同源异形盒基因A1在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨同源异形盒基因A1(HOXA1)在结肠癌中的表达及临床意义。方法随机选取2021年3~10月宁夏医科大学总医院结直肠外科收治的结肠癌患者作为研究对象,运用RT-qPCR检测66例冰冻新鲜结肠癌组织及配对正常组织中HOXA1基因mRNA的表达;运用免疫组织化学检测203例结肠癌石蜡组织芯片中HOXA1蛋白的表达水平,并分析其与临床病理参数间的关系。结果RT-qPCR结果显示,结肠癌中HOXA1 mRNA的相对表达量为5.634±0.563,明显高于正常结肠组织的1.893±0.442,差异具有显著统计学意义(P<0.01);免疫组织化学结果显示,HOXA1蛋白主要表达于细胞核中,其在结肠癌中的表达阳性率为62.56%,明显高于正常组织的21.67%,差异具有显著统计学意义(P<0.01);结肠癌中HOXA1表达水平与AJCC分期、T分期、淋巴结转移、远处转移及组织学分型均有关(P<0.05)。结论HOXA1在结肠癌中异常高表达,与肿瘤分期淋巴结转移等高危因素相关,是结肠癌潜在治疗靶点。

微小RNA-433-3p靶向同源异形盒基因A1抑制胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭的研究

目的探讨微小RNA-433-3p(miR-433-3p)靶向同源异形盒基因A1(HOXA1)对胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭的影响。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,分为对照组(正常培养,不进行任何处理)、si-NC组(转染miR-433-3p siRNA阴性对照)、si-miR-433-3p组(转染miR-433-3p siRNA)、mimic-NC组(转染miR-433-3p mimic阴性对照)和miR-433-3p mimic组(转染miR-433-3p mimic)。荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测MGC-803细胞中miR-433-3p及HOXA1 mRNA表达;细胞计数法、Transwell法分别检测MGC-803细胞增殖、侵袭;双荧光素酶报告基因试验检测miR-433-3p与HOXA1的靶向关系。结果与对照组和si-NC组相比,si-miR-433-3p组MGC-803细胞中miR-433-3p表达降低(P<0.05),HOXA1 mRNA表达、细胞增殖率、侵袭细胞数升高(P<0.05)。与对照组和mimic-NC组相比,miR-433-3p mimic组MGC-803细胞中miR-433-3p表达升高(P<0.05),HOXA1 mRNA表达、细胞增殖率、侵袭细胞数降低(P<0.05)。TargetScan网站预测及双荧光素酶报告基因试验结果显示,miR-433-3p与HOXA1在MGC-803细胞中存在靶向关系。结论miR-433-3p能靶向调控HOXA1抑制胃癌MGC-803细胞的增殖、侵袭过程。

