衣藻叶绿体表达体系的建立

构建了甲型肝炎病毒VP3P1区和丙型肝炎病毒C区融合抗原基因的衣藻叶绿体转化载体pACⅢ ,并用基因枪法将其导入衣藻叶绿体内 ,转化子通过抗性培养和暗培养筛选 ,经PCR ,Southernblotting ,Northernblotting和Westernblotting鉴定 ,证实融合抗原基因已整合于衣藻叶绿体基因组中的chlL结构基因位置 ,并在衣藻叶绿体本身的双启动子 5′chlL 5′atpA调控下 ,得到正确的转录和翻译 ,SDS PAGE凝胶扫描分析表明 ,融合抗原蛋白占衣藻可溶性总蛋白的 5 .31 % .

丙肝病毒融合抗原基因导入烟草叶绿体及转化株同质化的研究

植物生物反应器的研究已成为当前基因工程领域的一个新生长点。本实验用 PCR方法 ,从丙型肝炎病毒 c DNA文库中克隆了非结构 NS3区基因片段及核心抗原 C区基因片段 ,并在两段基因间加入连接肽 SPGS的密码子序列 ,构建成融合抗原基因 NS3- C。将该融合基因转入烟草叶绿体转化及表达载体中 ,通过基因枪转化法得到转基因植株。对 NS3- C融合基因转化植株进行 PCR及 Southern杂交试验分析 ,证明外源基因已整合到烟草叶绿体基因组中 ;对转化植株的 Southern杂交试验还表明 ,通过不断地分化筛选培养 。