基于Yes相关蛋白/同源异型盒转录因子通路探讨淋巴管新生在高血压心肌重构中的作用

目的 基于Yes相关蛋白(YAP)/同源异型盒转录因子(PROX1)通路探讨淋巴管新生在高血压心肌重构中的作用。方法 将小鼠分为4组,每组10只:假手术(Sham)+YAP-KO组、TAC+YAP-KO组、Sham+WT组和TAC+WT组。通过超声心动图获得小鼠心动图参数。通过免疫组织化学染色分析小鼠心脏组织中淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(LYVE1)表达。小鼠淋巴管内皮细胞(LECs)分为以下6组进行:对照(Control)组、AngⅡ+NC组、AngⅡ+si-YAP组、AngⅡ+YAP组、AngⅡ+si-YAP+Vector组和AngⅡ+si-YAP+PROX1组。通过伤口愈合试验和EDU染色检测LECs的迁移、增殖。结果 与TAC+WT组相比,TAC+YAP-KO组小鼠心脏质量比、心肌细胞大小和间质纤维化面积均显著增加(P <0.05),和淋巴微血管密度显著降低(P <0.05)。与对照组相比,AngⅡ+NC组愈合面积、细胞增殖、管形成数量显著下降(P <0.05),并且AngⅡ+si-YAP组下降程度较AngⅡ+NC组更大(P <0.05),而AngⅡ+YAP组的愈合面积、细胞增殖、管形成数量较AngⅡ+NC组显著增加(P <0.05)。与AngⅡ+si-YAP+Vector组相比,AngⅡ+si-YAP+PROX1组LECs的愈合面积、增殖细胞和管形成数量显著增加(P <0.05)。结论 YAP/PROX1信号通路介导的淋巴管新生可能是一种治疗压力过载引起的心脏功能障碍的潜在靶点。

暹罗炭疽菌同源异型盒转录因子CsHtf1 的生物学 功能

【背景】暹罗炭疽菌(Colletotrichum siamense)是橡胶炭疽病害的主要致病菌,严重制约着天然橡胶产量。在植物致病真菌中广泛存在同源异型盒转录因子,其参与调控真菌无性生殖、侵染和代谢等诸多方面。【目的】明确在暹罗炭疽菌中鉴定的一个同源异型盒转录因子CsHtf1的生物学功能。【方法】利用同源重组的方法获得Cshtf1基因的敲除突变株,并对其营养生长、孢子产生和致病性等表型进行分析。【结果】Cshtf1基因编码600个氨基酸且含有1个HOX结构域;与野生型相比,Cshtf1敲除突变株营养生长和致病性无显著差异,而突变株分生孢子产量显著降低且黑色素产量增加。【结论】CsHtf1参与调控暹罗炭疽菌的分生孢子及黑色素产生。

针刺损伤后修复中的淋巴样结构

目的观察正常及损伤后小鼠脊髓中淋巴管的分布及特点,探讨脊髓损伤修复过程中有无淋巴管的参与。方法成年雄性KM小鼠39只,小鼠随机分为两组:正常组6只和损伤组33只。将损伤组小鼠随机分为术后1 d组、术后3 d组、术后5 d组、术后7 d组和术后14 d组,每组6只。损伤组部分小鼠针刺损伤后死亡3只,后随机补充样本。正常组不损伤脊髓,损伤组采用针刺法制备脊髓损伤。通过免疫组织化学方法检测脊髓中淋巴管内皮细胞的分布,观察正常及针刺损伤后小鼠脊髓中淋巴管内皮细胞标记物同源异型盒基因转录因子1(prox-1)、淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lyve-1)、平足蛋白(podoplanin)以及血管内皮细胞标记物CD34的表达情况。通过对脊髓样本进行免疫荧光染色,观察lvye-1/prox-1、lyve-1/podoplanin及CD34/prox-1的共表达情况,探讨新生淋巴管内皮细胞的来源。结果正常成年小鼠脊髓中存在淋巴管样结构,并呈节段性分布,横向走行于白质与灰质间;针刺损伤处的脊髓出现新生淋巴管样结构,同时表达prox-1、podoplanin、lyve-1和CD34;脊髓损伤处瘢痕化后,新生的淋巴管样结构消失。结论正常成年小鼠脊髓中存在节段性横向分布的淋巴管样结构;脊髓损伤处重建过程中有新生淋巴管样结构的参与,新生淋巴管内皮细胞可能来源于周围既存的淋巴管或血管内皮细胞。

