寒喘祖帕单煎配方与配伍合煎对16HBE细胞抗炎活性及非靶向代谢组学差异的研究

目的考察寒喘祖帕按照传统配伍合煎及单煎配方的抗炎活性,并采用UPLC-Q-TOF/MS研究非靶向代谢组学差异。方法通过体外脂多糖诱导16HBE炎症细胞,使用CCK-8法筛选出单煎配方组和配伍合煎组的剂量;采用逆转录酶聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术测定细胞中炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达水平,并采用UPLC-TOF/MS技术对细胞进行非靶向代谢组学分析:分为正常组(16HBE细胞+培养基)、模型组(16HBE细胞+培养基+0.1μg/mL LPS)、寒喘祖帕单煎配方组(16HBE细胞+培养基+0.1μg/mL LPS+50μg/mL单煎配方)、寒喘祖帕配伍合煎组(16HBE细胞+培养基+0.1μg/mL LPS+50μg/mL配伍合煎)。以此探究寒喘祖帕颗粒发挥抗炎活性的相关代谢通路,寻找寒喘祖帕颗粒抗炎活性相关的差异代谢物。结果与正常组比较,模型组在给药浓度为0.1μg/mL时细胞生长存活率未受到限制,差异无统计学意义(P>0.05);配伍合煎组在给药浓度为0~400μg/mL范围内时,细胞存活率未受影响,浓度>800μg/mL时,细胞生长存活率下降,差异具有统计学意义(P<0.01);而单煎配方组在浓度<50μg/mL时,细胞生长存活率未受到限制,浓度≥100μg/mL时,细胞生长存活率下降,差异具有统计学意义(P<0.01);RT-PCR实验结果显示:与正常组比较,模型组的IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达上升,差异具有统计学意义(P<0.001),50μg/mL单煎配方较100μg/mL,IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达下降,差异具有统计学意义(P<0.001);在相同药物浓度干预下,与正常组比较,模型组的IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达上升,差异具有统计学意义(P<0.001),与模型组比较,单煎配方组和配伍合煎组可同时降低IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达,差异具有统计学意义(P<0.001);配伍合煎组与单煎配方组比较,配伍合煎组IL-6、IL-8 mRNA的表达较单煎配方低,差异具有统计学意义(P<0.05)。代谢组学分析结果筛选出模型组与配伍合煎组间的内源性差异代谢物68个,主要与色氨酸代谢、甘油磷脂代谢和嘧啶代谢等有关;模型组与单煎配方组间识别出内源性差异代谢物62个,主要与甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等有关。结论寒喘祖帕单煎配方与配伍合煎对LPS诱导的炎症细胞模型抗炎效果存在差异,非靶向代谢组学分析结果表明两种方式通过不同的代谢通路发挥抗炎活性。

舒肺压方单煎与合煎的成分差异及对肺动脉高压的影响

目的:探讨舒肺压方单煎、合煎成分特征及对肺动脉高压的改善作用。方法:通过超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)对舒肺压方单煎及合煎的成分进行定性、定量分析,明确不同煎煮法对舒肺压方成分特征的影响,并基于野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,观察舒肺压方单煎及合煎对肺动脉高压的改善作用。结果:舒肺压方单煎液及合煎液中均检出707种成分,单煎液与合煎液成分种类一致;其中644种成分含量无明显差异,63种成分含量具有显著差异;与单煎液比较,合煎液中有46种成分含量明显上调,17种成分含量明显下调;舒肺压方合煎较单煎可明显降低大鼠平均肺动脉压,改善肺部组织病理学损伤。结论:舒肺压方不同煎煮方式可影响其成分特征,合煎较单煎对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的改善作用更显著。

厚朴温中汤合煎与单煎药性一致性研究

目的研究厚朴温中汤合煎与单煎药性的一致性,探讨配方颗粒替用传统汤剂的适用性。方法采用透析与柱层析等方法制得厚朴温中汤合煎与单煎总提物及其总多糖、总皂苷、总黄酮、总木脂素和总生物碱。采用CCK-8法研究厚朴温中汤合煎与单煎总提物及其各组分对人胃癌HCG-27细胞体外增殖的影响来评价药性,通过显微镜观察药物对细胞形态的影响,台盼蓝染色观察药物对细胞的毒性。结果合煎与单煎总提物和总多糖在(5~800)μg·mL^(-1) 浓度范围内对HCG-27细胞的增殖影响都表现为促进,无细胞毒作用。合煎与单煎总皂苷在(5~400)μg·mL^(-1) 浓度范围内、总黄酮和总木脂素在(5~100)μg·mL^(-1) 浓度范围内、总生物碱在(5~800)μg·mL^(-1) 浓度范围内均对HCG-27细胞表现为低浓度促进,高浓度抑制,无细胞毒作用。结论根据细胞学药性评价法,厚朴温中汤合煎与单煎总提物及其各组分均表现为热性,厚朴温中汤合煎与单煎药性基本一致。

