合胞素通过促进线粒体去极化诱导小鼠淋巴瘤细胞EL4细胞凋亡

目的探讨人类内源性病毒W家族囊膜蛋白合胞素(syncytin)对白血病细胞凋亡的影响及其信号机制。方法对小鼠淋巴瘤细胞EL4细胞稳转表达合胞素,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期及线粒体膜电位情况,用试剂盒检测PKC和Caspase-3活性。结果合胞素稳定过表达后,EL4细胞形态和PKC活性无明显改变,细胞凋亡明显增加,线粒体膜电位去极化增加,Caspase-3活性增强。结论合胞素可诱导小鼠淋巴瘤细胞EL4细胞线粒体途径细胞凋亡,在白血病的发生发展过程中发挥重要作用。

合胞素-1与肿瘤相关性的研究进展

合胞素-1(syncytin-1)是人类生殖系统普遍存在的一种包膜蛋白,孕早期定位于绒毛膜滋养层,在胎儿发育过程中起重要作用,其异常表达可导致宫内发育迟缓、病理性胚胎、肿瘤和多发性硬化症等。本文将对syncytin-1的形成、功能与肿瘤相关的激活调控途径等进行综述。

人类合胞素在妊娠中的研究进展

合胞素(syncytin)是一类由人类内源性逆转录病毒所编码的膜糖蛋白,在生理和病理情况下都起着至关重要的作用.近年来,合胞素的研究引起了越来越多的学者注意,并且迅速成为一个研究热点.基于目前的研究进展,本文主要介绍合胞素在母-胎界面中的生理功能,及合胞素的相关调控因子和通路,总结其表达异常和不同病理妊娠的关系,探讨合胞素是否可成为病理妊娠诊断的标志物之一.

合胞素1相关疾病的研究进展

合胞素1(syncytin-1)由人内源性逆转录病毒W家族的env基因编码,是具有高度融合作用的糖膜蛋白,其在健康个体特异性表达于孕期胎盘,促进滋养层细胞融合形成胎盘合体滋养层。Syncytin-1在个体内的异常表达可能与某些疾病的发生相关。本文对与syncytin-1相关疾病进行综述。

重度子痫前期孕妇中NGF、Syncytin-1的表达及临床意义

目的研究重度子痫前期(severe preeclampsia,SPE)孕妇血清及胎盘组织中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、合胞素1(Syncytin-1)的表达水平及其临床意义。方法选取2021年12月~2022年6月于徐州医科大学附属医院产科住院行剖宫产分娩的孕妇90例,分为早发型SPE 30例(早发组)、晚发型SPE 30例(晚发组)及同期正常孕妇30例(对照组)。收集3组孕妇母血和胎盘组织,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色检测各组NGF、Syncytin-1的表达水平,分析其临床意义。结果ELISA检测结果显示,与健康妊娠晚期孕妇比较,患有SPE的孕妇血清中NGF、Syncytin-1表达水平降低,且早发组低于晚发组(P<0.05)。IHC染色检测结果显示,与健康妊娠晚期孕妇比较,患有SPE的孕妇胎盘组织中NGF、Syncytin-1表达水平降低,且早发组低于晚发组(P<0.05)。结论3组孕妇的血清及胎盘组织中均有NGF、Syncytin-1的表达,且在正常孕妇、晚发型SPE、早发型SPE中的表达依次降低,可能是通过影响胎盘的正常发育参与SPE的发生、发展。

重组人ASCT2胞外结构域ECL2在大肠杆菌中的表达及其鉴定

中性氨基酸转运蛋白(ASCT2)是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体,ECL2是该受体的其中一个较大的胞外结构域.通过RT-PCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中克隆ASCT2基因编码区全长序列,再从中扩增ASCT2的胞外区ECL2序列,与pET-41b连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌中获得高效表达,重组蛋白在N-和C-端分别融合谷胱甘肽转移酶(GST)和His6标签,融合蛋白在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白,该蛋白可结合在表达合胞素的MCF-7细胞表面,具有结合合胞素的潜在活性,这些结果为进一步研究ASCT2与合胞素的相互作用奠定了基础.

