川芎嗪对同基因骨髓移植小鼠骨髓细胞PECAM-1/CD31分子表达与造血重建的作用

本研究通过观察骨髓移植后小鼠骨髓中血小板内皮细胞间黏附分子 (PECAM 1/CD31)的表达水平变化及川芎嗪对其表达的调节作用 ,进一步探讨川芎嗪促进骨髓造血微环境修复、改善造血重建的作用机制。将BALB/c小鼠随机分为正常对照组 ,单纯BMT对照组和川芎嗪治疗组 (骨髓移植 +川芎嗪 ) ,接受 7.5Gy60 Coγ射线一次性全身均匀照射 ,照射后进行同基因小鼠骨髓移植 ,并分别胃饲等量生理盐水与川芎嗪注射液 ,2次 /天。骨髓移植后第 7,14 ,2 1天 ,采用流式细胞术检测小鼠骨髓有核细胞表面CD31分子表达水平 ,计数外周血白细胞、血小板及骨髓有核细胞数 ,并做骨髓组织学检查。结果表明 :骨髓移植后第 7,14 ,2 1天川芎嗪治疗组的CD31表达水平 ,外周血白细胞、血小板和骨髓有核细胞计数以及骨髓细胞增生程度均高于骨髓移植对照组 (P <0 .0 1或P<0 .0 5 )。结论 :川芎嗪可以明显促进骨髓移植后骨髓有核细胞表面黏附分子CD31的表达水平 ,这可能是其促进造血重建的作用机制之一。

川芎嗪促进同基因骨髓移植小鼠骨髓造血重建机制的探讨

本研究探讨川芎嗪对骨髓移植(BMT)后小鼠骨髓中干细胞因子(stem cell factor,SCF)mRNA表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。BMT后统计小鼠存活率和计数脾集落形成单位(CFU-S),并采用RT-PCR方法从mRNA水平动态检测骨髓基质细胞中SCF的表达。结果表明:川芎嗪组小鼠在BMT后第10天CFU-S计数、第7、14、21天存活率及川芎嗪组干细胞因子的表达水平均显著高于对照组(p<0.01或p<0.05)。结论:川芎嗪能够促进骨髓造血细胞的恢复,改善骨髓微环境,促进骨髓造血重建。

培养的同基因兔角膜缘干细胞移植治疗兔眼表烧伤

目的:探讨培养的同基因兔角膜缘细胞移植治疗眼表疾病的方法和疗效。方法:采用消化培养法,兔角膜缘组织进行体外培养,载体为冰冻保存人羊膜,培养的细胞形成单层后移植到已去除病变组织的碱烧伤兔眼球表面,6例兔三度碱烧伤眼进行了培养的同基因兔角膜缘干细胞移植,通过HE染色和免疫荧光染色法,观察眼表结构的愈合情况。结果:术后上皮化进程加快(2～3wk,P<0.05),2mo内均形成较稳定的眼表上皮结构,角膜轻度血管化和结膜化。结论:培养的同基因角膜缘干细胞移植术可作为治疗眼表烧伤、重建眼表的有效方法。

同基因异体皮肤移植在危重烧伤病人治疗中的应用

目的 :探讨同基因异体皮临床应用效果。方法 :经术前准备 ,1例严重烧伤病人双手背深度创面切痂后 ,用同卵孪生子异体皮覆盖 ;其余切痂创面植自体微粒皮加大张同种异体皮。结果 :双手背植皮区未观察到排斥现象 ,而其余植皮区异体皮则最终排斥。结论 :同基因异体皮移植后 。

小鼠同基因型移植物抗宿主病发生机制及其意义

目的：初步探讨小鼠同基因型移植物抗宿主病(SGVHD)的发生机制,为研究移植物抗白血病效应奠定基础。方法：用同基因骨髓细胞重建致死剂量X线照射的小鼠,用环孢素A(CsA)腹腔注射诱导治疗21d。停药后每日观察小鼠临床症状,在小鼠出现GYHD样症状时,取肝脏、结肠、耳朵、皮肤和胸腺进行组织学检查,并检测肝脏、结肠组织细胞因子和协同刺激分子的表达。结果：67％(19／28)的模型组小鼠产生GVHD样症状,组织病理检查发现GVHD样小鼠结肠和肝脏有组织坏死和大量炎细胞浸润,而移植对照组均未出现GVHD样症状,组织学未见明显异常。R7-PCR检测发现GVHD样小鼠结肠和肝脏组织中共刺激分子CD137mRNA水平和细胞因子IL-12、IFN-Υ和TNF-α mRNA水平较移植对照组小鼠的水平升高。结论：CsA可诱导同基因型骨髓移植小鼠产生GVHD样症状,Th1类细胞因子参与了SGVHD的发生,为进一步研究$GVHD的抗肿瘤机制建立了技术平台。