老年胃癌患者血清整合素β6和组织中Prox-1、FAT4表达变化及意义

目的探讨老年胃癌患者血清整合素β6和组织中同源异型盒基因转录因子(Prox)-1、脂肪非典型钙黏蛋白(FAT)4表达变化及对淋巴结转移的预测价值。方法选取老年胃癌患者80例为胃癌组,老年健康志愿者48例为对照组。采集空腹肘静脉血4 ml,双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清整合素β6浓度;术中采集老年胃癌患者的胃癌组织标本和癌旁正常组织标本,免疫组化法检测Prox-1、FAT4表达。结果胃癌组血清整合素β6浓度明显高于对照组(P<0.01)。胃癌组织中Prox-1表达阳性率明显高于癌旁正常组织,FAT4表达阳性率明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。肿瘤淋巴结转移分类(TNM)分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者血清整合素β6浓度明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者Prox-1阳性率明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者,FAT4阳性率明显低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平单独和联合检测对老年胃癌患者淋巴结转移均具有较高的预测价值(P<0.05),其中血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)=0.941],特异度和阳性预测值明显高于各指标单独检测(P<0.05)。结论老年胃癌患者血清整合素β6浓度升高,组织中Prox-1高表达、FAT4低表达,且与病理指标相关,联合检测可用于对患者淋巴结转移的预测。

非小细胞肺癌VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3表达与淋巴管生成和淋巴转移关系的研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)-C、-D及其受体3(VEGFR-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达规律、与微淋巴管密度(MLVD)、淋巴转移之间的关系及其在NSCLC发生发展、预后中的意义。方法:以40例经病理确诊的NSCLC组织为实验组,以11例肺良性病变组织为对照组,采用免疫组织化学染色法对上述组织中VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3、淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)、同源异型盒转录因子(Prox-1)蛋白的表达进行分析,并计数微淋巴管密度。结果:①NSCLC组织中VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3蛋白的阳性率分别为77.50%(31/40例)、67.50%(27/40例)、62.50%(25/40例),明显高于肿瘤周边组织(距肿瘤边缘100μm区域内)及肺良性病变组织(P<0.01)。②VEGF-C与VEGFR-3(r=0.409,P=0.005)、VEGF-D与VEGFR-3蛋白表达(r=0.492,P=0.000)均存在相关性;而VEGF-C与VEGF-D蛋白表达无相关性(r=0.256,P=0.093)。③VEGF-C、VEGF-D及VEGFR-3蛋白的表达与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤的大小、组织学类型、分化程度无关,但与肿瘤的淋巴结转移(P<0.05)、PTNM分期(P<0.05)显著相关。④NSCLC肿瘤中心组织中LYVE-1及Prox-1标记的MLVD分别为4.22±1.25、1.99±1.49,明显低于肺良性病变组织(P=0.000),而NSCLC肿瘤周边部位的MLVD显著高于肿瘤中心部位及肺良性病变组织(P=0.000)。VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3表达阳性的组织中,MLVD显著高于阴性组织(P<0.05)。MLVD与肿瘤的淋巴结转移(P=0.000)、PTNM分期(P=0.000)显著相关。结论:淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D及其受体VEGFR-3蛋白在NSCLC中表达显著增高,并且通过VEGF-C、VEGF-D/VEGFR-3信号通路诱导淋巴管内皮细胞新生和淋巴管生成,从而促进淋巴结转移和肿瘤生长;VEGF-C、VEGF-D及其受体VEGFR-3可能成为检测NSCLC淋巴转移和评估预后的重要分子指标;淋巴管内皮细胞特异性标志物LYVE-1、Prox-1可以较严格地区分血管和淋巴管内皮,相对精确地评价肿瘤的脉管系统。

植物WUSCHEL-related homeobox (WOX) 家族研究进展

WUSCHEL相关的同源异型盒(WUSCHEL-related homeobox,WOX)转录因子家族,在植物发育的众多阶段(茎和根顶端分生区的建成、侧生器官的发育、花器官的形成和胚的发育),尤其是在细胞增殖和分化较为旺盛的区域发挥重要的调控作用,即促进细胞的增殖或抑制细胞的分化。就WOX同源异型盒转录因子家族的系统进化分析、WOX家族成员的分子特征、WOX基因的生物学功能及其作用机制进行综述,并对本领域未来的发展方向作出展望。