基于多指标成分含量测定结合化学计量学方法的栀子大黄汤合煎与单煎合冲物质基础对比研究

目的 建立同时测定栀子大黄汤水提液中15种化学成分含量测定的方法,并考察单煎合冲与合煎对15种成分溶出量的影响。方法 采用UPLC法,色谱柱为Acquity UPLC BEH(2.1 mm×100 mm, i.d.=1.7μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长为254 nm[京尼平龙胆二糖苷(genipin 1-gentiobioside, G1)、京尼平苷(geniposide, G2)、大豆苷、大豆苷元、染料木素]、283 nm(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷)、440 nm(西红花苷I、藏红花酸、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚),柱温35℃,流速0.3 mL/min,进样量为1μL,采用化学计量学方法分析在单煎合冲与合煎条件下栀子大黄汤15种化学成分溶出量的变化。结果 G1、G2、大豆苷、大豆苷元、染料木素、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、西红花苷I、藏红花酸、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在21.56~1 380.00μg/mL(R^(2)=0.999 8)、69.22~4 430.00μg/mL(R^(2)=0.999 6)、1.01~64.50μg/mL(R^(2)=0.999 8)、0.64~41.08μg/mL(R^(2)=0.999 8)、0.61~39.28μg/mL(R^(2)=0.999 8)、8.03~514.00μg/mL(R^(2)=0.999 8)、70.63~2 260.00μg/mL(R^(2)=0.999 1)、12.72~814.00μg/mL(R2=0.999 6)、57.81~1 387.50μg/mL(R^(2)=0.999 2)、5.94~380.00μg/mL(R^(2)=1.000 0)、0.02~1.50μg/mL(R^(2)=0.999 8)、1.11~71.00μg/mL(R^(2)=0.999 6)、0.19~12.45μg/mL(R^(2)=0.999 9)、0.10~6.64μg/mL(R^(2)=0.999 9)和0.03~1.66μg/mL(R^(2)=0.999 8)线性范围内关系良好。等体积合冲样品中柚皮苷、新橙皮苷、大豆苷、大豆苷元、染料木素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、藏红花酸等9个成分的溶出含量较栀子大黄汤合煎样品显著提高,增高达到12%以上,尤以对含量较低成分如大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等溶出增加显著,溶出达50%以上;而对于栀子大黄汤中含量最高的G2,含量居中的G1、橙皮苷、芸香柚皮苷、藏红花素等成分,溶出量变化不大,变化波动在±5%,差异较小。结论 栀子大黄汤复方合煎与单煎合冲样品在化学成分种类上未见明显差异,对含量较低的成分,等体积有利于其溶出。可为复方制剂与单味药配方颗粒制剂的临床合理应用与评价提供参考依据。

白虎汤单煎、合煎化学成分差异研究

目的考察白虎汤单煎、合煎化学成分差异。方法该药物冻干粉的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析采用Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子模式。建立化学成分数据库,采用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析鉴定差异性成分。结果合煎、单煎化学成分组成相同,但含量存在差异,新芒果苷、芒果苷、甘草苷、薤白苷J、异甘草苷、知母皂苷BⅡ、甘草皂苷A3、22-乙酰氧基-甘草皂苷、甘草皂苷G2、羟基甘草酸、甘草酸异构体是差异性成分。结论该方法可用于评价白虎汤传统汤剂、配方颗粒汤剂的化学一致性,为其临床合理应用提供参考依据。

基于UPLC指纹图谱的大承气汤单煎液与合煎液对比研究

目的建立大承气汤单煎液与合煎液UPLC指纹图谱,比较大承气汤单煎液与合煎液的差异。方法采用UPLC法,以Waters ACQUITYHSS T3柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm)为色谱柱,柱温为30℃,以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,检测波长为225 nm,测定20批次大承气汤单煎液与合煎液指纹图谱,并采用相似度评价软件、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)对结果进行分析。结果建立了大承气单煎液与合煎液UPLC指纹图谱,标定了19个共有峰,指认了其中11个峰;20批大承气汤单煎液、合煎液相似度均在0.90以上,PCA分析出4个主成分反映了19个共有色谱峰的信息;OPLS-DA分析筛选出影响大承气汤单煎液与合煎液差异的5个成分峰。结论本研究为大承气汤中药复方配方颗粒的制备工艺及质量标准的提高研究提供参考。

