乌饭树再生及遗传转化体系的建立

本研究以乌饭树叶片为材料,筛选诱导叶片再生不定芽的植物生长调节剂种类和浓度,建立了乌饭树再生体系。此外,确定了用于筛选转基因材料的抗生素浓度、侵染乌饭树叶片的根癌农杆菌菌液浓度和侵染时间,建立了乌饭树遗传转化体系。结果表明:(1) 乌饭树叶片不定芽再生的最佳培养基配方为:WPM 0.5 mg/L TDZ 4 mg/L ZT;(2) 乌饭树叶片预培养5 d,筛选用抗生素潮霉素浓度为5 mg/L,农杆菌抑制剂头孢霉素浓度为350 mg/L,共培养6 d,农杆菌浓度为0.8,侵染时间为60 min时,遗传转化效率最高。上述结果为在乌饭树中进行基因功能验证和分子育种提供了理论基础和技术支撑。

‘高原之火’北美海棠叶片组培快繁再生体系

以‘高原之火’北美海棠叶片为外植体,研究‘高原之火’北美海棠叶片愈伤组织的诱导及不定芽再生技术体系,并对不定芽发生过程进行组织细胞学观察。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.15 mg·L^-1 TDZ+1.5 mg·L^-1 NAA,诱导率高达80%,愈伤组织不定芽分化率达60%,每块愈伤组织芽数最高达18.8个;不定芽增殖与壮苗最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1 BA+0.5 mg·L^-1 IBA及1/2MS+1.0 mg·L^-1 BA+1.0 mg·L^-1 IBA,增殖系数达3.4,每瓶正常不定芽数达10.2个;芽苗在1/4MS+1.0 mg·L^-1 IBA+0.15%活性炭培养基上不定根诱导率最高,达86.7%;生根小苗炼苗移栽后成活率达80%;叶片不定芽诱导过程的组织细胞学观察表明,不定芽的发育起源为混合型,一种为外起源,一种为内起源,内起源为主要方式。

草莓叶片离体再生技术的研究

以红颊、章姬、丰香叶片为试材,对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究,建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明,基因型、不同激素种类和配比、叶龄直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素,叶片四周刻伤处理能有效地提高不定芽的诱导率,适度的暗培养有利于不定芽的发生。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ2～3mg/L较理想,芽伸长的理想培养基为MS+6-BA0.3～0.5mg/L,生根培养基以1/2MS+I-BA0.3mg/L较适宜,移栽成活率可达90%以上。

草莓叶片离体培养技术

以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材，对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究，建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明，基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素，不同激素配比是不定芽产生的关键因素。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS＋TDZ2-3mg／1较理想，芽伸长的理想培养基为MS＋6-BA0．3-0．5mg／l，生根培养基以1／2MS＋IBA0．3mg／1较适宜，移栽成活率可达90％以上。