镁钙合金浸提液对人结肠黏膜上皮细胞中基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶抑制因子3表达的影响

目的研究不同浓度镁钙合金浸提液对人结肠黏膜上皮细胞NCM460中基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)表达的影响。方法用镁钙合金制成不同浓度(体积分数10%、50%和100%)的浸提液,并将NCM460细胞制成5×10~6L^(-1)的细胞悬液,分为空白对照组及实验1、2、3组,空白对照组每孔加入含体积分数10%胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔高糖培养基2 000μL,实验1、2、3组每孔分别加入体积分数10%、50%及100%的镁钙合金浸提液2 000μL,分别培养1、3、5 d,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测NCM460细胞中MMP9和TIMP3 mRNA的表达,免疫印迹法检测NCM460细胞中MMP9和TIMP3蛋白表达。结果培养1 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中MMP9 mRNA、TIMP3 mRNA表达水平均显著低于空白对照组(P<0.05);培养3、5 d后,实验1组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平仍显著低于空白对照组(P<0.05),实验2、3组NCM460细胞中MMP9mRNA表达水平均显著高于空白对照组和实验1组(P<0.05);培养5 d后,实验3组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平显著高于实验2组(P<0.05)。培养3、5 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平均显著高于培养1 d后;培养5 d后,实验1组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平与培养3 d后比较差异无统计学意义(P>0.05),实验2、3组NCM460细胞中MMP9 mRNA表达水平均显著高于培养3 d后(P<0.05)。培养1 d后,实验2、3组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平均显著高于实验1组(P<0.05)。培养3 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),实验2组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平均显著低于实验1、3组(P<0.05)。培养5 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3 mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。实验1组NCM460细胞中培养3、5 d后的TIMP3 mRNA表达水平均显著高于培养1 d后(P<0.05),培养5 d后的TIMP3 mRNA表达水平显著高于培养3 d后(P<0.05)。实验2组NCM460细胞中培养3 d后的TIMP3mRNA表达水平显著低于培养1 d后(P<0.05),培养5 d后的TIMP3 mRNA表达水平显著高于培养1、3 d后(P<0.05)。实验3组NCM460细胞中培养5 d后的TIMP3 mRNA表达水平显著高于培养1、3 d后(P<0.05)。培养5 d后,实验1组NCM460细胞中MMP9蛋白表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);实验2、3组NCM460细胞中MMP9蛋白表达水平均显著高于空白对照组和实验1组(P<0.05);实验3组NCM460细胞中MMP9蛋白表达水平与实验2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。培养5 d后,实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);实验1、2、3组NCM460细胞中TIMP3蛋白表达水平两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度的镁钙合金浸提液对NCM460细胞中的MMP9及TIMP3基因表达有一定的影响,容易导致早期炎症反应的发生,其机制可能与浸提液中的钙离子浓度有关。

镁合金浸提液对肠上皮细胞Bcl-2及Caspase-3的影响

目的研究不同浓度Mg-Ca合金浸提液对人结肠黏膜上皮细胞NCM460凋亡调控因子Bcl-2及Caspase-3表达的影响。方法将Mg-Ca合金制成不同浓度(100%、50%和10%)的浸提液,体外培养人结肠黏膜上皮细胞NCM460,以含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基作为阴性对照。采用逆转录聚合酶链反应法及Western-bloting法检测不同浓度合金浸提液对NCM460细胞Bcl-2及Caspase-3 RNA及其表达的影响。结果在NCM460细胞分别经100%、50%、10%浸提液处理5 d后,Bcl-2基因在50%或100%浸提液的表达显著低于在对照组细胞的表达。而Caspase-3基因在100%、50%和10%浸提液处理过的细胞中的表达显著高于在对照组的表达。结论 Mg-Ca合金浸提液在一定范围内浓度较高时易诱导NCM460细胞Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达,这可能与镁离子及钙离子浓度有关。

NiTi,317L金属浸提液对犬食管成纤维细胞增殖功能的影响

目的：研究ＮｉＴｉ，３１７Ｌ两种合金的浸提液对培养的犬食管壁成纤维细胞增殖功能的影响。方法：采用ＮｉＴｉ、３１７Ｌ金属浸提液与原代培养食管壁成纤维细胞（Ｆｂ）共培养，ＭＴＴ法检测不同培养时间Ｆｂ增殖功能的变化。结果：ＮｉＴｉ，３１７Ｌ金属浸提液对Ｆｂ增殖功能具有轻度抑制作用，ＮｉＴｉ金属浸提液较３１７Ｌ浸提液作用稍强。结论：ＮｉＴｉ。

本期专题：口腔金属烤瓷合金材料的生物学性能

1 4种烤瓷冠基底合金浸提液影响人牙龈成纤维细胞中Bcl-2和Bax的表达——见2012年16期2943页。

新型304-Cu抗菌矫治器的细胞毒性

背景:正畸矫治器的戴用破坏了牙齿及其周围组织的环境,造成菌斑堆积,引起一系列不良反应。目的:检测含铜抗菌不锈钢正畸矫治器的细胞毒性。方法:①CCK-8检测细胞增殖:取生长旺盛的人口腔上皮癌细胞KB,实验组加入含铜抗菌不锈钢材料浸提液,对照组加入普通医用不锈钢材料浸提液,阴性对照组加入DMEM培养基,阳性对照组加入苯酚,分别培养24,48,72h。②流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡:观察普通医用不锈钢、含铜抗菌不锈钢材料对数生长期末人口腔上皮癌细胞KB凋亡的影响,设置空白对照组。结果与结论:①培养48h后,阳性对照组A值随作用时间延长逐渐降低,其余组细胞A值随时间延长逐渐递增(P<0.05),且实验组高于对照组(P<0.05)。普通不锈钢和抗菌不锈钢材料的细胞毒性均为1级。②普通医用不锈钢、含铜抗菌不锈钢组凋亡细胞均较少,且含铜抗菌不锈钢组少于普通医用不锈钢组(P均<0.05)。表明含铜抗菌不锈钢材料生物相容性良好,毒性等级与医用不锈钢相同,符合口腔正畸材料的临床应用要求。