加减温经汤单煎与合煎颗粒治疗寒凝血瘀型功能性月经病的临床有效性及安全性研究

探析加减温经汤单煎与合煎颗粒治疗寒凝血瘀型功能性月经病的临床有效性及安全性。方法 统计研究者医院在2021-11至2023-2月时间段内,88例寒凝血瘀型功能性月经病病人看诊治疗纳入样本,依据病人就诊尾号随机盲目法分为2组,所有病人均给予加减温经汤药物进行治疗,其中对比组采取单煎颗粒治疗方式,创新组则给予合煎颗粒进行治疗,观察病人干预效果。结果 在中医症状评分方面,创新组各项指标较对比组康复更优,有一定距离差异(P<0.05)。结论 对于寒凝血瘀型功能性月经病病人,分别给予温经汤单煎与合煎颗粒治疗,其中合煎颗粒效果更加,可明显改善病人痛经以及月经不调等体征,减轻疼痛感,促进机体血流循环,取得令病人肯定和满意的效果,具有推荐价值。

HPLC法测定麻黄汤分煎及合煎汤剂中甘草酸含量

目的 测定麻黄汤分煎、合煎汤剂中甘草酸含量。方法 采用 HPL C法测定麻黄汤分煎与合煎液中甘草酸的含量。选 Hypersil C1 8柱 ,流动相 :乙腈 - 0 .1%乙酸水溶液 (33∶ 6 7) ,检测波长 2 5 4nm。结果 分煎液甘草酸平均回收率为 10 2 .43% ,RSD =2 .6 5 % ;合煎液甘草酸平均回收率为 99.41% ,RSD=3.11%。结论 方法简便、准确 。

寿胎丸加味方合煎与单煎混合浓缩颗粒的临床等效性研究

传统的中药饮片能适应中医学的辨证施治,随证加减的治疗要求,使中医治疗学上的因人、因时、因地制宜的治疗大法在临床医疗中得以实施.但传统的中药饮片汤剂也存在着因煎煮技术不规范,致使有效成分未必得到,而挥发性成分容易丢失,汤剂质量不稳定或不能满足应急用药或体积较大,携带、贮存不方便等缺点.单味中药浓缩颗粒是在传统的中药饮片的基础上,用现代科学技术提取制成的新剂型,它既保留了中药饮片在临床医疗中能辨证施治,随证加减的特点,又保持了中药饮片原有的药性和药效,且具有配制简单,用量准确,服用量少,不需煎煮,携带方便,可随时应急使用等优点,有利于临床应用.但是,单味中药浓缩颗粒与中药饮片在临床疗效上有没有差异?单味中药混合浓缩颗粒能否代替传统的中药饮片汤剂在临床上应用?尚需要临床研究的依据.

健胃舒颗粒分煎与合煎的临床观察及实验研究

目的 :观察中药颗粒分煎与合煎是否存在疗效、药效不同差异。方法 :采用自拟复方健胃舒颗粒治疗脾虚肝郁型功能性消化不良患者 10 0例 ,分为分煎组与合煎组各 5 0例 ,对比观察两组临床疗效及药效。结果 :两组临床治愈率分别为 72 %和 70 % ,总有效率均为 96 % ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;并且两组在抑制大鼠胃酸、胃蛋白酶活性 ,调节小鼠胃功能 ,促进小肠推进度及镇痛药理实验中差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :健胃舒颗粒分煎与合煎疗效、药效保持一致 ,从一个侧面为单味中药浓缩颗粒在临床辨证施治中 ,灵活配方及加减应用 。

大黄甘草汤单煎液与合煎液中蒽醌类化合物和甘草酸煎出量的变化

目的:比较大黄甘草汤单煎与合煎过程中蒽醌类化合物、甘草酸的含量变化,考察中药复方合煎与分煎的差异。方法:采用RP-HPLC法分别测定大黄甘草汤单煎液与合煎液中蒽醌类化合物和甘草酸煎出量。结果:蒽醌类化合物在单煎与合煎液中的含量无明显变化,甘草酸在合煎液中含量均明显高于单煎液。结论:大黄甘草汤使用时或制成颗粒剂时应采用大黄与甘草合煎的方式制备,否则会降低甘草酸的含量,影响大黄甘草汤的药效。

