植株

以小麦品种济南１７７、３８４、４７１的幼胚和济南１７７的胚性愈伤组织为材料，质粒为ｐＰＰＩ２［含大麦黄矮病毒外壳蛋白（ＣＰ）基因和ＧＵＳ（β－葡萄糖苷酸酶）基因］；ｐＰＰＩ５（含ＣＰ基因）＋ｐＥｍｕＧＮ（含ＧＵＳ基因），用高速基因枪轰击钨粉质粒进入幼胚和胚性愈伤组织细胞．ＧＵＳ基因的瞬间表达平均频率幼胚约为４２％，愈伤组织为１８．５％．转化处理后用ＰＣＲ扩增技术检测植株中ＣＰ基因是否存在并稳定遗传．检测结果表明，来源于幼胚的Ｔ０代转化频率为２～９％（１９９３～１９９４年），并获得Ｔ１、Ｔ２和Ｔ３代稳定表达的转化植株．用愈伤组织转化，其转化频率３月龄者为０．４％；２年龄者为零．潮霉素（Ｈｍ）用于对转化幼胚和愈伤组织的筛选，低浓度时不能抑制非转化细胞的生长，高浓度则使细胞受伤害。

小麦与高冰草属间体细胞杂交获可育杂种植株

普通小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．２ｎ＝４２）“济南１７７”与紫外线照射的高冰草（长穗偃麦草Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｅｌｏｎｇａｔｕｍ，２ｎ＝７０）原生质体在ＰＥＧ诱导下融合，获杂种再生植株。取杂种子房诱导产生愈伤组织并再生植株，经染色体和同工酶鉴定，它们仍保留杂种性质。其中两株移栽成活并结实，杂种性质也经表型、染色体、同工酶和ＲＡＰＤ分析得到证明。在Ｆ０和Ｆ１代植株根尖细胞中，均发现高频率地存在着染色体断片；从Ｆ２代花粉母细胞减数分裂的染色体数目及行为发现，杂种细胞染色体数目主要分布在１８Ⅱ～２２Ⅱ，染色体断片发生配对及分离，表明它们是小染色体（ｍｉｎｉｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ）。Ｆ１及Ｆ２代植株比亲本小麦（“济南１７７”）秆茎粗硬、生长健壮，穗大粒大。

农杆菌介导玉米遗传转化的研究进展

植物遗传转化是指以植物器官、组织、细胞或原生质体作为受体,通过某种技术或途径转入外源基因,获得使外源基因稳定表达的可育植株。玉米作为最重要的粮食作物之一,也是现代食品工业。

构建甘蓝型油菜Nsa雄性不育系与NR1恢复系可育后代幼小花蕾的全长cDNA文库

以甘蓝型油菜新型恢复系NR1与不育系杂交后代可育植株幼小花蕾为材料,采用SMART（switching mechanism at 5′end of RNA transcript）技术构建了其全长cDNA文库.原始文库的滴度为5.2×107pfu/mL,重组率达96%.随机挑取21个噬菌斑,利用PCR扩增插入片段,电泳结果显示其长度集中在0.7~2 kb之间,平均大小约为1.1 kb.采用铺平板法扩增文库,扩增后的文库滴度为4.3×1012pfu/mL.结果表明,所构建的文库达到了用于分离目的基因的建库要求,为后续恢复基因等重要功能基因全长cDNA的分离克隆奠定了基础.