抗体靶向合成型平滑肌细胞MR探针合成及体外成像的实验研究

目的探讨合成型平滑肌细胞单克隆抗体(SMemb)超微超顺磁性MR分子探针作为抗体靶向特异性探针体外MR成像的可行性。方法采用EDC/NHS化学偶联方法将SMemb与USPIO颗粒相结合,并测定其电子粒径、水合粒径、Zeta电位及弛豫效能等表征特性。SMemb标记探针(SMemb-USPIO)为实验组,未标记USPIO探针(USPIO)为对照组,PBS溶液为空白组。实验组及对照组探针分别与不同铁浓度探针恒温孵育,普鲁士蓝染色鉴定细胞内铁,确定最佳标记浓度。实验组和对照组探针与合成型VSMC共孵育,在7.0TMRI行体外MRI T2WI成像。结果抗体靶向探针与USPIO颗粒磁性相似,稳定性高。实验组及对照组各浓度间蓝染率有统计学差异(P<0.05)。合成型平滑肌细胞体外MR成像,实验组MR信号较对照组及空白组降低明显;随着细胞数的增加,实验组不同细胞浓度T2信号逐渐下降(P<0.01)。结论采用EDC/NHS方法制备抗体靶向探针及利用该探针进行体外MR成像是可行的。

肌腱蛋白C和肌腱蛋白X与转化生长因子β1与合成型血管平滑肌细胞在动脉粥样硬化斑块纤维化过程中关系的实验研究

目的 研究小鼠动脉粥样硬化模型斑块形成过程中肌腱蛋白C(TNC)、肌腱蛋白X(TNX)及转化生长因子β1(TGF-β1)与合成型血管平滑肌细胞(VSMC)表达及斑块纤维化的关系。方法 选择雄性APOE-/-小鼠25只为实验组,高脂饲料喂养;另选择雄性野生型C57BL/6小鼠25只为对照组,普通饲料喂养,两组小鼠分别于喂养10、16、22、28、34周各取5只腹主动脉进行HE染色观察斑块形成情况,免疫组化染色法定量测定斑块TNC、TNX、TGF-β1与原肌球蛋白4(TPM4)阳性表达区的总面积及相对灰度值,masson染色观察斑块胶原纤维形成情况。结果 实验组小鼠自16周起,腹主动脉有斑块形成,并且随高脂饲料喂养时间延长,斑块面积逐渐增大,斑块内TNC、TNX、TGF-β1、TPM4及胶原纤维表达随着喂养时间延长逐渐增加,16周、22周、28周、34周TNC的平均光密度值为(0.013±0.007)、(0.028±0.002)、(0.039±0.010)、(0.065±0.002),TNX的平均光密度值分别为(0.002±0.001)、(0.007±0.002)、(0.010±0.001)、(0.016±0.005),TGF-β1的平均光密度值分别为0.018±0.006、0.029±0.003、0.035±0.001、0.042±0.002,TPM4的平均光密度值分别为0.016±0.011、0.019±0.002、0.026±0.005、0.050±0.013,差异均有统计学意义(P<0.05)。TNC与TPM4、TNX与TPM4、TGF-β1与TPM4表达均呈正相关性及一致性,TNC/TPM4(R~2=0.640,P<0.05),TNX/TPM4(R~2=0.674,P<0.05),TGF-β1/TPM4(R~2=0.404,P<0.05)。结论 在动脉粥样硬化斑块形成过程中,随着斑块面积的增大,TNC、TNX、TGF-β1及合成型VSMC标记蛋白TPM4的表达逐渐增加,主要分布于胶原纤维表达区域,并且具有正相关性及一致性,证明TNC、TNX、TGF-β1及合成型VSMC可能存在协同正性调控动脉粥样硬化纤维斑块形成及进展的关系。

血管平滑肌细胞对动脉粥样硬化形成的作用研究

动脉粥样硬化的形成是复杂且缓慢的过程。血管平滑肌细胞可分为合成型和收缩型,参与动脉粥样硬化的发生和发展。该文介绍血管平滑肌细胞外泌体、表型转化、离子通道、自噬以及细胞外高血糖状态对动脉粥样硬化形成的影响。