同基因造血干细胞移植治疗EAE小鼠脾脏Treg细胞的变化

目的探讨Treg细胞在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)中变化和同基因造血干细胞移植治疗EAE小鼠中的作用。方法以MOG35-55免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,分为病鼠-病鼠移植组、正常鼠-病鼠移植组和病鼠对照组。两移植组由EAE鼠和正常鼠做供体行移植后分3组,分别于移植后40d、80d、120d处死;病鼠对照组分4组,于移植前1d、移植后40d、80d、120d处死。流式细胞仪测定小鼠脾脏Treg细胞比例;实时定量聚合酶链反应测定脾脏Foxp3mRNA水平;western blot法测定Foxp3蛋白水平。结果移植前的病鼠对照组脾脏Treg细胞(3.3%±1.6%)较正常对照组(6.8%±1.7%)降低(P<0.05),移植后80d,两移植组Treg细胞(20.12%±2.67%、16.34%±1.48%)上升至峰值(P<0.05);移植前的病鼠对照组Foxp3mRNA相对表达量为0.48±0.19,移植后40d、80d、120d,两移植组Foxp3mRNA均高于病鼠对照组(P<0.05);Foxp3蛋白水平为:移植前的病鼠对照组<正常对照组<移植后120d的移植组。结论Treg细胞的数量减少和功能缺失可能与EAE发生发展有关;其数量增加和功能恢复可能是同基因造血干细胞移植治疗EAE的机制之一。

小鼠同基因型移植物抗宿主病模型建立及其免疫机制初步探讨

目的：建立小鼠同基因型移植物抗宿主病模型，初步探讨小鼠同基因型移植物抗宿主病的免疫发生机制。方法：小鼠接受致死剂量的X线照射后，通过尾静脉注射同基因骨髓细胞进行骨髓移植和免疫重建，并于当天腹腔注射CsA进行诱导，连续21d。对照组小鼠腹腔注射相同体积和相同时间的橄榄油。停用CsA和橄榄油后观察小鼠是否出现同基因型移植物抗宿主病（SGVHD），若连续3次体重下降即可认为SGVHD阳性。取各组小鼠的肝脏、结肠、耳朵、皮肤和胸腺进行组织学检查；同时取小鼠的肝脏和结肠进行CD137mRNA和细胞因子IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA的检测。结果：CsA可诱导同基因型骨髓移植小鼠产生GVHD样症状，诱导组小鼠有67％出现SGVHD，而移植对照组未出现SGVHD。SGVHD阳性小鼠结肠和肝脏中CD137mRNA水平和IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA水平较移植对照组小鼠和诱导组中未出现SGVHD小鼠的水平升高，组织病理检查发现结肠和肝脏有大量炎细胞浸润。SGVHD阳性小鼠的胸腺大小与SGVHD呈负相关。结论：CsA可诱导X射线照射的同基因型骨髓移植小鼠产生SGVHD症状，CD137、细胞因子IL-12、IFN-7和TNF-α以及胸腺再生状态参与了SGVHD的病理机制。

经动脉途径输注造血细胞提高同基因骨髓移植种植效率的实验研究

为了探讨提高骨髓移植种植效率的新方法 ,借助大鼠同基因骨髓移植模型 ,从动、静脉不同途径输注PKH 2 6荧光染料标记的供鼠骨髓细胞至受鼠体内 ,输注量为有核细胞数 2× 10 7 鼠。于骨髓移植后定时活杀受鼠 ,用流式细胞术检测归巢受鼠骨髓样本中PKH 2 6标记细胞。结果表明 ,于骨髓移植后 30小时动脉输注组和静脉输注组骨髓的造血细胞归巢指数分别为 14.5 2± 1.0 7和 10 .4 9± 0 .72。本研究证明 ,经动脉途径输注供鼠骨髓细胞比静脉途径输注将有更多的造血细胞在受鼠造血器官寄居。

