膜结合型前列腺素E合成酶1及其表达与肿瘤相关性的研究进展

膜结合型前列腺素E合成酶1(membrane-associated prostaglandin E synthase-1,mPGES-1)是前列腺素(prostaglandin,PG)E2生物合成过程中重要的终端限速酶,与环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)功能性偶联参与机体多种生理及病理过程。近年来研究发现,mPGES-1在多种肿瘤组织中过度表达,与肿瘤的发生、发展密切相关。抑制mPGES-1的活性能有效降低PGE2的产生,同时能避免非甾体类抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSAID)及COX-2特异性抑制剂引起的心血管方面的不良反应,是一个比COX-2更理想、更安全的防治肿瘤的药物开发新靶点。本文就mPGES-1的分子生物学特征、与肿瘤发生和发展的相关性及其抑制剂的研究进展作一综述。

前列腺癌组织mPGES-1表达及其与COX-2的相关性

目的探讨膜结合型前列腺素E合成酶1(mPGES-1)在前列腺癌(PCa)及前列腺增生(BPH)组织中的表达,并进一步分析其与环氧合酶2(COX-2)的相关性。方法采用免疫组化SP法检测30例PCa和20例BPH组织中mPGES-1和COX-2的表达,用图像分析软件分析阳性表达的灰度和面积,并采用直线相关方法分析mPGES-1和COX-2的相关性。结果BPH组织中mPGES-1和COX-2表达呈阴性(14/20)或弱阳性(6/20);PCa组织中mPGES-1和COX-2均呈现阳性表达(30/30)。在PCa中,mPGES-1和COX-2的阳性面积表达水平与Gleason评分呈正相关(r=0.633、0.607,P<0.01);mPGES-1与COX-2也呈正相关(r=0.959,P<0.01)。结论mPGES-1和COX-2在PCa中均为高表达,且与PCa的Gleason评分呈正相关;mPGES-1和COX-2的表达呈正相关,提示两者在PCa发生发展中共同发挥重要作用。

辣椒素通过下调COX-2和mPGES-1抑制IL-1β诱导的NCI-H460细胞PGE_2含量的实验研究

目的观察辣椒素对IL-1β诱导的人肺腺癌NCI-H460细胞PGE_2含量的影响,并且进一步观察其对COX-2和mPGES-1的影响,探讨其抗非小细胞肺癌(NSCLC)的可能机制。方法体外培养NCI-H460细胞,采用MTT比色分析法,观察辣椒素对NCI-H460细胞增殖抑制作用,计算IC50;采用IL-1β刺激的方法构建炎症模型,ELISA法检测辣椒素对NCI-H460细胞PGE_2含量和COX-2活性的影响;Western blot法检测辣椒素对NCI-H460细胞COX-2、mPGES-1蛋白表达的影响;Real-time PCR法检测辣椒素对NCI-H460细胞COX-2mRNA和mPGES-1mRNA表达的影响。结果 MTT比色分析结果表明,辣椒素对NCI-H460细胞增殖具有明显抑制作用,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。辣椒素明显降低NCI-H460细胞COX-2活性和PGE_2浓度,而且明显降低NCIH460细胞COX-2、mPGES-1蛋白及其mRNA的表达,且呈剂量依赖性,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论辣椒素通过降低NCI-H460细胞COX-2和mPGES-1 mRNA表达从而抑制PGE_2释放,可能是其抗NSCLC的机制之一。

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达

【目的】探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况。【方法】多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM)。ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-q PCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(m PGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的m RNA表达水平;Westernblot法检测相应蛋白表达水平。【结果】随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P<0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P<0.05)、而m PGES-1、EP1、EP2、EP3 m RNA表达无显著变化(P>0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P<0.05)。【结论】1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展。

前列腺素在胚胎着床和蜕膜化中的作用

前列腺素在哺乳动物的雌性生殖过程中起着十分重要的作用。环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)主要在子宫着床位点处胚胎周围的基质细胞中表达,介导着床和蜕膜化过程。由COX-2和微粒体型前列腺素E合成酶-1途径来源的前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)在胚胎着床和蜕膜化过程中起重要作用。子宫中产生的前列腺素I2(prostaglandin I2,PGI2)通过核受体过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)在胚胎着床过程中起关键作用。质膜上的前列腺素转运蛋白(prostaglandin transporter,PGT)通过转运新合成的前列腺素,来满足胚胎着床和蜕膜化过程中对前列腺素的需求,并维持前列腺素的代谢平衡。

微粒体前列腺素E_2合成酶-1抑制剂研究进展

传统的解热镇痛抗炎药主要以环氧合酶-2(COX-2)为靶点,在世界范围内拥有巨大的市场,虽几经改良,但仍存在较多副作用,一直没有良好的替代品。自1999年发现微粒体前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)以来,部分目光敏锐的研究人员注意到这可能是解热镇痛抗炎药的一个新靶点。此后近10年时间内,人们就其生物化学、病理生理学特性进行了大量研究。然而,其药学方面的研究尚处于起始阶段,但国际制药公司已将其作为开发提高解热镇痛抗炎药的重要靶标。主要就mPGES-1抑制剂的研究进展作一简述。