补肾方分煎和合煎提取物的指纹图谱比较

目的 :以指纹图谱层方式 ,研究补肾方分煎和合煎提取物中化学成分的差异。方法 :以常规方法制备补肾方分煎和合煎的提取物 ,采用HPLC法 ,考察并确定最佳的检测波长、不同品牌的C18填料的色谱柱 ,并采用优化的色谱条件对补肾方的合煎和分煎提取物进行测定 ,比较两者指纹图谱的差异。结果 :分煎和合煎提取物中化学成分组成存在差异 ,分煎提取物中主要化学成分的提取率大于合煎提取物 ,且共有化学成分的组成比例也不同。结论 :补肾方分煎和合煎提取物中主要化学成分组成及其共有成分比例存在差异。

HPLC研究芍药甘草汤合煎与分煎的化学成分变化

研究芍药甘草汤合煎和分煎提取物中化学成分的差异。方法:以常规方法制备芍药甘草汤合煎和分煎的提取物,采用HPLC法,考察并确定最佳的检测波长,并采用优化的色谱条件对芍药甘草汤的合煎和分煎提取物进行测定,比较两者HPLC图谱的差异。结果:合煎后未发现明显新峰,但合煎和分煎提取物各共有峰相对积分面积存在差异,合煎提取物中主要化学成分的提取率大于分煎提取物,且共有化学成分的比例也不同。结论:芍药甘草汤合煎和分煎提取物中主要化学成分组成比例存在差异。

茵陈蒿汤分煎、合煎对利胆及腹腔巨噬细胞吞噬功能影响的比较研究

大鼠经十二指肠分别给予茵陈蒿汤分煎、合煎药液，观察药后０．５、１、２、３、４ｈ的胆汁排出量，实验结果表明，茵陈蒿汤分煎、合煎的１４．８５ｇ／ｋｇ剂量组能明显增加大鼠胆汁排出量。以茵陈蒿汤分煎、合煎药液对泼尼松造型的小鼠分别灌胃７ｄ，能显著提高其腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。在两种药效学指标上，茵陈蒿汤分煎。

三黄泻心汤合煎与分煎样品中盐酸小檗碱含量比较研究

目的对三黄泻心汤合煎与分煎样品中盐酸小檗碱含量进行比较,为临床应用提供依据。方法采用高效毛细管电泳仪测定盐酸小檗碱的含量。结果合煎样品中盐酸小檗碱含量明显低于分煎样品中的含量。结论三黄泻心汤分煎样品的药效是否比合煎样品的好,还应该通过临床实验才能作出结论。

黄芩汤分煎液与合煎液中黄芩苷、芍药苷和甘草酸含量的比较

目的：比较黄芩汤（黄芩、芍药、甘草、大枣）分煎液与合煎液中黄芩苷、芍药苷、甘草酸的含量变化。方法：采用Hy—persil BDS C18柱，流动相分别以甲醇-水-磷酸（47：53：0．2），在280nm波长测定黄芩苷；乙腈-水-磷酸（18：82：0．1），在230nm波长测定芍药苷；甲醇-水-磷酸盐缓冲液（70：29：1）为流动相，在250nm波长测定甘草酸。结果：3种成分的线性范围分别为黄芩苷2．88—72．00μg／mL，芍药苷2．85—22．80μg／mL，甘草酸4．16—52．00μg／mL，黄芩苷含量为合煎液明显高于分煎液，芍药苷、甘草酸含量为合煎液与分煎液无明显差别。结论：黄芩汤不同煎煮方法对有效成分的溶出有影响，应根据实际情况进行处理。

归脾汤单煎与合煎药理作用比较研究

归脾汤单煎和合煎可明显抑制小鼠自发活动次数，延长小鼠睡眠时间，两种煎剂的作用比较单煎优于合煎；两种煎剂可明显抑制由大黄所致脾虚小鼠胃排空作用，表现为甲基橙残留率上升，合煎优于单煎；对失血性贫血小鼠，两种煎剂均明显提高Ｈｂ含量，单煎优于合煎；对小鼠网状内皮系统吞噬功能无明显影响。

羌活胜湿汤单煎与合煎抗炎、镇痛作用比较研究

对比研究羌活胜湿汤单煎与合煎在相同剂量对抗炎、镇痛的作用，结果表明此方在蛋清性足肿胀实验中合煎高剂量比单煎高剂量效果占优，在其余指标上，合煎、单煎数值虽上下浮动。