改良吉氏染色法观察体外培养的阴道毛滴虫分裂繁殖

采用改良吉氏染色法观察体外培养的阴道毛滴虫分裂相。结果显示,分裂间期为66.5%,二分裂期为24.1%,多分裂期为9.4%。二分裂虫体可划分为前有丝分裂期、前期、中期、后期和末期。多分裂虫体可见含3～7或8个子体,其中含3和4个子体的分别占69.1%和24.5%。还可见一些形态异常虫体。

用于PCR诊断皮肤利什曼病的存档吉氏染色涂片中利什曼原虫DNA的提取与扩增

在伊朗,由硕大利什曼原虫、热带利什曼 原虫等引起的皮肤利什曼病(CL)是一个重要的健康问题,其部分原因是由于CL诊断困难。最简便的一种诊断方法是通过显微镜检查皮损组织吉氏染色涂片中的病原体。本文作者采用从存档的染色涂片刮取物中提取利什曼原虫DNA。

中性树胶封片延长吉氏染色玻片标本使用效果的观察（摘要）

中性树胶封片延长吉氏染色玻片标本使用效果的观察（摘要）石秀珍（寄生虫学教研室）关键词树腔；封片；方法改良吉氏染色法是观察血液及骨髓细胞之原虫常用的方法之一。随着医疗水平的提高，寄生虫病的减少，使标本的来源日益困难。因此，提高及延长吉氏染色标本的使用寿...

吉氏染色法对疟原虫染色效果影响因素分析

目的了解吉氏染色法对疟原虫染色效果的影响因素,寻找出最佳的染色条件。方法比较吉氏染色法不同染色时间、不同染液浓度以及染液中颗粒性杂质的去除对外周血中疟原虫的染色情况,寻找最佳效果。结果在本实验室自制吉氏染液薄血膜染色的最佳染色时间和最佳染色浓度分别为10min、1∶5稀释;15min、1∶10稀释;20min、1∶15稀释以及25min、1∶20稀释;厚血膜染色5min就能达到最佳结果。自制吉氏原液经离心后再稀释染色,染色效果比未离心的原液好,镜下观察杂质少而干净。结论吉氏染色法对疟原虫的染色效果的影响因素有染色时间和染液浓度等,相关实验室应予关注。

人芽囊原虫病病原学诊断不同染色方法的比较研究

目的:探索人芽囊原虫病较好的病原学诊断染色方法。方法:用直接涂片法、碘染色法、三色染色法和吉氏染色法对人芽囊原虫病人粪便进行观察,同时在吉氏染色法基础上,用0.25%盐酸水溶液分色,进行对比观察。结果:改良吉氏染色法背景为淡红色,可见颗粒型和空泡型虫体。虫体着色较深,边缘整齐,细胞壁较厚。细胞核着色较深、呈月芽状或块状,虫体结构清晰。结论:较之其它几种方法,改良吉氏染色法方法简单实用,容易掌握,染色效果最好,便于在临床上推广应用。

阴道毛滴虫染色标本制作的改进

以往用甲醇固定,吉氏染色法制作阴道毛滴虫标本,效果往往不甚满意。多年来,我们在制作滴虫标本过程中,对其固定及染色方法进行了一些探索。发现用戊二醛固定、吉氏染色,再以适当的酸碱度磷酸盐缓冲液冲洗分色。这样染出的阴道毛滴虫标本旧显优于甲醇固定法所染出的标本。现将方法简介如下:

早孕胚胎绒毛染色体检查及异常核型病例的家系追踪观察

本文采用早孕期绒毛直接制备染色体 G 带方法对100例人工流产早孕胚胎绒毛染色体作了检查及异常核型分析。在制片成功的87例中发现染色体异常4例,自发畸变率为4.8%。对异常病例的病因作了讨论。

