孕妇血清可溶性血管内皮生长因子受体-1、叶酸水平与慢性胎儿宫内窘迫的相关性分析

目的分析孕妇血清可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、叶酸水平与慢性胎儿宫内窘迫的相关性。方法选取2023年6月—2023年12月南通市妇幼保健院接收的103例孕妇。将出现胎儿慢性宫内窘迫的48例孕妇作为观察组,其余55例作为对照组。收集两组孕妇的基本资料及超声检查结果。比较两组胎儿脐动脉血流参数[搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩末期最大血流速度/舒张末期最大血流速度(S/D)],检测两组孕妇分娩前的sFlt-1和叶酸水平,以及新生儿脐动脉血乳酸含量和氧化产物[8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)、丙二醛(MDA)]。通过Pearson法分析sFlt-1、叶酸与胎儿脐动脉血流参数、新生儿脐动脉血乳酸含量及氧化产物的相关性,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价孕妇sFlt-1、叶酸对发生胎儿功能窘迫的预测价值。结果观察组PI、RI、S/D均高于对照组(P<0.05)。观察组分娩前血清sFlt-1水平高于对照组(P<0.05),叶酸水平低于对照组(P<0.05)。观察组脐动脉血乳酸、8-OHDG和MDA水平均高于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,胎儿脐动脉血流参数、新生儿动脉血乳酸和氧化产物均与sFlt-1水平均呈正相关(P<0.05),与叶酸水平呈负相关(P<0.05)。ROC曲线结果表明,孕妇sFlt-1、叶酸联合预测胎儿宫内窘迫的曲线下面积为0.932(95%CI:0.883,0.982),敏感性为89.6%(95%CI:0.773,0.965),特异性为92.7%(95%CI:0.824,0.980)。结论分娩前检测孕妇血清sFlt-1及叶酸水平对预测胎儿慢性宫内窘迫的发生有重要价值。

叶酸受体抑制剂在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌一直是临床治疗的难点,特别是疾病进展到晚期耐药阶段,其死亡率高居女性生殖系统恶性肿瘤之榜首。现在靶向治疗是卵巢癌治疗最有前景的方向之一,有可能在最大化抗肿瘤疗效的同时最大限度地减少治疗相关的毒性。叶酸是一种B族维生素,在DNA和RNA的合成、氨基酸代谢和甲基化中起着非常重要的作用,针对叶酸受体(FR)的靶向抑制剂是近年来靶向卵巢癌最具潜力的热点药物,FR靶向抑制剂的开发过程经历了从针对FRα的单克隆抗体到FR结合物再到抗体偶联药物(ADC),其中ADC类药物包括米维妥昔单抗-索拉维坦辛(MIRV)、法雷妥珠单抗-埃克替布林(MORAb-202)、卢维他单抗-他泽维布林(STRO-002)等,尤其是MIRV的成功研发及其现有研究的疗效让人们充分认识到靶向FRα在卵巢癌治疗上的潜力。MIRV的单药临床试验目前取得了初步成功,但还需要MIRASOL实验的进一步确认,针对卵巢癌目前远未被满足的临床需求,MIRV与其他类型抗肿瘤药物的联合用药是未来研究的热点之一,现有临床研究表明MIRV安全性较好,但其中眼部毒性是非常特殊的,其中的分子机制也值得进一步探索。