微粒体前列腺素E合成酶-1在肝细胞癌发生、发展及侵袭转移中的作用

目的 检测微粒体前列腺素E合成酶（mPGES）-1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达,观察其抑制剂MK886下调mPGES-1表达后对肝癌细胞株HepG2生物学行为的影响,探讨mPGES-1在HCC发生、发展及侵袭转移中的作用.方法 收集HCC,癌旁、远癌及正常肝组织标本,用RT-PCR及Western blot检测mPGES-1 mRNA及蛋白的相对表达量.分别采用四甲基偶氮唑盐法、Transwell法检测MK886下调mPGES-1表达后对HepG2细胞增殖,黏附,迁移、侵袭能力的影响.计量资料若数据呈正态分布且方差齐,多组间均数比较用单因素方差分析,组间两两均数比较用LSD-t检验;若数据非正态分布或方差不齐,用多个样本比较的Kruskal-Wallis H秩和检验,两两比较用Mann-Whitney U秩和检验.结果 mPGES-1在HCC中表达水平高于正常肝组织（P〈0.01）;随病理学分级的升高,mPGES-1表达量逐渐增高;包膜侵犯组中mPGES-1表达量高于无包膜侵犯组（P〈0.01）;转移组高于无转移组（P〈0.01）.MK886作用于HepG2细胞48 h后,mPGES-1 mRNA 及蛋白表达水平明显下降（F=140.402,P〈0.01; α＇=0.00714,P〈0.01）,并呈剂量依赖性.与对照组比较,MK886作用后HepG2细胞增殖抑制率呈明显的时间和剂量依赖性.20、40,75 μmol/LMK886实验组细胞黏附率分别为85.3%±1.3%、70.5%±1.5%、45.8%±2.4%,明显低于对照组的100.0%±0（F=626.313,P〈0.01）.迁移实验显示20、30、40 vmol/L MK886实验组细胞24h的迁移细胞数分别为每高倍视野（92.47±1.90）个、（62.63±1.96）个、（37.33±0.83）个,低于对照组迁移细胞数[（128.93±2.60）个,F=1253.805,P〈0.01].侵袭实验显示20,30,40μmol/L MK886实验组细胞24 h的侵袭细胞数分别为每高倍视野（41.67±1.30）个、（25.47±1.30）个,（13.93±1.66）个,对照组侵袭细胞数为（55.67±2.08）个,各组间差异均有统计学意义（F=372.615,P〈0.01）.MK886作用后HepG2细胞的黏附率、迁移及侵袭细胞数均呈剂量依赖性降低.结论 mPGEs-1与HCC的发生、发展密切相关,其表达下调预示可降低HCC的侵袭、转移潜能.

肺癌组织中cPLA2和mPGES-1的表达及意义

目的探讨胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、微粒体前列腺素E合成酶-1(mPGES-1)在肺癌组织中的表达及临床意义,为肺癌发生发展的分子机制提供理论依据。方法采用RT-PCR检测60例肺癌(肺癌组)和癌旁(癌旁组)组织中cPLA2、mPGEs-1mRNA表达水平,采用免疫组织化学SP法检测2组组织中cPLA2、mPGEs-1蛋白表达水平。结果肺癌组组织中cPLA2、mPGES-1mRNA表达水平均明显高于癌旁组(均P<0.05)。肺癌组组织中cPLA2蛋白阳性表达率为76.7%(46/60),癌旁组组织中cPLA2蛋白无阳性表达,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);肺癌组组织中mPGES-1蛋白阳性表达率为66.7%(40/60),明显高于癌旁组的10.0%(6/60)(P<0.05)。肺癌组的肿瘤<5cm、组织学类型为鳞癌、病理分级为高中分化、淋巴结无转移和TNM分期为Ⅰ期cPLA2蛋白阳性表达率与肿瘤≥5cm、组织学类型为腺癌、病理分级为低分化、淋巴结有转移和TNM分期为Ⅱ、Ⅲ期比较差异均无统计学意义(均P>0.05);肺癌组的肿瘤<5cm、组织学类型为鳞癌mPGEs-1蛋白阳性表达率与肿瘤≥5cm、组织学类型为腺癌比较差异均无统计学意义(均P>0.05),肺癌组的病理分级为高中分化、淋巴结无转移和TNM分期为Ⅰ期mPGEs-1蛋白阳性表达率均明显低于病理分级为低分化、淋巴结有转移和TNM分期为Ⅱ、Ⅲ期(均P<0.05)。结论 cPLA2、mPGES-1的高表达可能在肺癌的发生发展中起着重要作用,其可能为肺癌的早期诊断和为开发肺癌的靶向治疗提供一定的临床依据。