乳腺癌组织中miR-181、Prox1的表达及临床意义

目的:探究乳腺癌组织中微小RNA-181(miR-181)和同源异型盒转录因子(Prox1)的表达水平及临床意义。方法:回顾性分析本院于2016年7月2019年3月收治的80例乳腺癌患者的基本信息及病理资料。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术定量评估乳腺癌组织及其癌旁组织中miR-181和Prox1的表达情况,分析乳腺癌组织中miR-181和Prox1的表达量与临床病理的关系,采用Pearson相关分析乳腺癌组织中miR-181与Prox1表达的相关性。结果:乳腺癌组织中miR-181的表达量较癌旁组织上升,而Prox1的表达量较癌旁组织降低(P均<0.05);miR-181和Prox1的表达与淋巴结转移、TNM分期及肿瘤分化程度有关(P均<0.05);miR-181的表达量与Prox1的表达量呈显著负相关(r=-0.777,P<0.05)。结论:乳腺癌组织中miR-181表达增加,而Prox1表达降低,二者均与淋巴结转移、TNM分期及分化程度有关,对临床评估患者病情具有重要意义,也是靶向药物治疗研发的新方向。

CDX-2在胃癌患者血清及组织中的表达

目的研究胃癌患者血清及组织中尾侧型同源异型盒转录因子2(CDX-2)的表达水平及其临床意义。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定48例胃癌患者血清CDX-2的浓度,并与29例正常对照血清做比较;同时用SP免疫组化技术半定量测定此48例胃癌患者癌灶中CDX-2表达水平,与血清CDX-2含量比较。结果胃癌患者及正常对照血清中均能检测出CDX-2,胃癌组血清CDX-2表达水平高于对照组(P<0.01);CDX-2表达水平与胃癌Laurien分型、淋巴结转移、细胞分化程度有关;并且其血清测定含量与胃癌组织中CDX-2表达水平呈正相关(P<0.05)。结论血清CDX-2表达水平可以反映肿瘤的临床病理进展及转移情况,对诊断和评价胃癌患者病情有一定意义。

子宫内膜癌灶及癌旁组织中LYVE-1、Prox-1表达的临床意义

目的:探讨淋巴管内皮透明质酸受体1(lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor 1,LYVE-1)、同源异型盒基因转录因子1(prospero-related homeobox 1,Prox-1)的表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系。方法:选取子宫内膜癌石蜡切片标本57例,留取新鲜子宫内膜癌组织及癌旁组织标本共38例。采用免疫组织化学、蛋白质印迹(Western blotting)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Realtime RT-PCR)检测LYVE-1、Prox-1在癌组织及癌旁组织中的表达,分析这2种蛋白在癌组织与癌旁组织中的表达差异与临床病理特征的关系。结果:(1)免疫组化显示,组织学分级Ⅰ级患者癌灶内的Prox-1阳性表达率高于Ⅱ级、Ⅲ级患者,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴脉管间隙浸润(lymph vascular space invasion,LVSI)阳性患者癌旁组织的LYVE-1阳性表达率高于LVSI阴性者,差异有统计学意义(P<0.05);LVSI阳性、晚期患者子宫内膜癌旁组织Prox-1表达的阳性率升高,与LVSI阴性及早期患者比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Realtime RT-PCR及Western blotting检测显示,相对于无淋巴结转移组的癌旁组织,淋巴结转移组癌旁Prox-1蛋白表达量为1.250 0±0.008 2(P<0.05),LYVE-1蛋白表达量为1.860 0±0.012 4(P<0.05);相对于癌旁组织,淋巴结转移组癌组织中Prox-1 mRNA表达量为0.693±0.083(P<0.05),LYVE-1 mRNA表达量为0.42±0.16(P<0.05)。结论:LYVE-1、Prox-1可能是子宫内膜癌淋巴转移的潜在标志物,子宫内膜癌癌旁组织中淋巴管生成可能与淋巴转移有关。

LYVE-1、Prox-1在非小细胞肺癌中的表达及其与淋巴转移的关系

目的探讨淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)、同源异型盒转录因子(Prox-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达规律,与微淋巴管密度(MLVD)及淋巴转移之间的关系及其在NSCLC发生发展、预后中的意义。方法以40例经病理确诊的NSCLC组织(分为肿瘤中心组织及肿瘤周边组织)为实验组,以11例肺良性病变组织为对照组,采用免疫组化法检测上述组织中LYVE-1、Prox-1及CD31蛋白的表达,光镜下计数MLVD及微血管密度。结果①NSCLC肿瘤中心组织中LYVE-1及Prox-1标记的MLVD分别为4.22±1.25、1.99±1.49,低于肺良性病变组织(P均为0.000)。②NSCLC肿瘤周边组织中LYVE-1及Prox-1标记的MLVD分别为10.89±2.06、6.63±1.99,高于肿瘤中心部位及肺良性病变组织(P均为0.000)。③肿瘤周边组织中LYVE-1及Prox-1标记的MLVD与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤的大小、组织学类型、分化程度无关,但在有无肿瘤的淋巴结转移(P=0.000)、PTNM分期的高低间(P=0.000)差异有统计学意义,且随着肿瘤的淋巴结转移、PTNM分期的升高,LYVE-1及Prox-1蛋白的表达量及MLVD增加。而CD31与肿瘤的淋巴结转移、PTNM分期无关。④LYVE-1与Prox-1标记的MLVD相关(r=0.529,P=0.000)。LYVE-1、Prox-1标记的MLVD与CD31标记的微血管密度无关。结论与肿瘤淋巴转移相关的有功能的淋巴管主要位于肿瘤周边部位,而非肿瘤中心部位;LYVE-1与Prox-1可能成为检测NSCLC淋巴转移和评估预后的重要分子指标。

