全身放射治疗对宫颈癌荷瘤小鼠肿瘤微环境免疫细胞诱导协同刺激分子及其配体的影响

目的:探究全身放射治疗对宫颈癌荷瘤小鼠肿瘤微环境免疫细胞可诱导协同刺激分子(ICOS)及其配体(ICOSL)的影响。方法:选取45只BALB/c小鼠,采用数表法随机将其分为对照组、模型组和放疗组,每组15只。对照组不进行治疗;模型组和放疗组小鼠给予皮下注射宫颈癌细胞株建立荷瘤裸鼠模型,建模后第4 d行全身放射治疗。分别在建模后第4 d、6 d、8 d、10 d和12 d检测肿瘤体积,建模后第12 d检测免疫细胞水平。使用Westernblot和qRT-PCR检测ICOS、ICOSL蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的水平。结果:模型组小鼠的肿瘤体积随着建模时间的延长显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(F=129.625,P=0.000);在建模后第6 d、8 d、10 d和12 d,放疗组小鼠的肿瘤体积显著低于模型组,差异有统计学意义(F=56.405,P=0.000);模型组的基质金属蛋白酶2(MMP2蛋白)水平显著高于对照组(F=2.461,P=0.000)、基质金属蛋白酶9(MMP9蛋白)水平也显著高于对照组,差异有统计学意义(F=0.393,P=0.000);放疗组的MMP2和MMP9mRNA水平显著低于模型组,差异有统计学意义(F=1.590,F=0.601;P=0.000);放疗组小鼠的Th1细胞比例显著高于模型组,而Treg和Th2细胞比例显著低于模型组,差异有统计学意义(F=2.427,F=3.349,F=9.951;P=0.000);模型组小鼠的ICOS和ICOSL的水平显著高于对照组,差异有统计学意义(F=2.837,F=3.576;P=0.000);放疗组小鼠的ICOS和ICOSL的mRNA水平显著低于模型组,差异有统计学意义(F=0.793,F=3.750;P=0.000)。结论:全身放射治疗可有效的抑制宫颈癌荷瘤小鼠肿瘤组织的生长,并可下调MMP2和MMP9表达水平,抑制ICOS及ICOSL表达水平,下调Treg细胞和Th2细胞的比例,从而解除免疫逃逸起到抑瘤作用。

协同刺激分子与自身免疫性甲状腺病

自身免疫性甲状腺病(AITD)是T淋巴细胞介导的器官特异性自身免疫病,协同刺激分子在AITD异常免疫反应的启动、维持和效应阶段均发挥重要作用。除了CD28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4-B7分子之外,CD40CD40配体、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)-CD54、可诱导协同刺激分子(ICOS)-ICOS配体以及凋亡分子也参与了介导AITD的免疫功能紊乱。对协同刺激分子的深入研究,可以加深对AITD发生机制的认识,从而为临床提供新的免疫治疗途径。

大疱性类天疱疮患者疱液中趋化因子受体5和可诱导共刺激分子的检测

目的检测CX—C趋化因子受体5（CXCR5）和可诱导共刺激分子（ICOS）在大疱性类天疱疮（BP）患者疱液中的水平，探讨其在BP发病机制中的意义。方法收集15例BP患者疱液为实验组，15例Ⅱ度烧伤患者疱液为对照组，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法分别检测CXCR5及ICOS在两组疱液中的水平。结果实验组及对照组疱液中CXCR5水平分别为（219±145．31）、（147±23．83）ng／L，差异有统计学意义（t=4．577，P〈0．05），但疱液中ICOS水平差异无统计学意义[（30．18±14．86）比（21．43±5．32）ng／L，t=1．628，P〉0．05]。结论CXCR5的表达可能与BP发病有一定关系，而ICOS与BP发病的关系尚需进一步研究。

抗ICOS免疫疗法抑制鼠心脏移植的加速性和慢性排斥反应(英文)

背景:在DA鼠移植给路易鼠模型中,用AdCTLA-4Ig免疫球蛋白阻断B7-CD28共刺激信号可以诱导心脏同种异体移植的长期免疫耐受。然而这种耐受是不完全的,并最终发生排斥。尤其是在心脏移植后功能良好时将供体皮肤移植给受体可以引发加速性移植心脏的排斥反应。目的:重新评价抗ICOS抗体疗法与AdCTLA-4Ig疗法相结合在同种异体移植中的作用。验证抗ICOS疗法无论是否应用AdCTLA-4Ig疗法都起到阻断心脏加速性排斥的作用。方法:在DA(供体)→LEW(受体)鼠之间进行心脏移植手术。心脏移植给予受体鼠一次静脉注射109pfuAdCTLA-4Ig。生存期>50d的受体鼠接受全厚皮片移植到侧胸壁,第50天开始静脉注射抗ICOS抗体(1mg/kg)或者IgG,隔天注射1次,共2周。完全移植排斥被定义为心脏停止跳动,或者组织学上通过单核细胞浸润和心肌细胞坏死的苏木精-伊红染色证实。结果与结论:AdCTLA-4Ig处置受体生存大于100d的心脏切片可见典型的ICOS+单核细胞浸润,并表现出血管病理性改变。AdCTLA-4Ig疗法与抗ICOS抗体结合可介导出对慢性排斥稳定的耐受。抗ICOS疗法明显减少了ICOS阳性炎性细胞浸润,并阻断了皮肤二次移植引发的心脏加速性免疫排斥反应。实验结果表明了ICOS在慢性及急性心脏移植免疫排斥中的重要作用,并揭示出阻断血管化器官同种异体移植慢性排斥的革命性观点。

ICOS基因多态性与中国南方汉族人群多发性硬化的相关性

目的探讨可诱导协同刺激分子(inducible costimulate,ICOS)基因多态性与多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)遗传易感性。方法以来自中国南方汉族人群的83名确诊MS患者和110名非自身免疫性疾病的患者及健康志愿者为研究对象,利用PCR-RFLP技术监测ICOS基因-2394/2119位点酶切多态性。结果 ICOS-2394位点TT基因型频率MS组明显高于对照组(MS33.7%VS对照组10.9%,P<0.001),携带T等位基因可增加MS患病危险(OR=3.482,P<0.001),ICOS-2119位点TT基因型MS组明显低于对照组(MS4.8%vs对照组15.5%,P<0.05)。结论中国南方汉族人群ICOS基因多态性与MS发病相关,该基因可能是MS的易感基因。

人ICOS基因转染细胞对抗体产生的影响

利用RT-PCR方法从扁桃体中激活的T细胞,mRNA中扩增出ICOS cDNA,继而将ICOS基因插入到逆转录病毒载体pGEZ-Term中,用脂质体法将重组逆转录病毒载体与两个辅助病毒载体共同转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清转染L929细胞,经Zeocin筛选获得稳定表达ICOS蛋白的L929细胞株;经RT-PCR、流式细胞仪表型检测证实L929基因转染细胞能稳定表达人ICOS蛋白。利用ICOS和CD40L基因转染细胞联合IL-10以及PWM驱动的B细胞体外培养系统,分析了ICOS在B细胞生长及抗体产生中的作用,实验结果表明,ICOS在PWM体外培养体系中,能有效地促进B细胞生长以及协同IL-10增加IgG的分泌。