吉祥草多糖的单糖组成及抗氧化活性分析

优化吉祥草多糖(RCP)提取工艺,探讨RCP的单糖组成和体外抗氧化活性。以吉祥草全草为原料,经烘干、粉碎、脱脂、脱色等前处理,在单因素基础上,利用正交试验优化RCP的提取工艺,采用高效液相色谱仪(HPLC)测定单糖组成,并探讨RCP体外抗氧化活性。RCP提取最佳工艺为料液比1∶40(g∶mL),提取温度100℃,提取时间60 min,提取次数3次,此条件下RCP提取率为17.23%±0.78%。经HPLC分析表明,RCP主要由8种单糖组成,分别是半乳糖醛酸41.90%±0.01%、半乳糖9.14%±0.01%、阿拉伯糖4.20%±0.03%、鼠李糖1.99%±0.02%、葡萄糖1.98%±0.01%、甘露糖1.06%±0.01%、葡萄糖醛酸0.49%±0.01%。体外抗氧化活性分析表明,RCP具有较强的体外抗氧化能力,在1.0 mg/mL质量浓度时,DPPH自由基、羟自由基、O_(2)^(-)·自由基、模拟胃液NO_(2)^(-)自由基的清除率各为91.49%±2.76%,29.33%±2.09%,42.37%±2.65%,25.17%±1.06%,IC_(50)值分别为0.08,1.67,1.11,2.42 mg/mL。吉祥草有一定的抗氧化能力,本研究有利于吉祥草多糖在功能性食品、保健品和药物等领域的开发利用,为吉祥草的开发利用提供理论依据。

苗药吉祥草配伍余甘子抗Lewis肺癌细胞增殖组分的筛选

目的:探索吉祥草和余甘子配伍后治疗非小细胞肺癌的药效物质,为吉祥草配伍余甘子在抗肿瘤制剂开发方面的研究提供实验依据。方法:采用鲜药榨汁、传统水煎、渗漉为提取方法制得吉祥草配伍余甘子的不同提取物,以Lewis肺癌细胞体外实验模型作为评价手段,优选药材的最佳提取方法;通过膜分离技术,将最佳提取方法的提取物分段截留得到不同分子量区间段组分,以Lewis肺癌细胞体外实验模型作为评价手段优选最佳的分子量区间段。结果:吉祥草配伍余甘子对Lewis肺癌细胞增殖抑制作用的最佳提取方法为95%乙醇渗漉法。95%乙醇渗漉提取物对Lewis肺癌细胞增殖抑制作用的最佳分子量区间段组分为分子量10~30 KD与分子量≤1 KD组分。结论:苗药吉祥草配伍余甘子对Lewis肺癌细胞具有增殖抑制作用,抑制作用最佳组分为95%乙醇渗漉的分子量10~30 KD与分子量≤1 KD组分。

吉祥草生态环境适应性研究

通过采用不同生态环境类型对产量的影响,从而获得行之有效的种植模式,为吉祥草规范化种植示范推广提供科学依据。方法:选定5个不同的生态环境试验区,每种生态环境(处理)设3个重复,在同等管理水平条件下,对比产量。结果:遮阳网试验区产量最高,其次是粮药套种区;再次是林药套种和果药套种,良田裸露地试验区的产量最低。结论:实际生产中应当充分考虑成本和可操作性,视推广地情况选择林下或与高杆作物套种为吉祥草遮荫。

吉祥草配伍余甘子抗非小细胞肺癌的最佳提取物系统试验研究

研究苗药吉祥草配伍余甘子抗非小细胞肺癌最佳提取物中所含有的化学成分种类。采用化学成分系统试验研究方法,最佳提取物中有挥发油、油脂类、蒽醌类、黄酮类、多糖类、氨基酸、多肽、蛋白质类、有机酸类、皂苷类、鞣质及酚类的系统试验结果为阳性,因此,苗药吉祥草配伍余甘子抗非小细胞肺癌最佳提取物中所含有的化学成分主要为挥发油、油脂类、蒽醌类、黄酮类、多糖类、氨基酸、多肽、蛋白质类、有机酸类、皂苷类、鞣质以及酚类成分。

