台湾泥鳅精子超低温冷冻保存技术研究

为建立台湾泥鳅精子超低温冷冻保存方法,采用显微镜观察精子活率,流式细胞术检测质膜完整性,研究4种稀释液[Hank′s平衡盐溶液(HBSS)、D-15、D-17、鱼用任氏液],5种抗冻剂(甲醇、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺)在4个体积分数(2.5%、5.0%、7.5%、10.0%),不同平衡时间、熏蒸高度和时间、解冻温度和时间对台湾泥鳅精子超低温冷冻保存的影响。试验结果显示:以Hank′s平衡盐溶液为稀释液的精子活率最高,为(45.28±5.75)%;以5%甲醇作为抗冻剂的台湾泥鳅精子活率和质膜完整比例最高,分别为(51.25±5.03)%和(81.70±2.35)%;最佳平衡时间为30 min,最佳熏蒸高度和时间为9 cm和10 min,最后将冻精在37℃水浴锅中解冻10 s的解冻效果更佳。用冷冻复苏的台湾泥鳅精子进行人工授精,受精率达(68.94±6.22)%。综上,用Hank′s平衡盐溶液稀释台湾泥鳅鲜精,与甲醇1∶1混合至终体积分数为5%,放于4℃平衡30 min,而后装入麦管,在液氮面上方9 cm处熏蒸10 min后投入液氮保存可作为台湾泥鳅精子超低温冷冻的保存方法,解冻时在37℃水浴锅中解冻10 s,可获得更好的解冻效果。

低盐驯化对台湾泥鳅抗氧化能力的影响

台湾泥鳅对低盐度具有一定的耐受性,探讨通过低盐驯化来提高其耐盐特性的可行性。实验分为盐度骤变实验(0,4,8,12)和盐度驯化实验(每7 d增加盐度4,分别标记为0,4,4-8,4-12,4-8-12)两个部分,测定其肌肉组织在不同时间点的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及过氧化氢(H_(2)O_(2))与丙二醛(MDA)含量。实验结果表明:(1)盐度骤变实验中,各盐度组的SOD与CAT活性在1 d内呈先升高后下降趋势;盐度8与12组的SOD活性第6 d时显著低于对照组(P<0.05),而CAT活性与对照组没有差异(P>0.05);各个盐度处理组的H_(2)O_(2)含量呈缓慢上升趋势;MDA含量在6 h内快速上升,随后下降并在第3 d时恢复至正常水平。(2)盐度驯化实验中,盐度4-12组的H_(2)O_(2)与MDA含量、SOD与CAT酶活性在1 d内显著高于盐度4-8-12组(P<0.05)。结果表明,盐度升高对台湾泥鳅生理具有显著的影响,并随盐度升高产生了一定的氧化胁迫作用。同时台湾泥鳅可以通过生理调节表现出较强的耐盐能力和适应性;多级盐度驯化有利于缓解高盐度的氧化胁迫。因此,以适当方式提高养殖水体盐度,有利于促进台湾泥鳅适应低盐度水体的能力,提高其在盐碱水体中的成活率和产量,从而为盐碱水体的综合利用提供一个新的养殖品种。

台湾泥鳅腐皮病霍乱弧菌的分离与鉴定

为研究台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)腐皮病的病原,对其腐皮等病变部位进行细菌分离纯化,获得1株优势菌株,命名为P1,利用革兰氏染色观察其形态特征,利用PCR扩增技术、16S rRNA基因测序,得到病原菌的序列,用MEGA软件构建系统进化树,再结合生理生化分析结果鉴定菌种名称。结果发现:革兰氏染色阴性,弧形,两端钝圆;菌体长1~1.5μm,宽度1~1.2μm,有菌丝和鞭毛,16S rRNA基因1 395 bp。建立系统进化树后发现,P1与霍乱弧菌处于同一分支;生理生化实验结果与霍乱弧菌一致,从而鉴定该菌株为霍乱弧菌(Vibrio cholerae)。药敏实验结果表明,该分离菌株对头孢哌酮、卡那霉菌、万古霉素等10种抗生素高度敏感;对四环素中度敏感;对呋喃唑酮、复方新诺明、克林霉素等17种抗生素耐药。实验结果为台湾泥鳅腐皮病的病原鉴定与药物防治提供参考。