宫颈癌组织MNX1-AS1、FR-α水平与病理特征的关系及其诊断意义

目的 探讨宫颈癌组织MNX1反义RNA 1(MNX1-AS1)、叶酸受体-α蛋白(FR-α)水平与病理特征的关系及其诊断意义。方法 选取2018年1月至2018年10月在本院进行手术治疗的85例宫颈癌患者为研究对象,纳入观察组,另选我院收治的50例宫颈炎患者为对照组。采集观察组患者的癌组织、癌旁组织及对照组宫颈组织标本,三组标本以免疫组化法检测MNX1-AS1、FR-α的表达率和表达水平并进行组间比较,分析宫颈癌组织MNX1-AS1、FR-α表达与病理特征及预后的关系。结果 观察组宫颈癌组织及癌旁组织的MNX1-AS1、FR-α阳性表达率高于对照组,且宫颈癌组织阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。观察组宫颈癌组织、癌旁组织的MNX1-AS1、FR-α表达水平高于对照组,且宫颈癌癌组织MNX1-AS1、FR-α水平高于癌旁组织(P<0.05)。MNX1-AS1、FR-α表达与宫颈癌患者的年龄病理分型、肿瘤直径、分化程度无关,而与宫颈癌肿瘤的FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。对观察组患者进行为期3年的随访观察,MNX1-AS1、FR-α阳性组的3年生存率低于阴性组(P<0.05)。结论 宫颈癌患者中MNX1-AS1、FR-α呈现高表达,并能对宫颈癌组织的浸润、转移、分期发挥协同作用,与宫颈癌的发生、发展及预后密切关联,对宫颈癌有重要的诊断意义。

叶酸受体-α在卵巢癌耐药细胞株中的表达及其介导的多药耐药的靶向逆转

目的:研究叶酸受体-α(folic acid receptor-α,FR-α)在卵巢癌多药耐药细胞株中的表达水平,并探讨FR-α靶向的MDR1小干扰RNA(siRNA)纳米粒对卵巢癌多药耐药细胞的逆转效果。方法:采用体外浓度梯度递增法建立卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3-ts,应用激光共聚焦法检测FR-α的表达水平。复凝聚法将叶酸修饰壳聚糖载体包裹靶向MDR1的PGPU6/GFP/Neo/PshRNA真核表达质粒(PshRNA-MDR1),形成叶酸修饰壳聚糖PshRNA-MDR1纳米粒(FA-CS-PshRNA)。采用RT-PCR、Western blot检测叶酸修饰前后,纳米粒转染细胞后MDR1 mRNA及蛋白的表达,MTT法检测SKOV3-ts半数抑制浓度(IC50)的变化。结果:激光共聚焦法显示,耐药细胞株SKOV3-ts胞膜层有FR-α强表达,经叶酸修饰后,FA-CS-PshRNA纳米粒较CS-PshRNA能更有效降低靶细胞SK-OV3-ts的靶基因MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达(P<0.01),并逆转SKOV3-ts细胞针对紫杉醇的IC50(0.3830±0.0096 vs 0.0353±0.0006,P<0.01)。结论:经FR-α介导,FA-CS-PshRNA能更有效敲除MDR1的表达,靶向逆转卵巢癌多药耐药。

叶酸受体靶向的人血清白蛋白-叶酸偶联物的制备、标记及生物性能评价

以人血清白蛋白为连接剂和药物载体,制备了人血清白蛋白-叶酸偶联物(HSA-FA),其偶联数n≈3.以SnCl2·H2O作为还原剂,采用直接标记法制备99mTc-HSA-FA标记配合物,其放射化学纯度大于90%.体外细胞结合实验结果表明,99mTc-HSA-FA能被叶酸受体高表达的KB细胞特异性摄取.荷瘤S180小鼠体内生物分布的研究结果表明,与99mTc-HSA相比,99mTc-HSA-FA在小鼠体内的生物分布发生明显变化,其在肿瘤中的放射性浓集明显增加(t=12.03,P<0.05),并表现出较高的摄取[(4.37±1.12)%ID/gat1h]和滞留[(3.40±0.69)%ID/gat4h];经注射过量稳定配体使99mTc-HSA-FA受到抑制后,其在肿瘤和肾中的摄取明显降低(t=24.17和17.87,P<0.05),表明人血清白蛋白-叶酸偶联物对叶酸受体有特异性结合.