分子内二硫键对HERV囊膜蛋白融合核心结构的影响

合胞素(Syncytin)是一类由人俘获的逆转录病毒囊膜蛋白,与胎盘的形态发生中细胞滋养层到合胞滋养层的分化过程十分相关。Syncytin与人免疫缺陷病毒I型(HIV-1)囊膜蛋白(Env)在结构上具有相似的特点,二者可能具有相似的膜融合机制。本文通过PCR对融合核心部位七肽重复区HR1和HR2之间linker中自然存在的一对保守的分子内二硫键进行定点突变,表达纯化该突变蛋白,并进行了相应的结构及稳定性探讨,通过与未突变蛋白的性质比较确证该分子内二硫键在蛋白结构的正确形成及稳定性上起着一定的作用。

组蛋白修饰与子痫前期发病的研究进展

子痫前期是一种严重的妊娠并发症,其发病的二阶段学说是该病重要的病理生理学基础。滋养细胞的发育、分化及细胞间的融合作用,是其发挥侵袭功能的前提。众多分子可影响滋养细胞的功能,大量证据表明,表观遗传学与子痫前期的发病存在联系,但其在子痫前期发病中的作用仍需进一步研究。本文着重讨论表观遗传学中组蛋白修饰对滋养细胞功能的影响,为研究子痫前期的发生发展提供新的方向。

早发型子痫前期患者血清T-cadherin、Syncytin-1检测的临床意义

目的探讨早发型子痫前期(E-PE)患者血清T-钙黏蛋白(T-cadherin)、合胞素-1(Syncytin-1)检测的临床意义。方法选取2017年1月至2018年6月在该院接受治疗的90例E-PE患者作为E-PE组,另选取同期在该院行产前检查的90例健康孕妇作为健康对照组。检测两组受试者血清T-cadherin、Syncytin-1的表达水平,并收集所有受试者一般资料、血压情况、24 h尿蛋白定量、子宫动脉血流参数进行分析。结果E-PE组体质量指数、收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量、收缩期与舒张期血流速度比值(S/D)、搏动指数(PI)、阻力指数(RI)均高于对照组,T-cadherin、Syncytin-1表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。E-PE患者T-cadherin、Syncytin-1表达水平与收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量、S/D、PI、RI均呈负相关(P<0.05)。T-cadherin、Syncytin-1联合检测的灵敏度、特异度分别为77.78%、84.44%。结论血清T-cadherin、Syncytin-1与E-PE的发生和发展密切相关,二者联合检测对E-PE有较高的诊断价值。

STOX1 Syncytin-1 miR-29b在早发型子痫前期中的表达及相关性分析

目的探究STOX1、合胞素-1(Syncytin-1)及微小RNA-29b(miR-29b)在早发型子痫前期中的表达情况,并分析其相关性。方法选取2020年5月—2021年5月在丽水市中心医院就诊的早发型子痫前期患者79例为观察组,另选取同期在该院进行产前检查的健康孕妇79例为对照组。收集两组研究对象清晨空腹静脉血3 ml离心处理,RT-PCR法检测STOX1、miR-29b表达,Western Blot法检测Syncytin-1表达,相关性采用Pearson相关性分析,采用ROC曲线分析STOX1、Syncytin-1及miR-29b对早发型子痫前期的预测价值。结果观察组患者STOX1、miR-29b表达水平[(1.69±0.23)、(2.03±0.35)]高于对照组[(1.02±0.12)、(1.26±0.17)],Syncytin-1表达水平[(0.41±0.06)]低于对照组[(0.98±0.11)],差异均有统计学意义(t=22.960、17.590及40.430,均P<0.05)。重度早发型子痫前期患者STOX1、miR-29b表达水平高于轻度早发型子痫前期患者,Syncytin-1表达水平低于轻度早发型子痫前期患者,差异均有统计学意义(均P<0.05);BMI≥25 kg/m^(2)早发型子痫前期患者STOX1、miR-29b表达水平高于BMI<25kg/m^(2)早发型子痫前期患者,Syncytin-1表达水平低于BMI<25kg/m^(2)早发型子痫前期患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。STOX1、Syncytin-1及miR-29b联合检测对早发型子痫前期的诊断价值高于单项诊断(P<0.05)。三者联合检测的曲线下面积为0.905,灵敏度为90.15%,特异度为72.66%。早发型子痫前期患者STOX1、Syncytin-1表达呈负相关关系(r=-0.499,P<0.05),早发型子痫前期患者STOX1、miR-29b表达呈正相关关系(r=0.396,P<0.05),早发型子痫前期患者Syncytin-1、miR-29b表达呈负相关关系(r=-0.443,P<0.05)。结论STOX1、Syncytin-1及miR-29b在早发型子痫前期中呈异常表达,三者表达与早发型子痫前期患者临床特征密切相关,且三者具有一定相关性,检测STOX1、Syncytin-1及miR-29b表达对早发型子痫前期具有一定的诊断价值。