饲料中添加黄芪多糖对台湾泥鳅苗生长性能、器官指数及抗氧化能力的影响

文章旨在研究饲料中添加不同含量水平的黄芪多糖对台湾泥鳅苗生长性能、器官指数及抗氧化能力的影响。试验选取270尾健康的台湾泥鳅鱼苗,初始体长(6.23±0.78)cm,体重(2.51±0.08)g。鱼苗随机分为3组,每组3个重复,每个重复30尾。各组台湾泥鳅苗分别饲喂基础饵料+0、200、400 mg/kg黄芪多糖,试验为期62 d。结果表明:1)与0 mg/kg黄芪多糖组相比,200、400 mg/kg黄芪多糖组泥鳅的末重显著提高10.06%、37.74%(P<0.05),特定生长率显著升高15.53%、50.49%(P<0.05),增重率显著升高20.31%、80.81%(P<0.05)。2)3组泥鳅的肝体比、脏体比无显著差异(P>0.05)。3)与0 mg/kg黄芪多糖组相比,400 mg/kg黄芪多糖组总抗氧化能力显著提高(P<0.05),200 mg/kg黄芪多糖组总超氧化物歧化酶活性显著提高(P<0.05),200、400 mg/kg黄芪多糖组溶菌酶活性显著提高(P<0.05),丙二醛显著降低(P<0.05)。由此可见,在饲料中添加400 mg/kg黄芪多糖可提高台湾泥鳅苗的生长性能,改善抗氧化能力。

台湾地区泥鳅双季繁育养成技术试验

台湾地区泥鳅双季繁育养成技术试验的关键之一是提早进行泥鳅的春季繁殖,是通过增温、保温的手段,促使水温回升,增温的起始速度控制在每天升高1℃,达到20℃时。维持稳定,就能如期催产。提前开始亲鱼的产前强化培育,达到泥鳅繁殖时间相应提早的技术措施,采取这项措施.

金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的急性毒性试验

台湾泥鳅是稻鱼综合种养中常见的养鱼品种。为确定真菌杀虫剂金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的安全浓度,本研究进行金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的急性毒性试验。结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的24 h半致死浓度(LC_(50))为93.79 mg/L,48、72 h和96 h的半致死浓度均为86.24 mg/L,金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的毒性可评价为低毒;安全浓度为21.87 mg/L,该安全浓度远高于金龟子绿僵菌CQMa421在水稻上施用的有效杀虫用量。本研究结果初步确定金龟子绿僵菌CQMa421在稻鳅综合种养中可以作为水稻生产的杀虫剂安全使用。

台湾泥鳅与本地泥鳅繁育、性腺发育及生长的比较

为了给台湾泥鳅的规模化养殖提供理论依据和技术参考,选用台湾泥鳅和本地泥鳅进行人工催产、孵化和培育,并且在不同生长阶段比较2种泥鳅的生长指标和性腺发育状况.结果表明:(1)在整个实验阶段,台湾泥鳅的体质重和全长均显著高于本地泥鳅,而且培养时间越长,二者差异越大;(2)台湾泥鳅的性腺成熟早,3月龄时性腺就已经发育成熟,本地泥鳅的性腺则发育缓慢,不论是雌性还是雄性,性腺重均远远低于同阶段的台湾泥鳅.由此认为,台湾泥鳅无论是生长速率还是性腺发育情况都明显优于本地泥鳅,适合进行规模化养殖.

台湾泥鳅幼鱼红点病病原的分离鉴定及药敏分析

为研究台湾泥鳅红点病病原,采用细菌分离、人工感染试验以及生化鉴定和分子鉴定方法确定病原菌,并对病原菌进行药敏分析,自体长约3cm的台湾泥鳅幼鱼体内分离到致病菌株FZ2N。该菌株对泥鳅的半致死剂量为1.1×10~3 cfu/g,为强致病菌;经生理生化、16S rDNA基因序列测序鉴定为维氏气单胞菌。选取18种抗生素进行药敏检测,试验结果表明,该菌株对喹诺酮类、硝基呋喃类、氨基糖苷类、大环类脂类药物、青霉素类派拉西林敏感或中介敏感;对第一、第二、第三代头孢类,四环素类,多肽类,林可酰胺类药物耐药。