叶酸受体在血液肿瘤细胞株的表达及叶酸-聚乙烯亚胺共聚物的制备

目的：研究叶酸受体（folatereceptor，FR）在血液肿瘤细胞表达的特点，合成叶酸-聚乙烯亚胺（FA—PEI）聚合物，探讨其作为靶向性基因输送载体的可行性。方法：用实时荧光定量PCR（realtimePCR）法检测α、β、γ3种FR在血液肿瘤细胞K562、K562／A02、U266细胞株上的表达；利用叶酸（FA）活性酯在微碱性条件下与聚乙烯亚胺（polyethylenimine，PEI）的支链氨基反应，合成FA-PEI共聚物；用葡聚糖凝胶柱G-25分离、纯化；用紫外分光光度计波长扫描法及氢核磁共振谱（1HNMR）法验证交联是否成功。结果：α、β、γ3种FR在K562、K562／A02、U2663种细胞株上均表达，其中，α-FR的表达占优势，较β-FR和γ-FR表达量高；紫外分光光度计扫描图谱在365nm处出现叶酸的特征性吸收峰；核磁共振（1HNMR）示：在2．5～3．2处出现PEI亚甲基质子的特征性化学位移，在6．5～9．0处出现叶酸芳香质子的特征性氢信号。结论：FR在K562、K562／A02、U2663种细胞株上均有较高表达；FA—PEI偶联成功，为其作为血液肿瘤治疗中1种潜在的靶向性基因输送载体提供了依据。

血清DJ-1蛋白和叶酸受体-1水平检测联合哥本哈根指数诊断上皮性卵巢癌的临床价值

目的探讨血清DJ-1蛋白和叶酸受体-1(folate receptor-1,FOLR1)水平检测联合哥本哈根指数(Copenhagen index,CPH-I)诊断上皮性卵巢癌的临床价值。方法将2016年1月至2019年3月首都医科大学宣武医院收治的83例上皮性卵巢癌患者纳入恶性组,将该院同期收治的85例卵巢良性肿瘤患者纳入良性组。比较两组患者血清DJ-1蛋白、FOLR1、糖类抗原125(carbohydrate antigen,CA125)、人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)水平,绘制受试者操作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC曲线),分析上述指标单独或联合诊断上皮性卵巢癌的价值。结果恶性组患者血清DJ-1蛋白、FOLR1、CA125、HE4水平和CPH-I均显著高于良性组(均P<0.05)。ROC曲线分析显示:DJ-1蛋白、FOLR1水平和CPH-I联合诊断上皮性卵巢癌的灵敏度、特异度、曲线下面积均大于DJ-1蛋白、FOLR1、CA125、HE4水平和CPH-I单独诊断。结论DJ-1蛋白、FOLR1水平检测联合CPH-I能够提高对上皮性卵巢癌的诊断效能,值得临床应用。

子宫内膜样腺癌和子宫内膜增生组织中叶酸受体-α和β的表达及其与肿瘤生长增殖的关系

目的探讨宫内膜样腺癌(EEC)和子宫内膜增生(EH)组织中叶酸受体-α(FR-α)、叶酸受体-β(FR-β)的表达及其与肿瘤生长增殖的关系。方法采用免疫组织化学法检测EEC组织84例、EH组织107例及正常子宫内膜(NE)组织30例中FR-α、FR-β的表达,并分析其与各临床特征的关系,采用Pearson分析EEC组织中FR-α、FR-β表达与肿瘤细胞增殖指数Ki-67的关系。结果 FR-α在EEC、EH、NE组织中的阳性表达率分别为80.95%(68/84)、28.97%(31/107)和0(0/30),组织间差异有统计学意义(P<0.05);FR-β在上述组织的阳性表达率依次为33.33%(28/84)、0(0/30)、0(0/30),FR-β阳性表达率在EEC中明显高于EH和NE组织(P<0.05),而EH、NE组织间差异无统计学意义(P>0.05);EEC组织中,FR-α表达与年龄、淋巴结转移相关(P<0.05),与组织学分级、临床分期、肌层浸润程度无关(P>0.05);FR-β表达与淋巴结转移、肌层浸润深度相关(P<0.05),与年龄、组织学分级、临床分期无关(P>0.05);EEC组织中,FR-β阳性表达率均与Ki-67指数呈正相关(r=0.711,P<0.05)。结论 FR-α、FR-β在EEC中表达显著增高,可能通过影响细胞增殖参与EEC的发生、发展。

