HOXA10基因表达对子宫内膜异位症患者胚胎着床的作用

同源异型盒(HOX)蛋白质是高度保守的转录因子,决定着包括人类在内的许多物种的部分生物性状的表达。HOXA10基因通过调节下游基因及雌激素、孕激素的表达直接影响子宫的胚胎发育和着床。根据体内激素的调控作用,HOXA10基因在子宫内膜上呈周期性表达,其表达高峰发生在植入窗期。HOXA10基因在子宫内膜异位症(EMs)病变中表达对子宫内膜组织的"从头开始"发育过程是必要的。EMs患者的子宫内膜存在影响胚胎着床的诸多不利因素,提示胚胎着床失败可能是EMs患者不孕的主要因素之一。EMs患者通常不会出现HOXA10表达水平在黄体中期上升的现象,可以解释EMs是造成不孕的原因之一。

HOXA10基因敲低对非小细胞肺癌安罗替尼敏感性的影响

目的 探讨同源异型盒基因A10 (HOXA10)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞安罗替尼敏感性的影响。方法 采用实时定量PCR检测HOXA10在NSCLC细胞中的表达。应用小干扰RNA在A549和PC-9细胞中敲低HOXA10表达,并用不同浓度安罗替尼处理细胞。Western blotting检测HOXA10蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖活性,以明确安罗替尼的细胞毒性,并计算半数抑制浓度(IC_(50));克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 HOXA10在NSCLC细胞中呈高表达;敲低HOXA10能够降低安罗替尼在A549和PC-9细胞中的IC_(50);敲低HOXA10能够增强安罗替尼对肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的抑制能力;敲低HOXA10能够促进安罗替尼诱导的细胞凋亡。结论 敲低HOXA10能够增加NSCLC细胞对安罗替尼的敏感性。

MLL1和ERα结合共同调控HOXA10表达的研究

目的探讨急性髓性白血病(AML)细胞中研究同源异型基因10(HOXA10)表达调控途径以及HOXA10表达作为AML防治新靶点的可能性。方法以免疫共沉淀(Co-IP)和染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测混合系谱白血病蛋白1(MLL1)和ERα的相互作用,以确定MLL1是通过和ERα形成蛋白质复合物结合到HOXA10的启动子上,甲基化特异PCR(MSP)检测HOXA10启动子CPG岛甲基化状态;Western-blot检测雌二醇(E2)刺激前后和MLL1表达沉默前后组蛋白H3K4甲基化状态,以明确MLL1是否通过表观遗传学途径调控HOXA10的表达;流式细胞技术检测组蛋白去甲基化酶(LSD1)处理白血病细胞前后细胞凋亡改变。结果 MLL1和ERα与HOXA10启动子上ERE区域结合在E2刺激后和MLL1表达沉默后明显增强,并且HOXA10表达明显降低,E2刺激后组蛋白H3K4甲基化状态在明显高于刺激前,且LSD1可明显诱导白血病细胞凋亡。结论MLL1通过和ERα形成蛋白复合体和HOXA10启动子序列结合并通过表观遗传学途径调控AML细胞的HOXA10基因表达,MLL1介导的HOXA10表达的改变有可能为AML的治疗提供了一个新的方向。

LncRNA FAM83H-AS1调控miR-136-5p/HOXC10轴对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)序列相似性家族83成员H反义RNA 1(lncRNA FAM83H-AS1)调控微小RNA-136-5p(miR-136-5p)/同源异型盒基因10(HOX10)轴对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞U87,对U87细胞转染质粒,并将细胞分为对照组、si-NC组、si-FAM83H-AS1组、miR-NC组、miR-136-5p mimics组、si-FAM83H-AS+NC inhibitor组、si-FAM83H-AS+miR-136-5p inhibitor组、miR-136-5p mimics+HOXC10 NC组、miR-136-5p mimics+HOXC10组。检测胶质瘤组织与细胞U87中FAM83H-AS1、miR-136-5p、HOXC10的表达。细胞计数盒8(CCK-8)法检测U87细胞增殖;流式细胞仪检测U87细胞凋亡;蛋白免疫印迹(WB)法检测U87细胞中HOXC10、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达;双荧光素酶报告系统分析miR-136-5p与FAM83H-AS1、HOXC10的靶向关系。结果胶质瘤组织中FAM83H-AS1表达水平显著升高,miR-136-5p表达水平降低(P<0.05);沉默FAM83H-AS1表达或过表达miR-136-5p,U87细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,细胞存活率、HOXC10 mRNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因显示,miR-136-5p与FAM83H-AS1、HOXC10均有靶向关系;抑制miR-136-5p表达可逆转沉默FAM83H-AS1表达对U87细胞增殖的抑制作用,HOXC10过表达可逆转过表达miR-136-5p对U87细胞增殖的抑制作用。结论FAM83H-AS1通过调控miR-136-5p/HOXC10轴促进胶质瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。