恶性疟原虫薄血膜瑞氏-吉氏染色的效果观察

目的探索瑞氏-吉氏染色液对疟疾患者外周血薄血膜标本的染色效果。方法患者,男性,53岁,2021年5月去莫桑比克务工,2022年11月11日入境深圳,出现发热,深圳市宝安区疾病预防控制中心采用疟疾快速诊断检测,结果呈阳性,考虑为恶性疟疾,遂送往中山大学附属第七医院进行进一步诊疗。采用瑞氏-吉氏染色液对该患者外周血薄血膜标本进行染色。结果光学显微镜下,经瑞氏-吉氏染色后薄血膜上的恶性疟原虫环状体和配子体颜色鲜艳、结构清晰、易辨认,且标本可长久保存。结论外周血薄血膜上的恶性疟原虫经瑞氏-吉氏染色的效果好,可应用于疟疾的显微镜诊断。

2例输入性卵形疟的实验室检测

目的比较输入性卵形疟实验室检测方法,分析他们的基因特征。方法分别用吉氏染色镜检、CareStartTM疟疾快速诊断试剂盒和巢式PCR等3种方法。对2例河南省自刚果(布)务工归来的输入性卵形疟病例进行检测,并比较检测结果。对2例外周血中疟原虫的18S rRNA基因进行测序、基因特征和同源性分析。结果2例患者均通过吉氏染色镜检观察到典型的卵形疟原虫形态,巢氏PCR均扩增出与卵形疟预期一致的特异性条带,但CareStartTM疟疾快速诊断试剂盒检测结果均为阴性。对2例外周血中疟原虫的18S rRNA基因测序,获得一条长度均为906 bp的序列,GC含量为35.4%,与已知卵形疟18S rRNA的基因序列(GenBank登录号为AB182492)同源性为99%。结论巢式PCR检测与吉氏染色镜检结果一致,CareStartTM疟疾快速诊断试剂盒检测阴性则不能排除卵形疟原虫感染。

提取陈旧阳性血膜疟原虫DNA方法的研究

目的建立一种能够提取陈旧阳性血膜疟原虫DNA的方法,为疟原虫基因溯源研究奠定基础。方法应用DNA抽提试剂盒(QIAampDNA Mini Kit)改良后提取41份吉氏染色镜检阳性血膜的疟原虫DNA,并与Chelex-100和Na2HPO4法进行比较。巢式PCR扩增疟原虫SSU r RNA基因片段,鉴定疟原虫虫种。PCR结果进行测序和序列比对,统计分析20世纪80年代与近10年血膜、不同血膜处理方法以及不同质量血膜的PCR阳性检出率差异。结果改良试剂盒法PCR结果总阳性检出率为70.7%(29/41)。80年代和近10年血膜PCR阳性检出率分别为78.6%(11/14)和66.7%(18/27),两组间差异无统计学意义(χ2=0.63,P>0.05)。经去油、脱色处理和未经处理组血膜的PCR阳性检出率分别为62.5%(15/24)和82.4%(14/17),两组间差异无统计学意义(χ2=1.89,P>0.05)。质量较好和较差血膜的PCR阳性检出率分别为93.3%(28/30)和9.1%(1/11),两组间差异有统计学意义(χ2=27.59,P<0.01)。测序结果表明扩增目的片段与预期结果一致。Chelex-100和Na2HPO4法PCR未能扩增出特异性目的条带。结论试剂盒(QIAampDNA Mini Kit)改良法提取80年代血膜疟原虫DNA可获得较高PCR阳性检出率,且染色剂和镜检油渍对血膜疟原虫DNA提取效果无明显影响。

伯氏疟原虫血放置不同时间对小鼠感染的影响

在我们以往的实验中发现以伯氏疟原虫感染小鼠的阳性率、原虫率和病死率除与接种剂量有关外,似与从种鼠采血后放置时间长短有关。为此,做了以下实验。

艾滋病合并耶氏肺孢子虫(菌)肺炎的实验室诊断

采用吉氏染色法检查艾滋病患者有耶氏肺孢子虫(菌)肺炎临床表现者痰液和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的耶氏肺孢子虫(菌)。抽取部分留痰患者(500例)血液,检测CD4+淋巴细胞。结果显示,痰液标本耶氏肺孢子虫(菌)的阳性率(46.8%,845/1 806)显著低于BALF标本(55.8%,106/190)(P<0.05)。耶氏肺孢子虫(菌)阳性患者有临床症状的比例(96.6%,816/845)显著高于阴性者(64.0%,615/961)(P<0.05)。患者血液中CD4+淋巴细胞数量越少,耶氏肺孢子虫(菌)阳性率越高,CD4+细胞数量>200×106/L组、200×106/L～100×106/L组和<100×106/L组的耶氏肺孢子虫(菌)阳性率分别为12.0%(6/50)、39.0%(39/100)和54.6%(191/350)(P<0.05)。吉氏染色法是较好的检查耶氏肺孢子虫(菌)的方法,简单易行,容易推广,但需积累经验。