宫颈癌患者血清叶酸受体-1表达水平及早期诊断价值

目的 探讨血清叶酸受体-1(叶酸受体-1)作为生物标志物在宫颈癌早期诊断中的价值。方法 收集2017年1月至2019年1月在南充市第五人民医院门诊(下称该院)行宫颈脱落细胞学检查136例人乳头瘤病毒(HPV)感染患者临床资料,经病理组织学确诊为宫颈上皮内瘤变组58例和宫颈癌组78例;另选择该院同期52例体检的健康女性作为健康对照组。收集3组研究对象临床资料,包括年龄、FOLR1水平、HPV感染、HPV16型感染、孕次、流产史、肿瘤家族史等。分析血清FOLR1表达与宫颈癌组临床病理资料关系。采用酶联免疫吸附法检测血清FOLR1,利用受试者工作曲线(ROC)评价血清FOLR1对宫颈癌的诊断效能。结果 3组研究对象在年龄、FOLR1水平、HPV感染、HPV16型感染比较,差异具有统计学意义(P<0.05);而在孕次、流产史、肿瘤家族史比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清FOLR1水平与年龄、病理类型、组织分化、FLGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05);血清FOLR1水平与孕次、流产史、肿瘤家族史无关,差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈癌组血清FOLR1水平(271.68±109.38)ng/L明显高于宫颈上皮内瘤变组r (141.08±60.05)ng/L、健康对照组的(124.52±50.17)ng/L,差异具有统计学意义(t=8.214、8.587,P<0.001),而宫颈上皮内瘤变组与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清FOLR1鉴别宫颈癌和宫颈上皮内瘤变的AUC为0.884,灵敏度为81.03%,特异度为79.49%;血清FOLR1鉴别宫颈癌和健康对照组的AUC为0.946,灵敏度为84.62%,特异度为92.31%。结论 宫颈癌患者血清FOLR1水平明显升高,高水平表达FOLR1与患者年龄、病理类型、组织分化、FLGO分期、淋巴结转移有关,血清FOLR1可作为宫颈癌早期诊断指标之一。

FOLR-α在妇科肿瘤中的应用及研究进展

叶酸受体(folate receptor,FOLR)是高亲和力和低通量的转运蛋白。FOLR-α是相对分子质量为38 000~40 000的糖基磷脂酰肌醇锚定的细胞表面糖蛋白,通常存在于胎盘、脉络丛、子宫、视网膜和肾脏的正常上皮细胞中。FOLR-α在多种恶性肿瘤中高表达,包括卵巢、子宫、乳腺、肺、结肠和肾脏。近年来,许多研究提出FOLR-α与妇科肿瘤的发生和发展具有相关性。本文参考国内外研究,主要围绕FOLR-α与妇科肿瘤发生和发展的相关性及在妇科肿瘤临床诊疗中的应用及研究进展作一综述。

血清FOLR1、IL-1β及SMRP联合检测在上皮性卵巢癌早期诊断中的价值

目的分析血清叶酸受体-1(FOLR1)、白细胞介素-1(IL-1β)及可溶性间皮素相关蛋白(SMRP)联合检测在上皮性卵巢癌早期诊断中的价值。方法回顾性分析150例卵巢肿瘤患者的临床资料,以术后病理诊断结果为金标准,根据良恶性情况将其分为上皮性卵巢癌组(n=84)和非上皮性卵巢癌组(n=66)。比较2组入院时血清FOLR1、IL-1β、SMRP水平,采用ROC曲线分析入院时血清FOLR1、IL-1β、SMRP及联合检测对上皮性卵巢癌的早期诊断效能。根据上皮性卵巢癌组患者临床分期标准将其分为Ⅰ期组(n=12)、Ⅱ期组(n=27)、Ⅲ期组(n=31)、Ⅳ期组(n=14)4个亚组,比较不同临床分期的上皮性卵巢癌患者入院时血清FOLR1、IL-1β、SMRP水平差异。结果上皮性卵巢癌组患者入院时血清FOLR1、IL-1β、SMRP水平均高于非上皮性卵巢癌组(P<0.05)。入院时血清FOLR1、IL-1β、SMRP及其联合检测曲线均明显高于参考线(P<0.05),其cut off值分别为325.94 pg/ml、11.78 pg/ml、3.28 pg/ml。上皮性卵巢癌组患者入院时血清FOLR1、IL-1β、SMRP水平随临床分期升高而升高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论入院时患者血清FOLR1、IL-1β及SMRP联合检测在上皮性卵巢癌早期诊断中具有一定临床诊断价值,血清FOLR1、IL-1β、SMRP水平越高,说明卵巢肿瘤癌变情况越严重。临床治疗可根据血清FOLR1、IL-1β、SMRP水平提前采取治疗措施,以避免肿瘤进一步癌变。