同源异形盒基因1在胃癌中的甲基化状态及与临床病理特征和预后的关系

目的检测胃癌患者同源异形盒基因1(Six1)的甲基化状态, 分析其与患者临床病理特征和预后的关系。方法收集2015年9月至2017年12月航天中心医院诊治的148例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织, 甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)法(MSP)检测Six1基因甲基化状态, 并以同期行胃镜活检的100例健康人群为对照组。采用单因素分析和多因素Logistic回归模型分析Six1甲基化状态与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析胃癌患者Six1甲基化状态与预后生存期的关系。结果胃癌肿瘤组织中Six1基因甲基化率低于癌旁组织和对照组[24.32%(36/148)比89.19%(132/148)、96.00%(96/100)], 差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示, 肿瘤直径<5 cm(χ^(2) = 8.79, P = 0.003)、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期(χ^(2) = 4.93, P = 0.026)、肿瘤高分化(χ^(2) = 8.74, P = 0.013)、无淋巴结转移(χ^(2) = 4.64, P = 0.031)、无远处转移(χ^(2) = 4.38, P = 0.036)、未侵及浆膜(χ^(2) = 9.85, P = 0.002)的患者Six1基因甲基化率较高, 差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示, 胃癌患者的TNM分期(OR = 4.397, 95%CI 3.141 ~ 5.157, P = 0.014)、肿瘤分化程度(OR = 4.491, 95%CI 3.527 ~ 6.118, P = 0.007)、淋巴结转移(OR = 4.208, 95%CI 3.823 ~ 5.195, P = 0.031)、远处转移(OR = 4.225, 95%CI 3.956 ~ 5.437, P = 0.026)、浸润深度(OR = 4.509, 95%CI 3.206 ~ 5.275, P = 0.011)是Six1基因甲基化状态的独立危险因素。截止至2020年3月, Six1基因甲基化组病死率低于Six1基因未甲基化组[44.44%(16/36)比71.43%(80/112)], 差异有统计学意义(χ^(2) = 8.70, P<0.05)。Six1基因甲基化的胃癌患者中位生存时间高于Six1基因未甲基化患者(49个月比37个月), 差异有统计学意义(P = 0.019)。结论胃癌患者中存在Six1基因的未甲基化, 可能参与胃癌的发生过程。患者的TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移是胃癌患者Six1基因甲基化状态的独立危险因素。Six1基因甲基化的胃癌患者预后更优。

微小RNA-9调节同源异形盒1基因对胃癌细胞生物学功能的影响

目的探讨微小RNA-9(miR-9)调节同源异形盒1(HMBOX1)基因对胃癌细胞生物学功能影响的作用。方法将对数生长期的胃癌细胞株BGC-823细胞分为空白组、对照组与miR-9组,对照组与miR-9组分别转染50 nmol/L的miR-9 NC、miR-9 mimics,空白组不进行转染(加入等体积的磷酸盐缓冲液)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-9 mRNA的表达,噻唑蓝法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测HMBOX1蛋白表达情况,上述实验均重复3次,计算其平均值。结果细胞转染后24 h与48 h,miR-9组的miR-9 mRNA相对表达量高于空白组和对照组[(46. 45±11. 82)比(1. 00±0. 12)、(1. 03±0. 13),(55. 45±10. 21)比(1. 02±0. 22)、(1. 11±0. 32)],细胞凋亡指数高于空白组和对照组[(42. 6±1. 5)%比(11. 6±2. 1)%、(13. 2±1. 2)%,(48. 3±1. 5)%比(17. 4±2. 4)%、(15. 3±1. 8)%](均P <0. 05)。细胞转染后24 h与48 h,miR-9组的细胞增殖指数低于空白组和对照组[(0. 42±0. 13)比(1. 11±0. 78)、(1. 07±0. 51),(0. 53±0. 13)比(1. 17±0. 22)、(1. 12±0. 12)],HMBOX1蛋白相对表达水平低于空白组和对照组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论过表达miR-9能靶向抑制HMBOX1的表达,从而抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,发挥抑癌作用。

老年COPD急性加重期患者血清miR-448-5p、Six1水平及其临床意义

目的探讨老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血清同源异形盒基因1(Six1)、微小RNA-448-5p(miR-448-5p)表达水平及其临床意义。方法将2021年3月到2022年3月本院住院部收治的老年COPD急性加重期患者110例(COPD急性加重组)、COPD稳定期患者60例(COPD稳定组)纳入研究。另外,选取同期于该院体检的健康者60例作为对照组。收集受试者基本资料。COPD急性加重期患者血清Six1、miR-448-5p水平与临床指标间的相关性采用Pearson法分析;多因素Logistic回归分析影响COPD患者急性加重的可能因素;miR-448-5p、Six1表达与生存资料采用Kaplan-Meier生存曲线进行分析;多因素Cox回归分析影响COPD急性加重患者预后的因素。结果COPD急性加重组、稳定组及对照组Six1水平依次降低(P<0.05),miR-448-5p水平依次显著升高(P<0.05);相关性分析显示,COPD急性加重期患者血清miR-448-5p、Six1水平均与氧分压(PaO_(2))、第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV_(1)/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%pred)、年龄、二氧化碳分压(PaCO_(2))呈显著相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,miR-448-5p、年龄、Six1是COPD发生急性加重的影响因素(P<0.05);死亡组miR-448-5p水平显著低于存活组,Six1水平显著高于存活组(P<0.05);Kaplan-Meier结果显示miR-448-5p高表达患者30 d生存率(80.00%)高于miR-582-5p低表达患者(56.36%),Six1高表达患者30 d生存率(47.27%)低于Six1低表达患者(89.09%);miR-448-5p、Six1是COPD急性加重患者死亡的影响因素(P<0.05)。结论miR-448-5p水平在老年COPD急性加重期患者血清中显著下调、Six1在老年COPD急性加重期患者血清中显著上调,检测血清miR-448-5p、Six1的表达有利于对老年COPD患者病情的评估。