猕猴桃园套种吉祥草对土壤酶活性及果实产量、品质的影响

【目的】研究套种吉祥草和清耕对猕猴桃根际土壤微生物数量、酶活性和果实产量品质的影响及其相关性,为丰富猕猴桃生态学理论,猕猴桃优质生产及猕猴桃园套种吉祥草栽培模式的应用提供科学依据。【方法】在猕猴桃行间套种吉祥草,以清耕为对照,测定不同生长期猕猴桃根际土壤细菌、放线菌、真菌数量,脲酶、蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性和含水量及果实的产量品质,并分析其相互关系。【结果】套种吉祥草可显著提高不同时期猕猴桃根际土壤微生物量和土壤脲酶、蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性,促进猕猴桃产量的增加和品质的改善,并随套种年限的延长趋于增加。连续4年套种吉祥草猕猴桃根际土壤细菌、放线菌和真菌数量比对照分别提高27.85%—54.34%、28.57%—96.05%和16.39%—148.38%,土壤脲酶、蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性和含水量分别为对照的0.20—0.61倍、0.30—0.87倍、0.41—0.65倍、0.23—0.32倍和0.05—0.16倍;果实单果体积和亩产量分别提高3.26%和4.88%;果实达食用时,维生素C、可溶性固形物、可溶性总糖、干物质和可滴定酸分别提高15.24%、5.46%、12.11%、5.63%和4.12%。相关性分析表明,套种吉祥草的猕猴桃树根际土壤微生物数量与脲酶和磷酸酶活性达极显著或显著正相关,与过氧化氢酶活性呈负相关;根际土壤微生物数量和土壤酶活性与猕猴桃果实单果重和品质间具有明显的相关性。【结论】套种吉祥草对提高猕猴桃根际土壤微生物数量和酶活性,增加果实产量和改善品质具有明显作用。

吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的观察吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用传统方法分离鉴定RCE-4。将0.3 m L Caski(4×107/m L)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,建立宫颈癌移植瘤模型,然后按瘤体积大小随机分为模型组、紫杉醇(10 mg/kg)和RCE-4(25、50、100 mg/kg)组,1次/d给药,连续4周,末次给药的次日处死裸鼠,称量裸鼠体质量、瘤质量,测量肿瘤体积,计算抑瘤率。光镜下观察移植瘤组织形态学变化,TUNEL染色测定细胞凋亡率,免疫组化检测肿瘤组织中COX-2表达,荧光定量PCR测定移植瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达,计算Bcl-2/Bax值,Western blot检测移植瘤组织中Survivin蛋白表达。结果 RCE-4(25、50、100 mg/kg)可明显降低宫颈癌裸鼠移植瘤的体积和瘤质量(P<0.05,P<0.01),上调Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和COX-2、Survivin蛋白表达及Bcl-2/Bax值(P<0.05,P<0.01)。结论RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用,其机制可能与其上调Bax、Caspase-9、Caspase-3的表达和下调Survivin、Bcl-2、COX-2的表达有关。

吉祥草化学成分研究

目的:研究吉祥草的化学成分。方法:利用溶剂提取,硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和MCI树脂等手段进行分离、纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:从吉祥草中共分离鉴定了10个化合物,分别为β-胡萝卜苷(1),β-豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),肌-肌醇(3),潘托洛皂苷元(4),凯提皂苷元(5),凯提5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),新蜘蛛抱蛋苷(7),(1β,3β,16β,22S)-cholest-5-ene-1,3,16,22-tetrol 1,16-di-(β-D-glucopyrano-side)(8),万年青1-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1-2)-β-D-木吡喃糖苷(9),槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)。结论:化合物2,3,7,9,10为首次从该植物中分离得到。

吉祥草总皂苷溶血、止咳、化痰、抗炎作用的研究

目的观察吉祥草提取物总皂苷抗溶血及止咳、化痰、抗炎的作用。方法采用兔血红细胞溶血实验法;采用小鼠氨水引咳法及气管酚红排泌法观察吉祥草总皂苷(TSRC)的镇咳及祛痰作用;采用小鼠耳壳二甲苯致肿法、小鼠腹腔毛细血管通透法观察TSRC的抗炎作用。结果采用兔血红细胞溶血实验法证明TSRC不溶血。给小鼠(灌胃给药)TSRC100,200mg/kg小鼠咳嗽潜伏期明显延长,咳嗽次数减少(P<0.01);气管酚红排泌量明显增多(P<0.01);但对小鼠耳壳二甲苯致肿的抑制率及小鼠腹腔毛细血管通透性无明显效果(P>0.05)。给小鼠(皮下注射给药)TSRC100,200 mg/kg,对小鼠耳壳二苯致肿的抑制率及小鼠腹腔毛细血管通透性与生理盐水比有明显效果(P<0.05,P<0.01)。结论吉祥草总皂苷(TSRC)不溶血。吉祥草总皂苷(TSRC)灌胃给药能抑制氨水引起的小鼠咳嗽;能促进小鼠气管酚红排泌;灌胃给药抗炎作用不明显。吉祥草总皂苷(TSRC)皮下注射给药抗炎作用明显。