叶酸受体-α在三阴性乳腺癌患者中的表达水平及相关性研究

目的探讨三阴性乳腺癌肿瘤中叶酸受体-α(FRA)表达水平与临床病理特征的关系。方法收集三阴性乳腺癌患者癌组织及癌旁组织,免疫组化检测FRA的表达情况,分析FRA与年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、TNM分期、五年生存率的关系。结果FRA在三阴性乳腺癌组织中的表达率明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);FRA阳性表达与患者年龄及肿瘤大小无关(P>0.05);FRA阳性表达与患者淋巴结转移及TNM分期呈正相关(P<0.05),与患者5年生存率呈负相关(P<0.01)。结论FRA在三阴性乳腺癌患者的癌组织中呈阳性表达,FRA阳性表达水平与患者淋巴结转移及TNM分期呈正相关,与患者5年生存率呈负相关。FRA可作为三阴性乳腺癌治疗的潜在靶点,同时为患者生存情况提供一定的参考作用。

叶酸-脂质体制备及对HeLa细胞靶向作用

目的 研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸脂质体。方法 将叶酸（Ｆ）、聚乙二醇二胺（ＮＨ２ＰＥＧＮＨ２）、琥珀酸酐（ＳＵＣ）和卵黄磷脂酰乙醇胺（ＥＰＥ）按序共价连接，并与胆固醇（ｃｈｏｌ）、卵黄磷脂酰胆碱（ＥＰＣ）以１０∶４０∶５６配比，用成膜水化结合冷冻熔融超声法制备内含钙黄绿素叶酸脂质体，以负染色电镜法确定其粒径；用荧光显微镜观察ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体与脂质体的差异；以荧光定量法确定浓度、时间、游离Ｆ、磷脂酶Ｄ（ＰＬＤ）和磷脂酰肌醇特异磷脂酶Ｃ（ＰＩＰＬＣ）对ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体影响程度。结果 （１）ＦＰＥＧＳＵＣＥＰＥ连接物为色谱纯；叶酸脂质体平均粒径为２００ｎｍ。（２）叶酸脂质体进入ＨｅＬａ细胞质内量明显高于脂质体。（３）浓度增大、时间延长，叶酸脂质体摄取量递增幅度明显减缓；ＨｅＬａ细胞摄取叶酸脂质体量均在脂质体的４倍以上。（４）５０μｍｏｌ／Ｌ游离Ｆ可使叶酸脂质体摄取量降低５０％；ＰＩＰＬＣ（０．２Ｕ／ｍｌ）和ＰＬＤ（０．５ｍｇ／ｍｌ）处理后，叶酸脂质体摄取量分别降低７１％和７０％。

伊立替康 亚叶酸钙 5-氟尿嘧啶方案联合西妥昔单抗靶向治疗晚期结肠癌一例并文献复习

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，其发病率及病死率呈逐年上升趋势[1]。确诊为结直肠癌的患者中有50％～60％已发生转移，无手术机会。晚期结直肠癌治疗以全身化学治疗为主，20世纪90年代在使用了氟尿嘧啶为基础的全身化学治疗药后，此类患者的生存期仅为5.2～7.0个月。20世纪90年代后期开始应用奥沙利铂、伊立替康等药物后，晚期结直肠癌的治疗有效率及生存期均显著改善。随着贝伐珠单抗、西妥昔单抗等靶向治疗药物的出现，晚期结直肠癌的治疗又上了一个新台阶。西妥昔单抗是重组人鼠嵌合的单克隆抗体，能与细胞外表皮生长因子受体（EGFR）特异性结合，从而阻断受体细胞内区域的酪氨酸激酶磷酸化，抑制细胞生长，诱导细胞凋亡。 BOND试验[2]、CRYSTAL试验[3]、OPUS试验[4]等确立了西妥昔单抗在晚期结直肠癌中的治疗地位。西妥昔单抗与奥沙利铂＋亚叶酸钙＋5-氟尿嘧啶（FOLFOX）、伊立替康＋亚叶酸钙＋5-氟尿嘧啶（FOLFIRI）等化学治疗方案联用，有效率显著提高。我院近期收治了1例K-ras基因野生型的晚期结肠癌患者（腹盆腔转移），使用西妥昔单抗联合FOLFIRI全身化学治疗及生物制剂腹腔灌注后，腹腔积液完全消失、原发灶消失、转移灶明显减少，甚至消失，现报告如下。

