桦木酸对右旋糖酐硫酸钠诱导的小鼠结肠炎的保护作用

目的:研究桦木酸(betulinic acid,BA)对右旋糖酐硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导结肠炎的影响。方法:将84只C57BL/6小鼠随机分为7组,即对照组,BA组(0.5 mg/kg),DSS组(质量分数4%),BA低、中、高剂量(0.25、0.5、1 mg/kg)+DSS组,5-氨基水杨酸(5-aminosalicylic acid,5-ASA)(50 mg/kg)+DSS组。BA或5-ASA连续灌胃14 d,从第8天开始每天饮用4%DSS水溶液,连续7 d诱导小鼠结肠炎,随后测量小鼠结肠长度,苏木精&伊红染色和透射电镜观察结肠病理变化与超微结构,免疫荧光染色法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,实时聚合酶链式反应仪检测结肠炎性因子水平以及TUNEL染色检测细胞凋亡。结果:DSS诱导结肠的长度显著缩短(P<0.05),肠道隐窝排列紊乱且表面不规则,杯状细胞数量减少,肠道紧密连接不完整,微绒毛稀疏;同时,DSS诱导ROS累积和炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和IL-10 mRNA水平极显著性上调(P<0.01),下调肿瘤坏死因子-αmRNA的表达(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。然而,BA或5-ASA预处理均能逆转这一趋势,并且BA的作用效果优于5-ASA。结论:BA通过改善肠道结构的完整性,减少ROS产生和改善炎症反应,抑制细胞凋亡,从而对DSS诱导的结肠炎具有预防性的保护作用。

溃疡性结肠炎大鼠模型不同建立方式比较

目的对比分析溃疡性结肠炎大鼠三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇模型和右旋糖酐硫酸钠(DSS)模型的差异性。方法18只雄性Wistar大鼠随机分为TNBS/乙醇组(TNBS/乙醇建模)、DSS组(DSS建模)、健康对照组(不做处理)各6只。建模后7 d剖杀取材,行疾病活动指数(DAI)评分,对大鼠结肠组织进行损伤评价及结肠组织病理学苏木素-伊红(HE)染色切片,过碘酸雪夫(PAS)染色的观察。结果TNBS/乙醇组和DSS组DAI评分明显高于健康对照组(P<0.01)。而TNBS/乙醇组和DSS组DAI评分差异无统计学意义(P>0.05)、TNBS/乙醇组死亡2只,较DSS组和健康对照组死亡率显著增加(P<0.01)、结肠损伤评价显示TNBS/乙醇组和DSS组均对结肠黏膜造成损伤,TNBS/乙醇组损伤较重、结肠组织病理学观察HE染色显示健康对照组黏膜结构完整,无炎症,杯状细胞丰富,TNBS/乙醇组和DSS组黏膜损伤,炎症浸润,TNBS/乙醇组炎症浸润较深,范围较广、结肠组织病理学观察PAS染色显示健康对照组可见大量染色阳性的含黏液杯状细胞,TNBS/乙醇组和DSS组黏液素较健康对照组明显减少(P<0.05);TNBS/乙醇组和DSS组未见明显差异(P>0.05)。结论TNBS/乙醇和DSS均可建立溃疡性结肠炎模型,且模型在组织病理学和症状特征等方面具有差异性。

胡椒碱对DMH/DSS诱导实验性结肠癌变的影响及其机制

目的探讨胡椒碱对1,2-二甲基肼(DMH)/右旋糖酐硫酸钠(DSS)诱导实验性结肠癌肿瘤细胞生长和增殖的影响及其具体机制。方法将36只小鼠分为对照组、模型组和胡椒碱组,每组12只。对照组给予生理盐水灌胃;模型组和胡椒碱组通过DMH/DSS复合法建立实验性结肠癌模型后分别给予生理盐水和胡椒碱3.6 mg/(kg·d)灌胃。观察肿瘤负荷和体积,HE染色法观察小鼠结肠的组织学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RAS/PI3K/AKT相关通路蛋白的表达。结果模型组体重增加值及cleaved PARP、cleaved caspase-3表达水平均显著低于对照组(均P<0.05),Bcl-2、Bax、pan-RAS、p-MEK、p-ERK、PI3K、p-AKT、NF-κBp65、c-Myc、cyclin D1蛋白表达水平均显著高于对照组(均P<0.05)。胡椒碱组体重增加值及cleaved PARP、cleaved caspase-3表达水平均显著高于模型组(均P<0.05);Bcl-2、Bax、pan-RAS、p-MEK、p-ERK、PI3K、p-AKT、NF-κBp65、c-Myc、cyclin D1蛋白表达水平均显著低于模型组(均P<0.05)。结论胡椒碱对DMH/DSS诱导的实验性结肠癌发生具有抑制作用,其抑制作用可能涉及到RAS/PI3K/AKT信号轴。