RH株弓形虫速殖子体外入侵大鼠肠上皮细胞与增殖的动态观察

目的动态观察弓形虫RH株速殖子(简称速殖子)体外入侵大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)及其增殖过程。方法取24孔培养板,设实验组及对照组各3孔,每孔放置经预处理的盖玻片。将常规传代培养的IEC-6细胞接种于各培养孔,于37℃5%CO2培养箱培养24h,吸弃培养液,实验组每孔加入1ml速殖子悬液(含1×106个速殖子),对照组每孔加入1ml无抗生素培养液,共培养。用倒置显微镜连续观察速殖子粘附、入侵IEC-6细胞及其增殖过程,并分别于共培养5～30min、1～48h后取出盖玻片,经吉氏-瑞氏染色后光镜观察其入侵和增殖情况,计算入侵率。结果共培养5min,速殖子即可入侵IEC-6细胞,随着共培养时间的延长入侵的速殖子逐渐增多,1h为1～5个,入侵率为(55.0±6.6)%。2h入侵率高达(81.8±10.2)%,有假包囊形成,速殖子可入侵细胞核并在核内增殖。4h入侵率降为(80.8±9.2)%,假包囊破裂释出成簇排列的速殖子。6h入侵率为(75.1±8.2)%,成簇排列的速殖子显著增多。12h成簇排列的速殖子减少,多数速殖子游离细胞外,完整的IEC-6细胞明显减少。24h只见部分IEC-6细胞和假包囊存在,有大量游离的速殖子。48h见大量游离速殖子,未见贴壁细胞。结论体外培养的弓形虫速殖子可迅速入侵IEC-6细胞,并可在细胞质及细胞核内增殖。增殖周期为6～12h。

深圳市供血员疟疾感染情况调查

我们于1988年6～10月在深圳市中心血站及部分医疗单位进行供血员的疟疾感染情况调查。一、调查方法:每一供血员供血前采集耳垂血或外地血样取袋装冷藏静脉血,推制厚、薄血片各一个,滤纸干血滴二个,血片经吉氏染色后进行原虫镜检,滤纸干血滴进行IFA检测,1:20为最低阳性滴度。二、结果:共检测了580人次,其中河南驻马店地区血样224份,广东省紫金、罗定、佛冈、东莞等地供血员359份。疟原虫检查均阴性。IFA测定河南血样阴性。

20,614例发热病人疟原虫血检结果分析

在疟防工作中,建立疟原虫镜检站血检各类发热病人,对及时发现传染源,监察疫情动态有着重要意义。1982年我们重点观察了20个镜检站的血检情况,结果如下:方法镜检站血检人口为5000～7000人,从4月到10月,凡是体温在37.5℃以上的发热病人,均采厚、薄血膜各一份,吉氏染色油镜查厚血膜,发现原虫后,再检薄血膜,判定虫种及形态。镜检员由地县培训,血片由乡村医生按要求采送。

XT1800i血液分析仪单核细胞增高的原因分析

目的:评估XT-1800i血液分析仪对单核细胞分类的可信度。方法:对XT-1800i血液分析仪提示有单核细胞增高(>10%)的标本进行手工涂片、瑞氏染色、显微镜油镜复检。结果:以手工涂片、染色显微镜油镜复检为金标准,XT-1800i血液分析仪对单核细胞分类的灵敏度为83.33%,特异性为77.65%。阳性预测值为30.97%,阴性预测值为97.48%。结论:对XT-1800i血液分析仪显示单核细胞增高的标本都应结合手工白细胞分类计数法进行复检。