1型糖尿病小鼠同基因骨髓移植治疗后的免疫变化

本研究旨在观察同基因骨髓移植(syn-BMT)治疗1型糖尿病(T1D)小鼠前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞比例的变化,探讨其在小鼠T1D的发生及同基因骨髓移植在诱导T1D小鼠恢复免疫耐受中的作用。选取C57BL/6J小鼠以链脲佐菌素腹腔注射建立T1D模型,并将成模小鼠分为病鼠移植组及病鼠对照组;另取正常C57BL/6J小鼠6只作为正常对照组。病鼠移植组小鼠于成模后第10天行同基因骨髓移植治疗;正常对照组和病鼠对照组不作处理。每10天监测1次正常对照组、病鼠对照组、病鼠移植组空腹血糖;每3天监测1次病鼠移植组小鼠移植后血象。小鼠成模后第10天即移植治疗当天及移植后30天分别取正常对照组、病鼠对照组及病鼠移植组小鼠外周血标本,用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞比例。结果显示,syn-BMT后,小鼠空腹血糖逐渐下降,至移植后25天,与正常对照鼠相比无差异,显著低于对照病鼠;移植后小鼠外周血白细胞和血小板计数分别在接受预处理及骨髓移植后3天和6天达最低值,此后逐渐上升,至移植后27天基本恢复正常。糖尿病小鼠外周血CD4+ T淋巴细胞比例、CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值和NK细胞比例均较正常对照鼠明显升高(p<0.01),CD8+ T淋巴细胞比例较正常对照鼠显著下降(p<0.01)。syn-BMT后CD4+ T淋巴细胞比例、CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值和NK细胞比例较对照病鼠不同程度的降低,CD8+ T淋巴细胞比例较对照病鼠及正常对照鼠明显升高(p<0.01)。结论:同基因骨髓移植可以逆转糖尿病小鼠的高血糖状态。糖尿病小鼠发病初期,外周血CD4+ T淋巴细胞比例、CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值和NK细胞比例增高及CD8+ T淋巴细胞比例降低,这些变化可能与糖尿病的发生有关。同基因骨髓移植可以不同程度的逆转糖尿病小鼠的免疫紊乱。

猴头菌多糖促进同基因骨髓移植小鼠免疫功能重建

同基因骨髓移植55d后,受体小鼠免疫功能严重缺损,脾细胞产生IL—2的能力等细胞免疫功能明显低下。经腹腔连续注射猴头菌多糖15d后,小鼠脾细胞产生IL—2的能力,对ConA刺激的增殖反应和混合淋巴细胞反应均显著增强;抗羊红细胞抗体(IgM)分泌细胞数明显增加。实验结果提示:猴头菌多糖能明显促进同基因骨髓移植小鼠免疫功能的早期恢复。

同基因外周血造血干细胞移植治疗再生障碍性贫血

目的研究同基因外周血造血干细胞移植治疗急性和慢性再生障碍性贫血的疗效及移植后造血功能恢复的情况。方法采集单卵双生兄妹供者外周血造血干细胞,对病人经180 mg/kg环磷酰胺预处理后,回输造血干细胞,观察造血功能恢复情况。结果2例病人造血功能均获得重建。粒细胞>0.5×109/L的时间分别为11和12 d。血小板>20×109/L的时间分别为10和11 d。移植14 d后2例病人的中性粒细胞、血小板计数和血红蛋白分别为1.0×109/L、1.2×109/L、67 g/L和52×109/L、59×109/L、76 g/L。移植后第28天病人的中性粒细胞、血小板计数和血红蛋白分别为2.3×109/L、2.5×109/L1、06 g/L和152×109/L、259×109/L、115 g/L,骨髓增生活跃。例1移植后4个月发生迟发性移植物排斥反应,例2观察16个月,血常规及骨髓检查正常。结论同基因外周血造血干细胞移植是治疗急性和慢性再生障碍性贫血的有效方法,有造血功能恢复快之优点。

Mesh词表主题词扩展:“移植,同基因-Transplantation,lsogeneic”

同基因骨髓移植指供髓者和接受治疗患者（受者）的基因完全相同，在人类只有同卵双生者之间的移植是同基因移植，同基因骨髓移植容易植活，但有同卵双生兄弟或姐妹的机会极少。

