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禽流感病毒同义NP蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立 被引量:3
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作者 田石 邓国华 +7 位作者 单继艳 施建忠 张国权 陈普成 柳金雄 文雪霞 姜永萍 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期464-467,共4页
为建立通用型禽流感病毒(AIV)快速检测方法,本研究将合成的同义NP(ConsNP)基因克隆于pET30a中,利用大肠杆菌系统进行原核表达,以纯化重组ConsN P蛋白作为包被抗原,建立了检测AIVNP抗体的间接ConsNP-ELISA方法,并优化了反应条件。结果表... 为建立通用型禽流感病毒(AIV)快速检测方法,本研究将合成的同义NP(ConsNP)基因克隆于pET30a中,利用大肠杆菌系统进行原核表达,以纯化重组ConsN P蛋白作为包被抗原,建立了检测AIVNP抗体的间接ConsNP-ELISA方法,并优化了反应条件。结果表明:抗原包被量为1μg/孔;封闭剂为5%脱脂乳;一抗血清稀释度为1∶200;H RP标记的兔抗鸡IgG(酶标二抗)稀释度为1∶20 000;阴阳性临界值为:O D490nm值>0.239。该间接ELISA方法与其他亚型A IV阳性血清均呈阳性反应,与新城疫病毒,马力克病病毒,禽传染性囊病病毒阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性和敏感性。本研究为进一步研制通用型的禽流感ConsN P-ELISA检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 同义np蛋白 ELISA 检测
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