叶酸-青霉素G酰化酶对SKOV3实体肿瘤靶向性的实验研究

采用Iodogen法对叶酸-青霉索G酰化酶（Folate—conjugated Penicillin G Amidase，F-PGA）和PGA进行^135I标记。将纯化后的标记物由尾静脉注入荷SKOV3实体瘤裸鼠体内，观察F-PGA对叶酸受体阳性的SKOV3的靶向性。结果显示：标记产品纯化后放化纯度〉95％，且体内外稳定性较好；荷SKOV3肿瘤的裸鼠注射^135I-F-PGA后4～24h肿瘤显像较清晰，而注射^135I-PGA组所有时相均未见明显的肿瘤部位放射性浓聚影；^135I-F-PGA组的肿瘤与健侧肌肉的摄取比值（T／M）明显高于对照组（F=13．38，P=0．0146），且在非靶组织中清除较快。表明F-PGA在荷瘤鼠体内能特异性地与叶酸受体阳性的SKOV3实体肿瘤进行靶向结合，其T／NT〉1，有望用于靶向治疗。

叶酸修饰的聚乙烯亚胺-聚乙二醇共聚物载体在体内外转染效率的研究

目的探讨叶酸修饰的不同相对分子质量聚乙酰亚胺构建的聚乙烯亚胺-聚乙二醇5000(PEI-PEG)作为基因载体在体内外的转染效率。方法在体外实验中,分别测试3个相对分子质量FPPs(branched PEI:0.6kDa,10kDa和Linear PEI 25kDa)在最佳N/P、有无血清、血清的浓度和叶酸受体靶向性等条件下对口腔癌上皮细胞(KB)转染率的影响;在体内实验中,FPP(0.6kDa)分别压缩pLuc-p53基因形成的复合物通过瘤内注射和尾静脉注射2种方式考察聚合物的转染效率。结果在体外实验中,转染率最佳条件分别是N/P=20、有血清且转染率随着白蛋白(ALB)或胎牛血清(FBS)浓度的增加有上升趋势;其中3个相对分子质量PEI组成的FPP转染率分别为FPP(10kDa>25kDa>0.6kDa);FPP有较强的叶酸靶向性;在体内实验中,与BPP/pLuc和PEI(25kDa)/pLuc相比,FPP(10kDa)/pLuc呈现出较高的转染率;在48h内,随着时间的推移,转染效率增加;FPP(10kDa)/p53能改善荷瘤小鼠;与裸pLuc相比,3种相对分子质量的FPPs没有毒性。结论具有靶向性的FPP非病毒载体能成为临床传递基因治疗载体的候选。

FR-α、Ki-67蛋白在不同宫颈组织中的表达差异及在宫颈癌组织中的临床意义

目的探讨叶酸受体-α(FR-α)、Ki-67蛋白在不同宫颈组织中的表达差异及在宫颈癌组织中的临床意义。方法选择2018年1月至2019年12月本院收治的429例宫颈组织异常患者,按照疾病类型将其分为慢性宫颈炎组(154例)、宫颈上皮内瘤变组(140例)、宫颈癌组(135例),并选择同期140例宫颈组织无异常者作为对照组。比较各组宫颈组织、不同程度宫颈病变、不同临床分期宫颈癌组织中FR-α和Ki-67蛋白表达差异,并分析FR-α和Ki-67蛋白表达的相关性。结果对照组、慢性宫颈炎组、宫颈上皮内瘤变组和宫颈癌组宫颈组织中FR-α、Ki-67蛋白表达阳性率呈逐渐增加趋势,四组宫颈组织FR-α、Ki-67蛋白表达阳性率和表达强度比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着宫颈上皮内瘤变病变程度加重和宫颈癌临床分期增加,FR-α、Ki-67蛋白表达强阳性率明显增加(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,宫颈组织中FR-α、Ki-67蛋白表达具有正相关性(r=0.692,P<0.05)。结论宫颈组织中FR-α与Ki-67蛋白阳性表达与宫颈病变疾病有关,可能是宫颈癌发生、进展的促进因素。

