聚羟基脂肪酸酯合成酶的改造和代谢途径构建的研究进展

聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)是许多细菌在非平衡生长条件下在胞内积累的以颗粒状态存在的碳源和能源储藏物质。PHA因其具有生物可降解性、生物相容性等许多良好的材料性质、可以作为化学合成塑料未来的替代品而引起广泛关注。但由短链脂肪酸或单一脂肪酸单体合成的PHA的材料性质具有局限性,需要利用多种单体合成满足实际需求的PHA材料。PHA合成酶的底物特异性和PHA合成代谢途径决定着PHA的单体组成情况,进而影响着PHA的理化特性和材料性能。因此需要对PHA合成酶进行改造,扩展其对底物的特异性。另一方面需要构建新的PHA合成代谢途径,能合成出一些不常见的且性能优良的PHA材料。综述了近些年对PHA合成酶改造的研究及PHA代谢途径构建的研究进展。

假单胞菌中聚羟基脂肪酸酯合成酶基因的克隆与分析

大多数二型聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)合成酶(PhaC)发现于假单胞菌中,其基因组成形式为两个PhaC基因中间有一个PHA降解酶PhaZ基因.根据已知的假单胞菌PHA合成酶基因区域的特殊结构,设计了采用PCR方法从假单胞菌中克隆PHA合成酶基因的克隆方案,并成功地对一株硝基还原假单胞菌(Pseudomonasnitroreducens)和一株石竹伯克霍尔德氏菌(Burkholderiacaryophylli)中的PHA合成酶基因进行了克隆.将克隆得到的phaC1,phaZ和phaC23个基因所编码的氨基酸序列与其他6株已知PHA合成酶基因的假单胞菌的相应序列进行比较,发现这3个蛋白质在假单胞菌中的相似性很高,由phaC1,phaZ和phaC23个基因所组成的基因区域在假单胞菌中非常保守.从对PhaC1,PhaZ和PhaC2的系统进化树分析可以发现,这3个蛋白质与整个PHA合成酶基因区域的系统进化树有着一致的结构.这表明假单胞菌中的PHA合成酶基因区域可能起源于共同的祖先,而其形成可能经历了一次PHA合成酶基因加倍的过程.

FDY油剂TFDY-98的研制

TFDY-98油剂采用了凝固点低,平滑性好的合成脂肪酸酯做主平滑剂,配方中辅以适量的阴离子表面活性剂,以提高油剂上浆性,通过对乳化剂的筛选,使油剂的温度适应性在20℃～50℃之间。该油剂配方经实际生产证明可纺性好,上浆性好,染色M率高。

阿司匹林栓剂直肠吸收的生物利用度试验

作者采用6种栓剂基质(半合成椰油酯、半合成脂肪酸酯,可可豆脂、聚乙二醇和意大利产基质)制成阿司匹林栓剂作家兔直肠给药,并与静脉注射和口服片剂比较,测定血药浓度,得出相对和绝对生物利用度,并计算药物动力学参数。结果5种基质的阿司匹林栓剂的生物利用度之间无显著差别,说明半合成椰油酯和半合成脂肪酸酯二种基质,与可可豆脂、水溶性基质聚乙二醇以及意大利产基质所制阿司匹林栓剂的生物利用度是相同的。阿司匹林栓剂直肠吸收和口服片剂之间的生物利用度也没有显著差别。

常用抗阴道感染药物置换价的测定与计算

目的 测定一些常用抗阴道感染药物的置换价 ,扩大文献中的药物置换价范围。方法 分别以 36 型半合成脂肪酸酯、聚乙二醇 (PEG)为基质 ,制备几种常用抗阴道感染药物的栓剂 ,测定相应的置换价。结果 不同药物采用不同基质所得置换价差异较大。结论 运用置换价能准确计算出药物和基质的用量 。

氟替中空泡腾栓的研制

目的 :建立氟罗沙星 -替硝唑中空泡腾栓的制备及质量控制方法。方法 :用36型半合成脂肪酸酯作基质制备氟罗沙星 -替硝唑中空泡腾栓 ;采用双波长紫外分光光度法同时测定氟罗沙星和替硝唑的含量。结果 :氟罗沙星和替硝唑平均回收率分别为99 72 %、99 08% (n=5) ,精密度分别为0 95%、1 02 %。结论 :本方法设计合理 。

阿奇霉素栓的研制

目的 研究阿奇霉素栓的处方、制备工艺、质量控制。方法 以半合成脂肪酸酯和硬脂酸为基质制备阿奇霉素栓 ,采用抗生素微生物检定法测定栓剂中阿奇霉素的含量。结果 采用本法制备的基质比较理想 ,质量可靠。抗生素微生物检定法测定阿奇霉素栓的含量为标示量的 96 .1% ,F =4 .5 %。结论 制剂工艺简便、质量稳定 。

大庆油田深层致密气抗高温防塌水平井水基钻井液技术

大庆深层徐家围子区块沙河子组致密气水平井,火山角砾岩、流纹岩地层岩性复杂,天然裂缝发育,地温梯度较高,以往采用聚磺混油水基钻井液和油基钻井液多发生井塌、卡钻、井漏等问题,且存在环保问题,在聚磺混油水基钻井液基础上,进一步优选抗高温聚酯封堵剂、脂肪酸合成酯润滑剂和抗高温泥饼改善剂,研发出具有低粘高切特性的抗高温防塌水平井水基钻井液体系,动塑比大于0.4,井底ECD平均降低2MPa,极压摩阻系数小于0.8,抗高温达160℃,共应用3口井,平均水平段长1050m,同比邻井钻井周期节约30d,解决了井壁稳定、润滑防卡和环保问题,实现裂缝性火山岩地层安全环保钻井施工,为大庆深层致密气水平井高效开发提供了技术支持。

重组肺炎克雷伯氏菌转化甘油为聚3-羟基丙酸

聚3-羟基丙酸[Poly(3-hydroxypropionate),P3HP]是一种生物可降解及生物相容的新型聚羟基脂肪酸酯。目前已鉴定的生物均不能天然合成P3HP。采用PCR克隆鼠伤寒沙门氏菌的丙醛脱氢酶(Pdu P)基因及罗尔斯通氏菌的聚羟基脂肪酸酯合成酶(Pha C)基因,构建共表达载体,转化肺炎克雷伯氏菌后获得两株重组菌。以甘油为唯一碳源进行摇瓶发酵,pdu P和pha C共用tac启动子的工程菌K.p(p ET-tac-pdu P-pha C)产生0.054 g/L的P3HP,而pdu P和pha C各自独用tac启动子的工程菌K.p(p ET-tac-pdu P-tac-pha C)产生0.091 g/L的P3HP。