吉祥草药材抗炎、止咳作用及谱效关系

研究了吉祥草药材不同提取部位抗炎、止咳活性。分别采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、小鼠氨水引咳法,观察吉祥草药材不同提取部位抗炎、止咳作用。结果表明,吉祥草药材食用酒精提取物3个剂量给药组都有非常显著的抗炎作用(P<0.05),高、低剂量组明显延长咳嗽时间(P<0.05),高剂量组明显减少咳嗽次数(P<0.05);水提物3个剂量组同样具有明显抗炎作用(P<0.05),水提高剂量组能明显增多咳嗽次数(P<0.05),减少咳嗽时间(P<0.05);石油醚提取物各剂量组均没有显著抗炎及止咳作用。可见,吉祥草药材食用酒精提取物及水提物具有较好的抗炎、止咳活性。

HPLC法同时测定吉祥草中阿魏酸及芦丁

目的建立吉祥草中阿魏酸和芦丁的测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,Wondasil C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.4%磷酸水（38∶62）,体积流量为1 m L/min,检测波长270nm;柱温30℃。结果阿魏酸在0.40-2.40μg范围内呈良好线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为100.1%,RSD为2.8%;芦丁在0.625-5.625μg范围内呈良好线性关系（r=0.999 95）,平均回收率为100.7%,RSD为1.3%。结论该方法分离效果好,操作简单,稳定性好,重复性好,可用于吉祥草中阿魏酸和芦丁的测定。

吉祥草中杀灭钉螺化合物的提取分离

目的从吉祥草中提取分离杀灭钉螺活性高和对鱼毒性低的化合物。方法使用吉祥草200孔/25.4mm原粉,经甲醇浸提,正丁醇萃取,再经硅胶柱层析和HPLC纯化,分离得到目标化合物。结果吉祥草原粉浸杀钉螺:浓度在17.5mg/L,经72h和120h其死亡率分别达到86.0%和100.0%;浓度在130mg/L,经168h鱼死亡率为0。原粉经提取分离得到A组分浓度在10mg/L浸杀钉螺,经144h其死亡率为84.4%,显示A组分对钉螺有较强的毒杀效应。A组分经HPLC分离纯化得到99.98%纯度的RC-I,API2000质谱仪LC/MS联机测定其分子量,结合其他光谱分析推定RC-属甾体化合物。结论吉祥草中有杀螺作用较强的化合物。

吉祥草挥发油化学成分的研究

对贵州产吉祥草的挥发性化学成分进行分析。采取同时蒸馏萃取法提取吉祥草挥发油,用GC-MS分析吉祥草挥发油的化学成分。通过计算机检索,共鉴定出58个化合物,其峰面积相对含量占挥发油总量的81.75%,其主要化合物为反式-石竹烯(7.01%)、芳樟醇L(6.97%)、松油酮(5.45%)等。

吉祥草叶斑病菌的生物学特性及室内防治药剂筛选

为吉祥草叶斑病的综合防治提供科学依据,测定了吉祥草叶斑病菌细极链格孢（Alternaria tenuissima）的生物学特性及筛选适合的防治药剂。结果表明,PDA为最适培养基,病原菌生长适温为28℃,致死温度为45℃;在p H值为4~10的范围内均能生长,最适p H值为5;碳源和氮源以葡萄糖和硝酸铵较适宜;光照条件以12/12 h（光/暗）为佳。在供试的5种药剂中,10%苯醚甲环唑对病原菌抑菌效果最好,在推荐使用浓度1.00 mg/L下,相对抑菌率达到100%,而45%的石硫合剂抑菌效果最差,在推荐使用浓度6.67 mg/L下,其抑菌率仅为49.7%。

吉祥草化学成分和药理活性研究

吉祥草为百合科植物,其全草主要含甾体、黄酮、木脂素、萜类、有机酸等多种化学成分。研究表明吉祥草具有抗溶血、止咳、化痰、抗炎、镇痛、降血糖以及杀灭钉螺作用等药理活性。现对国内外有关吉祥草的化学成分、药理作用等方面进行系统的综述,为开发利用有药用价值的天然产物提供科学依据。