CDX-2在胃癌及癌前病变中的表达及其意义

目的研究胃癌、胃肠道间质瘤、慢性胃炎、肠化生组织中CDX-2基因蛋白的表达及其意义,探讨胃黏膜癌前病变及癌变的分子机制。方法应用单克隆抗体SP免疫组化法检测246例不同胃组织(包括正常胃黏膜30例,慢性浅表性胃炎30例,慢性萎缩性胃炎42例,肠化生胃黏膜58例,胃腺癌46例,癌旁组织30例,胃间质瘤10例)CDX-2基因蛋白的表达。结果CDX-2在正常胃黏膜及慢性胃炎中不表达,在癌旁组织仅表达于肠化生胃黏膜,在胃间质瘤中无表达,在肠化生组织中阳性表达率为91.4%(53/58),在胃癌组织中阳性表达率为80.4%(37/46)。按Laurien分型,肠型胃癌中CDX-2蛋白阳性表达率高于弥漫型胃癌,差异有显著性(P<0.050)。CDX-2表达与细胞分化程度呈高度正相关(P<0.005),但与性别、年龄、浸润深度、胃癌分期及淋巴结转移无明显关系。结论CDX-2的异常表达可能与胃癌的早期发生有关,它可能是一种抑癌基因。检测CDX-2的表达强度有助于判断胃癌恶性程度及预后。

CDX-2和LI-cadherin蛋白在胃肿瘤及良性病变中的表达与意义

目的通过研究胃肿瘤及良性病变中尾相关同源异型盒转录因子-2(caudal type homeobox tran-scription factor-2,CDX-2)与肝肠钙黏蛋白(LI-cadherin)的表达,探讨两者在胃癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组织化学方法分别检测28例正常胃黏膜、30例慢性浅表性胃炎、42例慢性萎缩性胃炎、58例肠化生胃黏膜、46例胃腺癌、30例癌旁组织以及10例胃间质瘤组织中CDX-2和LI-cadherin蛋白的表达,并结合临床病理特征进行分析。结果①CDX-2与LI-cadherin蛋白在正常胃黏膜、慢性浅表性胃炎、癌旁组织以及胃间质瘤组织中均不表达;在肠化生组织中表达阳性率分别为91.4%(53/58)和82.8%(48/58);在胃腺癌组织中表达阳性率分别为80.4%(37/46)和65.2%(30/46),其中肠型胃腺癌中CDX-2和LI-cadherin蛋白表达阳性率(90.6%,29/32;78.1%,25/32)明显高于弥漫型胃腺癌(57.1%,8/14;35.7%,5/14),P<0.05。②CDX-2蛋白表达与Lauren分型(P=0.015)和肿瘤分化程度(P=0.007)有关,而LI-cadherin蛋白表达与Lauren分型(P=0.008)、淋巴结转移(P=0.007)及临床分期(P=0.013)有关。③在肠化生胃黏膜中,细胞核中CDX-2蛋白与细胞膜或细胞浆中LI-cadherin蛋白共同表达阳性率为83.0%(44/53),在胃癌组织中CDX-2与LI-cadherin蛋白共同表达阳性率为67.6%(25/37)。尽管两者表现出很强的伴随关系,但相关性分析却表明两者并无相关性(r=238,P=0.115)。结论 CDX-2和LI-cadherin蛋白的异常表达可能分别与肠化生及胃腺癌的发生和发展有关,两者是否具有协同作用还需进一步研究。

Cdx2与食管炎、Barrett’s食管及腺癌的关系

同源异型盒转录因子2是新发现的尾相关同源异型盒转录因子家族中的一个成员，特异地表达于从十二指肠至肛管齿状线的肠道绒毛上皮，在其他空腔脏器黏膜上皮异位表达时可诱导相应部位的肠化生或腺癌发生。在胃十二指肠反流-食管炎一Barrett’s食管一食管腺癌演化过程中，同源异型盒转录因子2起着重要的调控作用，并与p63基因、维甲酸、MUC2、骨形态发生蛋白4等多因素共同作用促进了这一过程的发展。