饲料蛋白水平对台湾泥鳅幼鱼生长、饲料利用率及免疫酶活性的影响

本研究旨在评价饲料蛋白水平对台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp)幼鱼生长性能、饲料利用率及免疫酶活性的影响。选用初始体重为(8.57±0.35)g的台湾泥鳅720尾,随机分成4组,每组设置3个重复,每个重复60尾鱼,分别投喂蛋白水平为25%、30%、35%和40%的实验饲料,养殖时间为60 d。结果显示,随着饲料蛋白水平的升高,台湾泥鳅幼鱼末重(FW)、特定生长率(SGR)和饲料效率(FER)先上升,饲料蛋白水平≥35%后,进入平台期。蛋白质效率(PER)、蛋白质沉积率(PRE)和成活率(SR)均呈先升高后降低的变化趋势。摄食率(FR)则呈逐渐降低的趋势。基于FW、SGR和FER的折线模拟结果表明,台湾泥鳅幼鱼达到最佳生长速度及饲料效率的饲料蛋白水平为34.57%~35.37%。通过二次多项式回归分析可知,台湾泥鳅幼鱼蛋白利用率最高时的饲料蛋白水平为33.61%~34.68%。随着饲料蛋白水平的升高,台湾泥鳅幼鱼超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升高后趋于稳定的变化趋势,过氧化氢酶(CAT)活性呈先升高后降低的变化趋势;谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)均呈先升高后降低的变化趋势。由此得出,适宜的饲料蛋白水平可促进台湾泥鳅幼鱼的生长,提高饲料效率,增强免疫酶活性。在本实验条件下,综合考虑生长性能、饲料利用率及免疫酶活性,台湾泥鳅幼鱼饲料最适蛋白水平为34.68%~35.37%。

台湾泥鳅人工繁殖及早期发育的研究

为了解台湾泥鳅的早期发育情况，对其进行人工催产，使用解剖镜观察并记录其早期发育的形态特征和发育过程。观察结果：台湾泥鳅的受精卵为半黏性卵，膜径约0．9mm；胚胎发育包括受精期、卯裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期和出膜期等7个阶段；在21℃水温条件下，受精卯约26h孵化出仔鱼，初孵仔鱼长约2．1mm。3日龄仔鱼开口，10～15日龄时鳍条逐渐形成，17日龄时出现鳞片进入稚鱼期。结果表明，台湾泥鳅的早期发育与大鳞副泥鳅较为相似，与泥鳅的早期发育略有不同。

台湾泥鳅死亡致病菌的分离鉴定及药敏试验

为确定捕捞转场后造成台湾泥鳅(Paramisgurnus dabryanus ssp.Taiwan)死亡的病原,本试验对台湾泥鳅进行病理解剖、病原分离。对分离菌进行形态学观察、生理生化特性测定及16S rDNA基因测序鉴定,并进行人工感染试验、药敏试验。结果显示,从泥鳅肝脏、脾脏、肾脏及肠道组织中分离到形态一致的优势菌株,经纯化保存,命名为XJC。菌株XJC葡萄糖发酵、D-葡萄糖、鸟氨酸、苯丙氨酸及尿素利用阳性,其他所测生化指标均为阴性,与摩氏摩根菌(Morganella morganii)一致;16S rDNA基因序列与摩氏摩根菌相似性达99.6%,被鉴定为摩氏摩根菌。感染试验结果表明,菌株XJC对台湾泥鳅具有致病性,被感染的泥鳅出现了肠道充血典型病理变化。从发病泥鳅体内分离到与菌株XJC一致的菌株,可以判定菌株XJC是泥鳅病原菌。药敏试验结果表明,菌株XJC对氨基糖苷类、喹诺酮类及第三代头孢类药物表现出敏感,对四环素、青霉素、红霉素、多肽类、呋喃唑酮、洁霉素及第一、第二代头孢类药物均等表现耐药,生产中可选用氨基糖苷类、喹诺酮类药物进行摩氏摩根菌疾病的防治。本试验结果可为台湾泥鳅摩氏摩根菌病诊断和防治提供参考。