宫颈癌组织FR-、TopoⅡ蛋白表达及意义

目的探讨宫颈癌组织叶酸受体-(FR-)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)蛋白表达及意义。方法选取2017年1月至2019年2月在我院手术切除的宫颈癌组织、癌旁组织标本92例,同时选取正常宫颈组织标本78例,采用免疫组化染色法检测FR-、TopoⅡ蛋白表达。结果宫颈癌组织FR-、TopoⅡ蛋白阳性表达率分别为83.70%和72.83%,明显高于癌旁组织和正常宫颈组织(P<0.05);宫颈鳞状细胞癌、TNM分期Ⅲ期、中低分化和有淋巴结转移宫颈癌组织FR-阳性表达率分别为92.06%、94.59%、92.75%和96.67%,明显高于宫颈腺癌、Ⅰ~Ⅱ期、高分化和无淋巴结转移宫颈癌组织(P<0.05);TNM分期Ⅲ期、中低分化和有淋巴结转移宫颈癌组织TopoⅡ蛋白阳性表达率分别为97.30%、82.61%和93.33%,明显高于宫颈腺癌、Ⅰ~Ⅱ期、高分化和无淋巴结转移宫颈癌组织(P<0.05);宫颈癌组织FR-与TopoⅡ蛋白表达呈正相关(rs=0.392,P<0.05)。结论宫颈癌组织FR-、TopoⅡ蛋白表达明显上调,与患者临床病理有一定关系。

构建叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影微粒

背景:研究表明,纳米级超声对比剂具有较强的穿透能力,使血管外靶组织显像成为可能,超越了微米级对比剂仅能发生血池内显像的局限性。目的:构建叶酸修饰的乳腺癌靶向纳米超声造影微粒,评估其与细胞靶向结合的能力及体外超声成像效果。方法:采用超声乳化-蒸发法制备对比剂聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为m PP/PFOB)和叶酸修饰的聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒(记为m PPF/PFOB)。(1)生物相容性检测:取对数生长期的人皮肤成纤维细胞HFF-1、人乳腺癌MCF-7细胞,分别加入0,0.005,0.01,0.02,0.05,0.1,0.2,1 g/L的m PP/PFOB或m PPF/PFOB,培养24 h后检测细胞活力。(2)体外寻靶能力检测:取对数生长期的HFF-1、MCF-7细胞,均分3组干预,A、B组分别加入Cy5标记的m PP/PFOB与m PPF/PFOB,C组在加入Cy5标记的m PP/PFOB前以叶酸处理2 h,培养0.5 h后,流式细胞仪检测荧光强度;培养20 min后,共聚焦显微镜观察对比剂在细胞中的分布。(3)体外超声显影:实验分3组,A组为生理盐水,B组制备m PPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液,C组以m PPF/PFOB纳米粒与生理盐水混悬液重悬MCF-7细胞沉淀,制备纳米粒与细胞混悬液,将3种液体加入乳胶手套中扎紧,采用超声诊断仪检测体外超声成像效果。结果与结论:(1)生物相容性检测结果:两种纳米粒无明显的细胞毒性;(2)流式细胞仪检测结果:在MCF-7细胞中,B组平均荧光强度明显高于A组和C组;而在HFF-1细胞中,3组平均荧光强度无显著差别;(3)共聚焦显微镜观察结果:m PPF/PFOB主要聚集在MCF-7细胞膜周围,m PP/PFOB则分布在胞浆。(4)体外超声显影结果:m PPF/PFOB与MCF-7细胞结合后,在体外能增强超声回声;(5)结果提示:叶酸修饰的聚乙二醇化乳酸羟基乙酸共聚物包裹液态氟碳的纳米粒具有良好的生物相容性,具有与乳腺癌MCF-7细胞靶向结合能力和增强超声显像效果。

骨质疏松分子生物学研究专家共识

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。