促胰液素对早期妊娠小鼠子宫内膜基质细胞cPLA_2和mPGEs-1表达的影响

促胰液素(secretin)属于一种胃肠肽,已证实它在早期妊娠小鼠子宫内膜基质细胞中有表达。本文旨在进一步研究促胰液素在胚胎着床过程中的功能。通过real-time PCR、ELISA和原位杂交方法检测促胰液素、促胰液素受体、胞质型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,c PLA2)和膜相关的前列腺素E合成酶-1(membrane prostaglandin E synthase 1,m PGEs-1)在小鼠妊娠第4到8天子宫中的表达。体外培养妊娠第4天小鼠子宫基质细胞,转染促胰液素表达质粒,使用PKA抑制剂H89处理,24 h收集细胞。Real-time PCR和Western blot检测c PLA2、m PGEs-1和环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP responsive elementbinding protein,CREB)的表达,ELISA方法分析细胞上清液中前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的水平。结果显示促胰液素、c PLA2和m PGEs-1的m RNA在妊娠第5到7天着床点表达量逐渐增加,表达趋势一致。促胰液素在妊娠第6、7、8天血清中的含量显著高于第5天的含量,并且在第6到7天着床点中的含量明显高于第5天非着床点含量。转染促胰液素表达质粒,促进小鼠子宫基质细胞c PLA2、磷酸化c PLA2(p-c PLA2)和m PGEs-1的表达,但对PGE2没有明显的诱导。H89能明显降低促胰液素对CREB、磷酸化CREB(p-CREB)、c PLA2和p-c PLA2的诱导。以上结果表明在小鼠胚胎着床过程中促胰液素在子宫内膜基质细胞中表达量增加,促进p-c PLA2、c PLA2和m PGEs-1的表达,并通过PKA信号通路调节c PLA2/p-c PLA2的水平。

COX-2与mPGES-1在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)和膜结合型前列腺素E2合成酶1(mPGES-1)在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法分别检测49例肾透明细胞癌组织标本和21例正常肾组织标本中COX-2和mPGES-1的表达。结果:COX-2在正常肾组织中的阳性表达率为4.8%,在肾透明细胞癌组织中的阳性表达率为53.1%(P<0.05);mPGES-1在正常肾组织中的阳性表达率为4.8%,在肾透明细胞癌组织中的阳性表达率为40.8%(P<0.05);COX-2和mPGES-1的高表达均与肾透明细胞癌的病理分级和临床分期无相关性(P>0.05);COX-2和mPGES-1在肾透明细胞癌中的表达呈正相关(P<0.05),r=0.5。结论:COX-2和mPGES-1在肾透明细胞癌发生及发展过程中共同发挥重要作用;COX-2和mPGES-1可能成为肾透明细胞癌新的治疗靶点。

奶牛子宫组织a-7nAChR介导LPS上调PGE2合成抑制效应

产后奶牛子宫内膜炎是我国奶牛养殖业高发病之一,因此开发防治子宫内膜炎的药物及筛选药物靶点是当前研究热点。前期研究表明,脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)可明显促进奶牛子宫组织前列腺素E2(PGE2)合成,PGE2是炎症反应中疼痛和发热的重要介质,抑制PGE2合成可有效控制炎症损伤。在多种组织中激动α-7烟碱乙酰胆碱受体(α-7 nicotinic acetylcholine receptor,α-7 nAChR)具有抗炎效应,但是否通过PGE2合成途径发挥抗炎作用尚有争议。本研究目的在于调查在LPS刺激奶牛子宫内膜组织中,α-7nAChR能否调控PGE2合成。结果表明,LPS刺激子宫内膜组织12 h IL-6 mRNA表达量最高,因此作本研究炎症模型最佳LPS作用时间;α-7nAChR特异性激动剂PNU-2829875,10和15μmol/L浓度下可显著抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)和微粒体前列腺素E合成酶-1(Microsomal prostaglandin E synthase-1,m PGES-1)mRNA和蛋白表达及PGE2分泌,该抑制效应可被α-7nAChR特异性抑制剂甲基牛扁碱(MLA)逆转。上述结果表明奶牛子宫内膜组织α-7nAChR可抑制LPS上调PGE2合成效应,是防治奶牛子宫内膜炎潜在的药物靶点。

非甾体抗炎药研究的最新进展

非甾体抗炎药(NSAIDs)是一类广泛用于抗炎、解热、镇痛的药物,但由于胃肠道毒副作用和肾毒性使它的应用受到很大限制。因此研制出能降低传统NSAIDs副作用且具良好活性的新型NSAIDs成为这类药物发展的主要方向,如选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂、一氧化氮释放型NSAIDs、环氧化酶/脂氧合酶(COX/LOX)双重抑制剂、脂蛋白磷脂酶A2(LP-PLA2)抑制剂、前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)抑制剂以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制剂等。本文从这几个方面对NSAIDs最新研究进行了简要介绍。