腐植酸钠对台湾泥鳅幼鱼生长性能及抗氧化的影响

采用为期66 d的饲养试验,探讨腐植酸钠对台湾泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)幼鱼生长性能及抗氧化的影响。450尾初始体质量为(3.03±0.15)g,初始体长(7.29±0.35)cm的幼鱼,随机分为5组,每组3重复,每重复30尾鱼,分别饲喂基础饲料中使用了0(对照组,C组)、5.0%(D5组)、10.0%(D10组)、15.0%(D15组)和20.0%(D20组)腐植酸钠的饲料。结果表明:①在本试验条件下,饲料使用腐植酸钠均提高了台湾泥鳅幼鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、肥满度(CF),降低了饲料系数(FCR),使用量达到20.0%时,这些指标与C组的差异显著(P<0.05)。各试验组幼鱼肝脏中CAT活性显著高于对照组(P<0.05),且D15、D20组的显著高于D5组和D10组(P<0.05);D10、D15、D20组幼鱼肝脏中GSH-Px活性显著高于C组(P<0.05);各试验组幼鱼肝脏中的SOD活性和T-AOC含量均高于C组(P>0.05);D20组幼鱼肝脏中MDA含量显著低于其他各组(P<0.05)。因此,腐植酸钠可促进台湾泥鳅幼鱼生长,提高机体抗氧化能力,在本试验条件下,饲料中使用20.0%腐植酸钠效果最好。

贵州喀斯特地区台湾泥鳅人工繁殖技术初步研究

为了探讨台湾泥鳅在贵州喀斯特地区人工繁殖技术状况,试验采用人绒毛膜促性腺激素（HCG）、多潘立酮注射液（DOM）、注射用促黄体素释放激素A2（LHRH-A2）合剂对台湾泥鳅进行人工繁殖。结果表明：每尾台湾泥鳅注射400 IU HCG＋4 000μg DOM＋15μg LHRH-A2为较理想的催产激素配比,三批次繁殖的平均催产率为98.0%,平均受精率为90.1%,平均孵化率为88.7%,平均出苗率为87.2%。雌雄比为5.4∶1时,催产率最高,为98.5%;雌雄比为5.7∶1时,受精率最高,为91.2%。说明台湾泥鳅在该地区繁殖效果良好。

“台湾泥鳅”人工繁殖试验

2014年5月17日-5月23日,在浙江省湖州对"台湾泥鳅"人工繁殖技术进行了初步试验。两次试验累计繁育"台湾泥鳅"水花850万尾,孵化率达到80%。通过"台湾泥鳅"激素配方、注射剂量、效应时间等问题的探索,初步得出浙江省地区"台湾泥鳅"繁殖时间为5月份和适宜水温为24℃。还讨论了"台湾泥鳅"的种质、雌雄鉴别、水温及积温对其人工繁殖时间的影响等。

台湾泥鳅人工繁育技术初步研究

为了探讨台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)的人工繁育技术,为该品种在上海的规模化养殖提供理论依据和技术参考,分别对1龄和2龄的台湾泥鳅亲本进行人工催产,并在圆形流水孵化系统中进行了受精卵孵化和仔鱼培育试验。催产素为促黄体素释放激素类似物(LHRH-A_2)和马来酸地欧酮(DOM),剂量为DOM 0.5 mg+LHRH-A_22μg/尾,共催产台湾泥鳅384尾。结果表明:2龄台湾泥鳅在水温22.3℃的效应时间为17 h,催产率为92.7%,受精率为80.8%,获受精卵36.9万粒,孵化率为67%,繁育水花苗约20万尾;1龄台湾泥鳅在水温22.3℃的效应时间为17~21 h,催产率为67.1%,受精率为70.8%,获受精卵34.7万粒,孵化率为57.7%,繁育水花苗约20万尾。仔鱼在容量300 L的循环水孵化桶中培育30 d后,体长约为3 cm。

