胰升糖素样肽-1对胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1表达的调节

目的胰升糖素样肽-1(glucagons-1ike peptide l,GLP-1)最重要的生理作用是葡萄糖依赖的胰岛素刺激作用,但其分子基础尚不清楚。文中研究不同浓度GLP-1对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1(pancreatic-duodenal homeobox-1,PDX-1)表达的调节作用,探讨GLP-1对胰岛素基因转录的调节机制和临床意义。方法不同刺激浓度GLP-1(0、1、10、100、1000 nmol/L)与葡萄糖浓度分别为2.2、5.5、11.1 mmol/L的RPMI1640营养液共培养24 h后,提取胰岛细胞总RNA。运用RT-PCR技术检测PDX-1基因表达的变化。结果葡萄糖浓度为2.2和5.5 mmol/L时,随GLP-1浓度升高,PDX-1基因表达量呈钟型方式升高;葡萄糖浓度为11.1 mmol/L时,随GLP-1浓度升高,PDX-1基因表达量呈浓度依赖性升高。结论 GLP-1以葡萄糖依赖和浓度依赖方式促进PDX-1基因的表达。

同源异型盒基因-1与非综合征型多数牙先天性缺失

牙缺失是常见的颌面发育异常之一,在恒牙列中的发病率高达20%,而其表现程度也存在较大差异。在过去的数十年中,遗传连锁和分子生物学研究使得部分综合征和非综合征型牙缺失的基因突变得以定位。尽管作用机制尚未明了,但现已知其中所涉及的重要突变因子包括了编码转录因子的同源异型盒基因(msx)-1、双链复合蛋白基因(pax)-9和轴抑制基因(axin)-2。下面从近年来国内外有关先天性牙缺失的病例报告、致病基因分析以及分子生物学和生物化学等研究方面就msx-1基因与非综合征型牙缺失的关系进行综述。

小鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化过程中调控PDX-1基因表达miRNAs的鉴定

目的实现小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向胰岛素分泌细胞(IPCs)的诱导分化并对分化过程中可能调控胰十二指肠同源异型盒基因-1(PDX-1)基因表达miRNAs进行鉴定。方法首先分离培养BMSCs,应用conophylline和尼克酰胺将其诱导分化为IPCs,采用双硫腙(DTZ)染色和免疫荧光检测胰岛素的表达。然后采用靶基因预测软件miRanda和Target Scan对调控PDX-1基因表达miRNAs进行预测并通过双荧光素酶报告基因系统鉴定。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测诱导分化过程中miRNAs及PDX-1的表达。结果诱导分化后的细胞双硫腙染色呈猩红色,免疫荧光化学显示有胰岛素表达。生物信息学方法预测得到4个可能调控PDX-1表达的miRNAs,通过双荧光素酶报告基因系统检测发现其中的miR-149和miR-346能结合到PDX-1 mRNA的3’UTR并有效抑制其表达。Real-time PCR检测结果表明,miR-149和miR-346的表达水平与PDX-1表达呈负相关。结论 miR-149和miR-346能负性调控IPCs诱导分化过程中PDX-1的表达。

老年胃癌患者血清整合素β6和组织中Prox-1、FAT4表达变化及意义

目的探讨老年胃癌患者血清整合素β6和组织中同源异型盒基因转录因子(Prox)-1、脂肪非典型钙黏蛋白(FAT)4表达变化及对淋巴结转移的预测价值。方法选取老年胃癌患者80例为胃癌组,老年健康志愿者48例为对照组。采集空腹肘静脉血4 ml,双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清整合素β6浓度;术中采集老年胃癌患者的胃癌组织标本和癌旁正常组织标本,免疫组化法检测Prox-1、FAT4表达。结果胃癌组血清整合素β6浓度明显高于对照组(P<0.01)。胃癌组织中Prox-1表达阳性率明显高于癌旁正常组织,FAT4表达阳性率明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。肿瘤淋巴结转移分类(TNM)分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者血清整合素β6浓度明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者Prox-1阳性率明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者,FAT4阳性率明显低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平单独和联合检测对老年胃癌患者淋巴结转移均具有较高的预测价值(P<0.05),其中血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)=0.941],特异度和阳性预测值明显高于各指标单独检测(P<0.05)。结论老年胃癌患者血清整合素β6浓度升高,组织中Prox-1高表达、FAT4低表达,且与病理指标相关,联合检测可用于对患者淋巴结转移的预测。

藿朴夏苓汤对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠的降血糖作用及机制研究

目的研究藿朴夏苓汤(HPXLT)对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠的降血糖作用及机制。方法采用腹腔注射STZ(65 mg·kg^(-1))制备糖尿病大鼠模型。将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、格列本脲组(5 mg·kg-1)及藿朴夏苓汤高、中、低剂量组(2、1、0.5 g·kg^(-1)),每日1次,连续灌胃给药4周。测定各组大鼠体质量、摄食量、饮水量;进行糖耐量测定,计算糖耐量下血糖-时间的曲线下峰面积(AUC);生化指标检测:空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及血清胰岛素水平;采用HE染色观察胰腺组织病理学变化;Western Blot法测定胰腺组织中BCL-2、BAX及胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1(PDX-1)蛋白表达水平;Real-time RT-PCR法测定胰腺BCL-2、BAX及PDX-1 mRNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的体质量明显降低,而摄食量、饮水量明显增加(P<0.01);FBG值、糖耐量实验的血糖-时间曲线下峰面积(AUC)显著升高(P<0.01);血清中的TC、TG、LDL-c及MDA、NO水平显著升高(P<0.01),HDL-c、GSH、SOD及胰岛素水平显著降低(P<0.01);BAX mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01),BCL-2、PDX-1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠的体质量明显增加,摄食量、饮水量明显降低(P<0.01);FBG值、AUC值均明显降低(P<0.05,P<0.01);血清TC、TG、LDL-c及MDA、NO水平明显降低(P<0.05,P<0.01),HDL-c、GSH、SOD及胰岛素水平明显升高(P<0.05,P<0.01);胰腺组织中的BAX mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),而BCL-2、PDX-1 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论藿朴夏苓汤对STZ诱导的糖尿病大鼠具有降血糖作用,可能与其上调PDX-1的表达,提高抗氧化水平,改善胰岛β细胞功能有关。