蚕豆锈病的离体叶片人工接种技术研究及微生物源先导化合物筛选

蚕豆锈病由蚕豆单孢锈菌(Uromyces fabae de Bary)引起,是一种常见专性寄生的真菌病害,其侵染和传播方式与大豆锈病(Phakopsora pachyrhiri Syd.)相同,主要以夏孢子传播。因此常作为大豆锈病研究的模式靶标。又因其无法在人工培养基上生长繁殖,而基于植株的筛选方式难以适应先导化合物筛选。该文针对蚕豆锈病离体叶片人工接种技术进行了探索,对影响蚕豆锈病侵染的主要因素进行了研究,建立了基于离体叶片法筛选的先导化合物筛选方法。采用离体叶片孢子悬浮液喷雾法对1522份真菌固体发酵提取物和放线菌液体摇瓶发酵提取物进行了初筛,筛选出具有杀菌活性的提取物90份。对经过HPLC纯化后的540个组分进行复筛,获得具较高杀菌活性的化合物3个。筛选结果表明该筛选方法能稳定、高效地进行先导化合物筛选。

小麦白粉病离体叶片法生物测定技术研究

小麦白粉病是由子囊菌亚门真菌小麦白粉病菌(Blumeria graminis)引起的一种世界性小麦病害。小麦白粉病菌无法在人工培养基上生长繁殖,基于植株的筛选方式难以适用于室内高通量筛选。试验通过分析小麦白粉病在室内植株上的发病特点,进行了离体叶片人工接种方法的探索,对影响小麦白粉病侵染的主要因素进行了研究,建立了基于离体叶片法和低压微量喷雾法的高通量筛选方法。利用该方法对2种抗真菌剂进行了室内生物测定试验,同时对480份放线菌液体摇瓶发酵提取物进行了杀菌活性筛选。结果表明,该方法能稳定、高效地进行先导化合物筛选。