饲料中添加黄芪多糖和蝇蛆粉对台湾泥鳅生长性能的影响

在饲料中添加黄芪多糖和蝇蛆粉饲喂台湾泥鳅。将450尾健康的初始体重为(0.58±0.03) g的鱼苗随机分为3组。分别在饲料中添加0g/kg、25g/kg和50g/kg蝇蛆粉,每组3个平行,每个平行组50尾鱼。将270尾健康的初始体重为(2.37±0.14) g的鱼苗随机分为3组。分别在投喂饲料中添加0mg/kg、200mg/kg和400mg/kg黄芪多糖,每组3个平行,每个平行组30尾鱼。分别饲养35d,测定其终末体重、特定生长率、增重率、成活率。结果表明饲料中添加25g/kg和50g/kg蝇蛆粉组显著高于未添加组台湾泥鳅苗种的终末体重、特定生长率、增重率和成活率;饲料中添加黄芪多糖200mg/kg与400mg/kg组与未添加黄芪多糖对照组的台湾泥鳅的成活率无显著性差异(P>0.05),200mg/kg黄芪多糖组与400mg/kg黄芪多糖组有显著性差异(P<0.05),与0mg/kg黄芪多糖对照组无显著性差异(P>0.05)。由此得出饲料中添加蝇蛆粉对台湾泥鳅苗的生长有促进作用,饲料中适量添加黄芪多糖对台湾泥鳅苗的生长有促进作用,过量添加会抑制台湾泥鳅苗的生长。

如何看待当前台湾泥鳅的繁养殖热潮?

台湾泥鳅其实是大鳞副泥鳅的改良品种,是将其与我国台湾省及泰国、缅甸等东南亚诸国的泥鳅品种进行种间杂交、选育而成的泥鳅新品种,取名为＂TW-6台湾龙鳅＂。2012年由台湾地区直接引进大陆,具有个体大、生长速度快、产量高、不钻泥、雌雄个体大小基本无差异、免疫力强、饵料系数低等特点,3年间一下风靡全国有其特定背景与意义。

台湾大泥鳅池塘养殖技术要点

2013年，在杭州萧山东海养殖有限责任公司进行了台湾大泥鳅养殖试验。结果发现，台湾大泥鳅最大特点是生长速度快，当年养殖个体体重可达100～200 g。台湾大泥鳅最适水温为25～28℃，摄食范围广，耐低氧，适应性强，喜好偏酸性环境，既适合池塘高密度养殖，也适合循环水集约化养殖，是一种养殖前景乐观的新品种。

台湾泥鳅池塘高产养殖技术

本文探索了台湾泥鳅最佳养殖模式：养殖泥鳅的每口池塘面积以1200～1668m2为宜．水深在1．2～1．5m左右；池塘四周一定要有良好的防逃防敌害设施，塘坝坚固，池顶必须盖上天网；每池装功率1．5kw增氧机一台；选择体长3．5cm以上的健壮台湾泥鳅纯种作鳅种，放养量以4万尾／667m2为宜，放养时间在气温较高的5月底前后为好；投喂开口料半月后，投喂膨化饲料最佳。

低温胁迫对台湾泥鳅抗氧化系统与能量代谢的影响

为了研究低温胁迫对台湾泥鳅抗氧化系统与能量代谢的影响,将台湾泥鳅在10℃水中暂养1周后分别放入3个温度组(4℃、10℃、16℃)各30尾,温度胁迫后于0 h、6 h、12 h、24 h和48 h进行解剖采肝脏组织,检测氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-PX)活力,丙二醛(MDA)含量,三磷酸腺苷(ATP)含量共5个指标。实验结果表明,不同温度组间,各指标差异显著。4℃和16℃组中SOD活性先降后升,10℃组中SOD活性较平稳。4℃组中CAT活性变化与SOD相似,10℃和16℃组组中CAT活性先降后升趋稳。4℃组中GSH-PX活性变化与SOD、CAT保持一致,10℃和16℃组中GSHPX活性先升后降,分别于12 h、24 h时达最大值。4℃组中MDA含量先升后降趋稳,10℃组中MDA含量上升趋稳。16℃组中中MDA含量呈波动性下升,至48 h时达最低值。这些均说明低温下泥鳅机体受损伤严重,在秋冬季节应采取相应保护措施。4℃组中T-ATP含量先降后升,48 h时高于0 h时含量。10℃和16℃组中T-ATP含量呈上升趋势。说明台湾泥鳅的自我修复能力较强。