人胶质瘤细胞中微小RNA-3175对同源异形盒基因家族成员B1基因表达的调控作用

目的 观察在人胶质瘤细胞中微小RNA（miRNA,miR）-3175通过3＇端非编码区（3＇-UTR）对同源异形盒基因家族成员B1（HOXB1）表达的调控作用.方法 通过生物信息学可见miR-3175与HOXB1基因3＇-UTR相互配对,构建HOXB1基因3＇-UTR野生型和变异型荧光素酶载体,生物合成miR-3175 mimics、miR-3175 inhibitor和各自阴性对照.采用Lipofectamine 2000转染和双荧光素酶报告基因系统检测人胶质瘤细胞株（A172、U87）中miR-3175对HOXB1基因3＇-UTR的调控作用.寡核苷酸转染24、48、72 h后,通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot分析miR-3175在人胶质瘤细胞株（A172、U251、U87）对HOXB1基因的表达调控.结果 双荧光素酶报告基因系统提示共转染HOXB1基因野生型载体和miR-3175 mimics后荧光素酶活性明显下降（P＜0.05）,A172细胞株荧光素酶活性下降（37.38±10.98）％,U87细胞株荧光索酶活性下降（24.62±3.22）％.与对照组比较miR-3175 mimics可下调HOXB1基因的表达,转染72h后HOXB1 mRNA表达水平在A172细胞株中下降（42.57±5.52）％,U251细胞株中下降（71.06±0.41）％,U87细胞株中下降（55.54±7.57）％;miR-3175 inhibitor可上调HOXB1基因的表达,转染72 h后HOXB1 mRNA表达水平在A172细胞株中升高（92.39±31.88）％,U251细胞株中升高（250.25±60.37）％,U87细胞株中升高（128.44±25.11）％.转染后HOXB1蛋白水平的变化也得出了相类似的结果.结论 HOXB1基因3＇-UTR为miR-3175调控直接靶点,并且miR-3175 mimics为靶向负调控,miR-3175 inhibitor为靶向正调控.