重组人ASCT2的C-末端胞外结构域的原核表达、纯化及鉴定

中性氨基酸转运蛋白(ASCT2)是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体,其最大的胞外结构域存在于C-末端的105个氨基酸(以下简称TAIL)。通过RT-PCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中克隆ASCT2基因编码区全长序列,再从中扩增ASCT2的TAIL序列,与pET-41b(克隆位点的N-和C-端分别有谷胱甘肽转移酶和His6标签序列)连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌中获得表达,免疫印迹显示重组蛋白TAIL在细菌裂解液上清和沉淀(包涵体)中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化获得高纯度的TAIL蛋白,该蛋白可结合在表达合胞素的MCF-7细胞表面,提示其可能具有结合合胞素的活性。

ASCT2胞外域ECL2原核可溶性表达条件的优化及其纯化

目的构建重组人ASCT2胞外域ECL2融合蛋白的原核表达载体，优化其在大肠埃希菌中可溶性表达的条件，并获得纯化的ECL2蛋白。方法以PCR方法扩增编码ECL2的DNA片段，插入至pET-41b载体中，构建ECL2的原核表达载体，转化至大肠埃希菌，优化可溶性表达条件，GSH—Agarose亲和层析纯化并鉴定，与MCF-7细胞结合活性的测定。结果免疫印迹显示，ECL2融合蛋白既表达于包涵体中，也能以可溶性形式表达。随IPTG浓度的增高，可溶性表达水平提高；培养温度为28℃和33℃时可溶性产物高于37℃；而随诱导时间的延长至12h以上，可溶性表达量下降。可溶性表达优化条件为：温度33℃、IPTG浓度0．4mmol／L、诱导时间4h。经亲和层析获得高纯度ECL2蛋白并具有与MCF-7细胞结合活性。结论优化了ECL2融合蛋白的可溶性表达条件，通过亲和层析一步法可获得高纯度融合蛋白。

复发性流产患者绒毛组织中Hox B3、TSP-1和Syncytin-1的表达及与微血管密度关系分析

目的探讨HoxB3、血小板反应蛋白1(TSP-1)及人合胞素1(Syncytin-1)在复发性流产患者绒毛组织中的表达及其与血管生成的关系。方法选择2018年2月至2020年2月青岛市市立医院接诊的89例复发性流产患者为研究对象,设为试验组,并选择青岛市市立医院同期体检健康孕妇80例作为对照组,分析绒毛组织中HoxB3、TSP-1及Syncytin-1在复发性流产患者中表达情况及与血管生成的关系。结果试验组患者绒毛组织HoxB3、TSP-1及Syncytin-1表达量灰度值水平均显著低于对照组(P<0.05);两组蜕膜组织切片微血管密度水平比较无显著差异;试验组患者绒毛组织切片中微血管密度水平均显著低于对照组(P<0.05);相关性分析结果显示,微血管密度和HoxB3、TSP-1及Syncytin-1之间均呈正相关(r=0.786,0.781,0.807,P<0.05)。结论在复发性流产患者绒毛组织中HoxB3、TSP-1及Syncytin-1水平异常表达可能与血管生成障碍有关。