吉祥草中杀灭钉螺有效成分的分离及结构解析

吉祥草为新发现的灭螺化合物,从水相提取物中分离出了杀螺有效成分晶体,进行了熔点、晶体衍射、元素分析、核磁共振C谱(13CNMR)、气-质谱等测定晶体性质的测试,证明为环己六醇。环己六醇的质量浓度为2.50mg/L,72h浸杀钉螺死亡率达93.3%;当杀螺成分质量浓度为5.00mg/L时,72h浸杀,其死亡率达100%。

吉祥草化学成分的研究

为研究吉祥草(Reineckia carnea)的化学成分,运用柱色谱的方法从中分离得到7个化合物,经波谱解析和理化性质分别鉴定为假海马齿醇(1),角鲨烯(2),4′,5,7-三羟基-6,8-二甲基黄酮(3),(R-)-8-甲基柚皮素(4),N-香豆酰酪胺(5),N-香豆酰章鱼胺(6)和胡萝卜苷(7)。以上化合物均为首次从该植物中分离得到。

吉祥草化学成分的分离与鉴定

目的对吉祥草的化学成分进行分离与鉴定。方法采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、高效液相制备等方法分离纯化,所得化合物通过理化常数测定及光谱分析等手段鉴定其化学结构。结果分离得到8个化合物,分别为diosphenol(1)、N-benzoyl-L-phenylalaninol(2)、大豆素(daidzein,3)3、'-羟基大豆苷元(3'-hydroxydaidzein,4)、bis(2-ethylhexyl)phthalate(5)、邻苯二酸二正丁基酯(1,2-Benzenedicarboxylic acid,dibuty ester,6)、丁香脂素(syringaresinol,7)、刺五加酮(ci-wujiatong,8)。结论化合物1为新的天然产物2,-8为首次从该属植物中分离得到。

吉祥草乙酸乙酯提取物抗炎作用及机制研究

目的探讨吉祥草乙酸乙酯提取物及该部位分离得到的化合物RCE-4的抗炎活性及机制。方法采用细菌脂多糖(LPS)刺激经佛波酯(PMA)诱导的人单核细胞THP-1体外炎症模型检测其干预前后上清液中促炎细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌量,角叉菜胶致小鼠足趾肿胀模型检测其肿胀抑制率,通过佐剂关节炎模型检测组织内和血清中NO的含量。结果其能显著减少促炎因子的分泌量(P<0.001),抑制角叉菜胶致小鼠足趾肿胀作用(P<0.05),减少佐剂性关节炎模型组织内和血清中NO的含量(P<0.01),并且抑制作用具有时间和剂量依赖性。结论吉祥草乙酸乙酯提取物及RCE-4具有明显的抗炎活性,其作用机制可能与抑制促炎细胞因子和NO的释放有关。

吉祥草提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:以人肾癌786-O细胞作为体外抗肿瘤实验模型,筛选吉祥草的抗肿瘤活性部位。方法:采用MTT法筛选乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对786-O细胞体外抗肿瘤作用的活性部位;通过Hoechst 33258染色于荧光显微镜下观察细胞凋亡形态;应用流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率。结果:吉祥草正丁醇萃取物对786-O细胞的抑制作用较强且呈量效和时效关系,作用48 h时IC50值为69.33 mg/L;凋亡染色显示有典型的凋亡形态出现;流式细胞仪检测吉祥草正丁醇萃取物能诱导786-O细胞凋亡并呈剂量依赖关系。结论:正丁醇部位是吉祥草抗肿瘤作用的主要活性部位,吉祥草正丁醇萃取物能抑制人肾癌786-O细胞增殖并诱导细胞凋亡。

吉祥草甾体类化学成分研究

目的研究吉祥草甾体类化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱技术进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据进行分析和结构鉴定。结果从吉祥草中分离鉴定了9个甾体类化合物,分别为薯蓣皂苷元(1)、奇梯皂苷元(2)、潘托落皂苷元(3)、β-豆甾醇(4)、β-豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、kitigenin 5-O-β-D-glucopyrannoside(6)、pentologenin 5-O-β-D-glucopyrannoside(7)、薯蓣皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、25(S)-5β-1β-3β-diol(9)。结论化合物8和9为首次从该属植物中分离得到。