斑马鱼Zar1和Zar1-like基因的克隆及其表达分析

合子阻滞基因1(Zygote arrest 1,Zar1)及Zar1-like(Zar1L)作为母源基因,在小鼠卵子-合子转变过程中发挥着极其重要的作用。研究以斑马鱼为对象,采用cDNA末端快速克隆(RACE)技术获得了Zar1L cDNA全长,并采用RT-PCR技术检测Zar1和Zar1L在斑马鱼不同组织器官、卵母细胞和胚胎发育时期的表达情况。Zar1L cDNA的全长为1146 bp,编码311个氨基酸残基,5′非编码区20 bp,3′非编码区190 bp。多重序列比对结果显示,C-末端的序列非常保守,相似性高达74%,具有非典型的PHD基序(Plant homeo domain),并具有两个C4类型的锌指结构。在基因结构上,Zar1和Zar1L均由四个外显子构成,两个基因的每一个外显子在大小上也比较相近。分子进化表明斑马鱼Zar1和Zar1L属于两个不同的基因,可能是同一来源的祖先基因重复和进化的结果。RT-PCR结果表明斑马鱼Zar1和Zar1L的表达模式相似,都是卵巢特异表达基因,在卵母细胞及早期胚胎中可检测到大量转录本的存在,囊胚、原肠胚期后下降,但在整个胚胎发育期都可检测到转录本。斑马鱼Zar1和Zar1L mRNA的表达水平的一致性,似乎暗示着两个基因的功能基本一致。表达模式分析表明Zar1和Zar1L可能与斑马鱼卵子-合子转变有关,也可能与其他的胚胎发育过程有关。

环江香猪FSHβ、ESR及ZAR1基因多态性分析

环江香猪是广西著名的地方品种,本研究采用PCR-RFLP、HRM结合测序的方法分析了广西环江香猪繁殖状相关基因FSHβ、ESR和ZAR1基因的多态性。结果显示,首次成功克隆测序了环江香猪ZAR1基因的外显子3,与Gen Bank中的ZAR1基因(DQ231443,gi:83727928)外显子3序列100%同源。针对134头环江香猪检测样本中均未发现FSHβ和ESR基因的多态突变位点。对ZAR1基因的外显子3和部分内含子3测序后发现5个新突变SNP位点,未见有已报道的对猪产仔数产生显著影响的外显子3(C54T)突变。论文显示不同品种猪基因突变多态性亦呈现为不同的模式,研究结果对建立环江香猪基因标记辅助选择方法具有重要意义。

ZAR1基因的研究进展

研究证实,胚胎的早期发育不是由细胞核控制的,而是由储存在卵质中或由卵源基因表达的一些因子所控制,这些基因即被称作母性效应基因。合子阻滞因子1(ZAR1)基因作为第一个被发现的具有卵母细胞特异性的母源性基因,在母型合子转换中起重要作用并影响胚胎早期发育。近年来随着深入研究,人们发现ZAR1基因还与家畜的繁殖性状、多种肿瘤疾病的发生及基因的转录调节有着重要的关系。文章综述了ZAR1基因的结构与组织表达分布,同时概述了其对胚胎早期发育、繁殖、癌症发生及调节基因转录的作用,并对其生物功能进行展望,以期为更深层次地研究和提高胚胎早期发育、繁殖性状、治疗不孕、攻克肿瘤疾病难题提供研究基础和方向。

遗传学

β地贫CD41-42突变杂合子复合缺失型α地贫双重杂合子的基因检测与血液学分析；HSP70在米非司酮引产胎儿肝、肾、脑组织中的表达；重组人TNF-α在大肠杆菌中的表达、纯化及生物学活性研究；应用PCR-酶切法进行脊肌萎缩症基因诊断；应用PCR-STR分型技术快速产前基因诊断Down’s综合征；与Down’s综合征发生相关的环境因子的流行病学分析；HBsAg携带者母亲及新生儿的细胞遗传学研究；缺糖损伤的PC12细胞中grp75基因的表达；血管紧张素系统基因多态性与支架内再狭窄的相关性研究；早老素-1基因启动子区-48C／T位点多态性与LOAD的遗传相关性；转化生长因子β1及其受体1在妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘绒毛组织中的表达及其意义。