用台盼蓝染色法对C_(96-3)菌丝发酵液体外抗肿瘤作用的探索

目的 :对 C96- 3 菌丝发酵液体外抗肿瘤作用进行研究。方法 :台盼蓝染色法。结果 :C96- 3 菌丝发酵液对瘤细胞具有直接细胞毒作用 ,对 X5563 、Ca761 / L、YAC- 1、H2 2 、K562 抑瘤率为 5 0 %～ 10 0 %。结论 :C96- 3 菌丝发酵液含有直接杀伤肿瘤细胞的活性物质。

实时无标记细胞分析系统与台盼蓝染色法分析双酚A对小鼠睾丸间质细胞毒性作用的比较

目的分析实时无标记细胞分析系统与台盼蓝染色法分析双酚A(BPA)对小鼠睾丸间质细胞毒性作用,以确定最佳实验方案。方法采用实时无标记细胞分析系统及台盼蓝染色法测定BPA对小鼠睾丸间质细胞的细胞毒性,计算其IC_(50)。结果实时无标记细胞分析法及台盼蓝染色法结果表明,不同浓度BPA使小鼠睾丸间质细胞的活力下降,1 000μmol/L时下降最为明显,IC_(50)分别为704、745μmol/L。但实时无标记系统能够实时监测细胞生长的动态生物学反应。结论实时无标记分析法能够更直观、准确地观察细胞生长情况,弥补台盼蓝染色法的缺点,是一种新的研究细胞毒性的实验方法。

锯缘青蟹精子低温冷藏及精子活力的染色法评价

采用天然海水配制的台盼蓝染色液和曙红B染色液对低温冷冻的锯缘青蟹精子的活力进行评价研究 .结果表明 ,用这两种染色液染色死活精子呈现出明显不同的特征 ,进而以无钙离子人工海水 (Ca2 + FSW )为冷冻基础液 ,分别用 1 0 %(V/V)甘油、5%(V/V)二甲亚砜 (DMSO)作冷冻剂 ,进行了 4℃液态低温保存的精子实验 ,对照组不加冷冻剂 ,以Ca2 + FSW等量代替 ,同时采用染色法对保存精子活力进行评价 ,结果显示台盼蓝不适宜于评价甘油组精子的活力 ,但却能评价对照组和二甲亚砜组 .在 2 4h内 ,二甲亚砜组精子的存活率达 58.7%,而对照组仅为 3 0 .2 %.可见 ,染色法可以作为低温冷冻保存的锯缘青蟹精子活力评价的一种有效方法 .

受精鸡卵尿囊绒膜试验作为眼刺激试验替代方法的研究

目的 探讨受精鸡卵尿囊绒膜试验 (HET CAM)是否可作为体内眼刺激试验 (Draizetest)的一种替代方法。方法 用HET CAM的两种方法 ,即显微镜观察 (HET CAMscore)和台盼蓝染色法 (CAM TB)对 14种化学物的眼刺激性进行检测 ,并与Draizetest两种评分标准 ,即最大平均值 (MAS)和 2 4h作用值 (S2 4 )结果进行相关性比较。结果 HET CAMscore与MAS和S2 4的相关系数分别是 0 84 7和 0 779,CAM TB与MAS和S2 4分别是 0 86 2和 0 831。结论 HET CAM可用于替代Draizetest。

脑源性神经营养因子对缺氧胚脑皮质神经元的保护作用

目的 通过胚鼠皮质神经元的体外培养 ,观察遭受缺氧刺激时 ,脑源性神经营养因子 (BDNF)对神经元的保护作用。方法 用台盼蓝染色法动态观察培养神经元的存活率及加入BDNF对生理培养状态的皮质神经元的作用 ;同时用四氮唑盐 (MTT)比色法观察不同缺氧时间实验组及对照组神经元活性的差异。结果 BDNF对正常皮质神经元有维持存活效应 ;对缺氧神经元有确切保护作用 ,该保护作用有时间依赖性 ,缺氧前2 4h加入BDNF对缺氧神经元的保护效果较缺氧即刻加入为好。结论 体外实验证实BDNF可维持皮质神经元存活 。