异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病一例

骨髓移植（BMT）是将他人或自己的造血干细胞移植到体内,担负造血作用及免疫作用。广义的骨髓移植包括：骨髓、外周血、脐血、胎儿肝脏等造血干细胞的移植。根据干细胞来源不同分为3类：同基因骨髓移植（syn-BMT）、异基因骨髓移植（allo-BMT）及自体骨髓移植（ABMT）。syn-BMT较少见,约占骨髓移植的1%。

异/同基因骨髓移植后存活20～30年的 患者的免疫状况

作者通过问卷调查的方式追踪了解骨髓移植（BMT）后存活20～30年的患者的感染发生率以及抗体水平,并综合评估其免疫状况。 方法 72例BMT后存活20～30年的患者,其中的33例其供髓者中的16例通过抽血测定淋巴细胞分类计数和抗体水平。除1例接受肺移植外,所有患者在BMT15年后没有接受免疫抑制药物、预防性使用抗生素以及静脉注射免疫球蛋白。用流式细胞仪测定单个核细胞分类计数（包括B细胞及其亚型,CD4T细胞及其亚型,NK细胞,单核细胞）,通过实时定量PCR法测定T细胞更新标志即T细胞受体清除周期（T cell receptor excision circle,TREC）水平,ELISA法测定血清总IgC2

骨髓间充质干细胞移植小鼠免疫系统CD4^+T细胞亚群的变化

背景:研究表明,间充质干细胞是重要的免疫调节细胞,在自身免疫病的治疗中有潜在的应用前景。目的:探讨间充质干细胞移植在治疗多发性硬化症等自身免疫性疾病中的机制。方法:用小鼠制备间充质干细胞,并通过静脉将间充质干细胞输入同基因、异基因小鼠体内,观察间充质干细胞对小鼠中枢免疫器官(胸腺)、外周免疫器官(脾脏)中调节T细胞(Treg)的百分比、Foxp3及白细胞介素10和转化生长因子β1的mRNA的表达。结果与结论:同基因及异基因间充质干细胞移植均能促进小鼠脾脏、胸腺及淋巴结中CD4+CD25+Foxp3+T细胞表达水平显著增高,促进小鼠脾脏、胸腺及淋巴结中Foxp3、白细胞介素10和转化生长因子β1的mRNA表达水平显著增高。提示间充质干细胞移植具有治疗自身免疫性疾病的作用,该作用可能是由CD4+CD25+Foxp3+T细胞、白细胞介素10、转化生长因子β1及Foxp3的高表达所介导。

造血干细胞联合AGM基质细胞移植对骨髓移植小鼠造血重建的影响

目的探讨造血干细胞与主动脉-性腺-中肾(Aorta-gonad-mesonephros,AGM)区来源的基质细胞联合移植对同基因骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法建立同基因骨髓移植小鼠模型,随机分成4组:空白对照组、BMT组、BMT联合AGM基质细胞移植组(联合移植组)及川芎嗪组,另设正常组。分别于BMT后第7、14、21、28d检测外周血细胞、骨髓单个核细胞(bone marrow mono-nuclear cells,BMMNC)、第3、7、10、14、 21、28d检测骨髓组织学变化。结果联合移植组骨髓单个核细胞较川芎嗪组恢复快,联合移植组及川芎嗪组外周血血细胞、骨髓单个核细胞、骨髓组织恢复均较单纯BMT组快,有显著性差异。结论 BMT联合AGM基质细胞移植对骨髓移植造血重建具有促进作用。

猴头菌多糖和胸腺素对骨髓移植小鼠免疫功能重建的促进作用

同基因骨髓移植55d后,受体小鼠免疫功能严重缺损,脾细胞产生IL—2的能力等细胞免疫功能明显低下。经连续腹腔注射猴头菌多糖和胸腺肽15d后,小鼠脾细胞产生IL—2的能力,对ConA刺激的增殖反应和混合淋巴细胞培养反应均显著增强:抗羊红细胞抗体(IgM)分泌细胞数明显增加。实验结果提示:猴头菌多糖和胸腺素合并使用能明显促进同基因骨髓移植小鼠免疫功能的早期恢复,且优于单独使用猴头菌多糖或胸腺素。