同源异形盒基因A1和母亲抗肢瘫同系物3在乳腺癌组织的表达及其临床意义

目的:检测乳腺癌组织同源异形盒基因A1(HOXA1)和母亲抗肢瘫同系物3(SMAD3)表达并探讨其临床意义。方法:选择2013年1月至2014年12月上饶市人民医院和南昌大学附属第二医院诊治的96例乳腺癌患者为研究对象。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测乳腺癌患者肿瘤组织及癌旁组织HOXA1及SMAD3基因mRNA表达。采用链霉亲合素-生物素复合物法检测蛋白表达。分析HOXA1及SMAD3基因蛋白表达相关性及与临床病理因素、生存期的关系。两组间比较采用t检验,计数资料比较采用χ^(2)检验。HOXA1与SMAD3蛋白表达相关性采用Spearman秩相关分析。采用Kaplan-Meier生存分析,组间生存比较采用Log-rank检验。结果:乳腺癌患者中乳腺肿瘤组织HOXA1、SMAD3基因mRNA表达及蛋白表达阳性率均显著高于癌旁组织(HOXA1基因mRNA为0.71±0.12比0.34±0.09,SMAD3基因mRNA为0.86±0.14比0.42±0.11,HOXA1基因蛋白表达阳性率为55.21%比18.75%,SMAD3基因蛋白表达阳性率为59.37%比22.92%),差异有统计学意义(t=24.168、24.214,χ^(2)=27.377、26.347,P<0.05)。Ⅲ期、Luminal B型、低分化乳腺癌患者HOXA1和SMAD3基因蛋白表达阳性率均显著高于Ⅰ+Ⅱ期、Luminal A型、中+高分化乳腺癌患者(HOXA1分别为78.13%比43.75%、64.71%比33.33%、77.14%比42.62%,SMAD3分别为84.38%比46.87%、67.65%比35.90%、82.86%比45.90%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.194、13.730、10.717、12.437、17.131、12.592,P<0.05)。乳腺癌组织中HOXA1蛋白表达与SMAD3蛋白表达呈正相关(r=0.577,P<0.05)。HOXA1阳性、SMAD3阳性乳腺癌患者中位生存期显著低于HOXA1阴性、SMAD3阴性患者[中位生存期分别(39.12±5.67)个月比(46.65±7.98)个月、(41.32±6.31)个月比(49.16±8.26)个月],差异有统计学意义(χ^(2)=10.629、13.452,P<0.05)。结论:乳腺癌中HOXA1及SMAD3表达显著增加,与肿瘤分期、分子分型、分化程度密切相关,可作为乳腺癌病情及预后评估的标志物。

HOXA1通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路影响口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力

目的:探究同源异形盒基因A1(HOXA1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞株中的表达情况及其对OSCC细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测CAL27、Tca8113和SCC9细胞系中HOXA1的表达情况;将Tca8113细胞随机分为sh-HOXA1组、sh-NC组及Blank组3组,分别转染shRNA-HOXA1沉默载体、shNC-HOXA1空表达载体及空白对照磷酸缓冲液。分别采用细胞增殖毒性(CCK-8)法、流式细胞实验、细胞侵袭实验检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力,采用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的蛋白表达水平。结果:与正常口腔黏膜细胞株HOK相比,CAL27、Tca8113和SCC9细胞中HOXA1的表达水平明显增加(P<0.05);与Blank组及sh-NC组相比,sh-HOXA1组细胞增殖和侵袭能力明显降低、细胞凋亡率明显增加;蛋白质印迹法检测结果显示,sh-HOXA1组PI3K、AKT和mTOR的蛋白表达水平明显低于Blank组和sh-NC组(P<0.05)。结论:HOXA1在OSCC细胞中表达上调;降低HOXA1表达可明显抑制OSCC细胞增殖及侵袭、诱导细胞凋亡,其作用机制可能是通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路实现的。

HOXA1基因在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨同源异形盒基因A1(HOXA1)基因在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者组织中的表达情况与临床特征及预后相关性。方法:从NCBI(美国国立生物技术信息中心)的GEO数据库下载OSCC相关芯片数据(GSE42743),包含74例OSCC样本及29例正常口腔黏膜样本,分析HOXA1基因在二者之间的表达情况;收集73例OSCC组织的基因表达谱及相关临床数据,对样本中的HOXA1基因表达数据及其对应的临床信息进行相关性分析,生存分析HOXA1基因与OSCC总生存期及特异性生存期的相关性;采用基因集富集分析方法探讨HOXA1基因在OSCC中可能的作用机制。结果:OSCC组织中HOXA1基因表达水平明显高于正常黏膜组织(P<0.05);73例OSCC样本中,HOXA1基因表达水平与T分期、CN分期、AJCC分期显著相关(P<0.05);生存分析示HOXA1高表达患者预后明显差于HOXA1低表达组(P<0.05);基因富集分析提示,HOXA1基因高表达样本主要富集了E2F、MYC、m TORC1信号通路及G2M检查点、有丝分裂、蛋白分泌功能基因集,影响OSCC的生物学过程。结论:HOXA1基因高表达与OSCC患者的进展相关,可作为其独立预后危险因素。