半乳糖受体介导的c-myc反义核酸联合三氧化二砷对人肝癌细胞的增殖抑制作用

目的 探讨Gal-PEI-c -mycASODN与三氧化二砷 (As2 O3 )联合应用对人肝癌Bel- 74 0 2细胞增殖的影响。方法 As2 O3 分别或联合Gal-PEI-c -mycASODN与人肝癌Bel- 74 0 2细胞共孵育 4 8h ,台盼蓝染色法检测细胞增殖的变化 ,流式细胞仪分析细胞亚二倍体百分率。结果 0 5 μmol/LAs2 O3 和Gal-PEI-ASODN(含A SODN 0 12 5 μmol/L)均不能抑制Bel- 74 0 2细胞增殖 ,0 5 μmol/L的As2 O3 联合Gal-PEI-ASODN(含ASODN 0 12 5μmol/L)对Bel- 74 0 2细胞增殖有明显抑制作用 (P <0 0 5 ) ,与 4 μmol/LAs2 O3 产生的抑制作用相当 ;1 0 μmol/LAs2 O3 不引起Bel- 74 0 2细胞凋亡 ,但联合Gal-PEI-ASODN(含ASODN 0 2 5 μmol/L)即导致Bel - 74 0 2细胞凋亡。结论 Gal-PEI-ASODN联合As2 O3 能明显提高肝Bel- 74 0 2细胞对As2 O3 的敏感性 ,抑制Bel- 74 0 2细胞增殖 ,促进细胞凋亡。

3种临床常用冠桥材料对体外培养鼠成纤维细胞毒性的比较

目的:观察比较临床常用3种暂时冠桥材料的细胞毒性。方法:应用体外细胞培养琼脂覆盖法和台盼蓝染色法观察细胞反应和细胞染色情况,以评价自凝塑料、热凝塑料、DMG-TEMP树脂3种常用暂时冠桥材料的细胞毒性。结果:3种常用暂时冠桥材料周围和材料下褪色区范围及褪色区内细胞反应评价分别是自凝塑料2/3,中度细胞毒性;热凝塑料1/0,极轻微细胞毒性;DMG树脂1/2,轻中度细胞毒性。台盼蓝染色结果显示,自凝塑料组细胞染色最多(P<0.05),热凝塑料组与DMG树脂组细胞染色无显著差别(P>0.05)。结论:自凝塑料的细胞毒性为中度,临床对活髓牙行暂时冠桥修复时应慎用此材料。

嗜酸乳杆菌对生殖道上皮细胞的黏附和黏附拮抗作用的研究

目的 比较热灭活状态和活菌状态乳酸杆菌对生殖道上皮细胞的黏附性及其对生殖道常见致病菌白色念珠菌和加德纳菌的黏附拮抗作用。方法 运用光镜和电镜分析嗜酸乳杆菌活菌和热灭活两种生物状态对刮取的阴道上皮细胞和传代培养的宫颈上皮细胞系HeLa细胞的黏附指数以及经两种生物状态嗜酸乳杆菌拮抗作用后致病菌的黏附指数的变化 ,并用台盼蓝染色法比较二者黏附HeLa细胞后对细胞存活率的影响。结果 两种生物状态的嗜酸乳杆菌对刮取的阴道上皮细胞的黏附不存在显著性差异 ,而热灭活状态对HeLa细胞的黏附指数显著高于活菌状态 ,两种生物状态的嗜酸乳杆菌对白色念珠菌和加德纳菌均有黏附抑制作用 ,热灭活状态嗜酸乳杆菌黏附HeLa细胞在一定时间内不降低细胞存活率。结论 经热灭活的嗜酸乳杆菌对生殖道上皮细胞有较强的黏附性并可对女性生殖道常见致病菌发挥黏附拮抗作用。

复方苦参注射液与5-氟尿嘧啶对大肠癌细胞凋亡的影响

目的探讨复方苦参注射液与5氟尿嘧啶对大肠癌LoVo细胞生长抑制及诱导凋亡的影响。方法台盼蓝染色法测定药物对LoVo细胞抑制作用与时间和剂量的关系,用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳对细胞凋亡进行检测。结果台盼蓝实验表明,经40μg/L复方苦参注射液单独处理细胞,LoVo细胞增殖的抑制率24h,12.8%;48h,25.4%;72h,42.2%。12.5mg/L5Fu单独处理的LoVo细胞,其增殖抑制率24h,16.3%;48h,23.1%;72h,29.3%;而当两者合用时,对LoVo细胞增殖的抑制率24h,26.8%;48h,72.3%;72h,84.6%。复方苦参注射液和5Fu对LoVo细胞的生长均有抑制作用,并诱导发生凋亡。实验范围内其细胞凋亡成时间与剂量依赖关系。并且复方苦参注射与低浓度的化疗药物有协同作用,可产生较强的抑制细胞增殖的作用。结论复方苦参注射具有直接的抗肿瘤作用,并且具有增强5Fu化疗药物作用的功效。

原代海马神经元兴奋毒性模型的建立及存活率的检测与意义

目的 探讨和观察药物对神经元的损伤及保护作用。方法 在体外进行海马神经元原代培养并建立谷氨酸兴奋毒作用模型 ;采用台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶检测和程序性细胞死检测技术进行原代培养海马神经元存活率检测。结果 神经元的损伤程度与谷氨酸浓度相关 ,NMDA受体拮抗剂MK 80 1对谷氨酸引起神经元死亡有明显的保护作用。结论 谷氨酸通过NMDA受体引起细胞损伤 。