核酸可视化检测技术研究进展

传统核酸检测技术依赖于以热循环为基础的聚合酶链式反应和昂贵的检测仪器,不适合现场快速检测。快速检测的发展趋势应是低成本和便携式仪器,结合了等温扩增技术和可视化检测技术的核酸可视化检测在现场快速检测领域有着巨大的发展潜力和应用前景。本文综述了等温扩增技术和可视化检测技术的种类及特点,并对核酸可视化检测技术在现场快速检测中的应用进行了展望。

饲料中肠炎沙门氏菌CPA-LFD检测方法的建立

为建立饲料中肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)的快速检测方法,针对sdfⅠ基因设计交叉引物,优化反应条件,建立饲料中肠炎沙门氏菌的交叉引物等温扩增联合横向流动试纸条可视化检测法(CPALFD)。检测条件:反应时间60 min、反应温度63℃、甜菜碱浓度1.2 mmol/L、Mg^(2+)浓度5.0 mmol/L、BST DNA聚合酶8 U、dNTPs浓度0.3 mmol/L。结果显示:检测限为1.0×10^(1)ng/L,与鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、德尔卑沙门氏菌、单增李斯特菌、志贺氏菌等常见菌无交叉反应;对56份疑似污染样品检测结果显示,CPA-LFD法与国标法和PCR法检测结果一致。研究表明,初步建立饲料中肠炎沙门氏菌的CPA-LFD检测方法。