叶盘共培养法介导的基因转移与两种转基因植物的鉴定

本文以共整合型Ti质粒载体pGV3850:1103neo中pNOS-NPTⅡ(Km^R)嵌合基因为遗传标志,应用改良的叶盘共培养法对烟草和番茄进行了遗传转化。通过施加选择压力,筛选出具有Km^R表型的愈伤组织,并由此获得转基因烟草和番茄植株。通过胭脂碱的高压电泳检测和生物素探针的尼龙膜印迹杂交,分别从侧面(间接)和正面(直接)证实了Km^R基因在上述两种转化细胞中的整合和表达。还探讨了转化、培养和筛选过程中的一些细节,并对改进技术的原理及其效果进行了讨论。

抗癌基因p53导入番茄的初步研究

通过根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导 ,利用特异表达的phaseolin基因的启动子与人类野生型抗癌基因p5 3构建嵌合基因 ,对‘美味樱桃’番茄进行遗传转化 ,获得转化番茄再生植株。通过组织化学法、PCR扩增及Southern杂交检测 ,证明人类野生型p5