环状RNA同源性蛋白激酶3靶向微RNA-338促进胶质瘤细胞侵袭、迁移的实验研究

目的探讨人血清环状RNA同源性蛋白激酶3(CircHIPK3)靶向微RNA-338(miR-338)对胶质瘤细胞U251细胞侵袭、迁移的影响。方法2021年2-12月,在武汉大学人民医院科研中心将U251细胞分为空白(NG)组、CircHIPK3阴性对照(shcontrol)组、HIPK3敲减(sh-CircHIPK3)组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测U251细胞中CircHIPK3、miR-338表达水平;Transwell检测细胞迁移与侵袭;划痕法检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期;通过Circular RNA Interactome、RegRNA2.0、CircBank Database网站预测CircHIPK3(ID:hsa_circ_0000284)的靶向miRNA并用双萤光素酶实验验证,蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果与NG组、sh-control组比较,sh-CircHIPK3组中CircHIPK3(1.00±0.00、1.06±0.26比0.56±0.06)表达水平显著降低(P<0.05),miR-338(1.00±0.00、1.12±0.19比1.89±0.28)表达、G1期细胞比例[(58.72±0.36)%、(58.45±0.27)%比(64.72±0.47)%]升高(P<0.05),U251细胞侵袭数目[(164.89±12.55)个、(165.77±12.16)个比(80.13±11.37)个]、划痕愈合率[(25.66±2.37)%、(26.38±2.53)%比(10.36±1.53)%]、迁移细胞数目[(196.72±18.75)个、(194.65±17.86)个比(95.58±8.66)个]、S期细胞比例[(26.45±0.39)%、(26.57±0.41)%比(20.72±0.18)%]明显降低(P<0.05);miR-338是CircHIPK3的靶基因。与NG组、sh-control组比较,sh-CircHIPK3组MMP-2(1.31±0.23、1.33±0.20比0.61±0.05)、MMP-9(1.16±0.22、1.15±0.21比0.85±0.19)蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论沉默CircHIPK3通过靶向上调miR-338表达能抑制胶质瘤细胞U251细胞迁移和侵袭。

新型冠状病毒感染大流行前后ICU环境中鲍曼不动杆菌同源性分析

目的探究新型冠状病毒感染大流行前后上海市部分医疗机构重症监护病房(ICU)环境中病原菌的分布及鲍曼不动杆菌同源性变化情况。方法采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法分离鉴定病原菌,通过Illumina Miseq测序平台对鲍曼不动杆菌进行全基因组测序,基于多位点序列分型(MLST)和核心基因组MLST(cgMLST)探讨其亲缘关系。结果大流行后ICU环境中病原菌总检出率(6.10%,101/1656)低于大流行前(10.77%,181/1680;P<0.05)。大流行前后,ICU环境中检出的鲍曼不动杆菌在被褥表面占比均维持在最高水平,但大流行后ST型呈多样性分布。MLST_Pasteur结果显示,162株鲍曼不动杆菌分为20种ST型,以ST2(80.25%,130株)为主;MLST_Oxford结果显示,162株菌株共有19种ST型,以ST208(37.04%,60株)为主;基于cgMLST的聚类分析结果显示,大流行后ST208_Oxford与ST540_Oxford和ST369_Oxford的亲缘关系更接近,ST164_Pasteur克隆由大流行前的ST234_Oxford转变为大流行后的ST1418_Oxford,新发现2种新型ST_Pasteur和11种新型ST_Oxford。结论大流行后ICU环境中病原菌检出率低于大流行前,大流行前后相同分离位点ST型分布略有不同,大流行前后的流行克隆仍以ST2_Pasteur/ST208_Oxford为主,但部分等位基因发生了改变,cgMLST在同源性分析、进化与传播、暴发分析方面的精确度优于MLST_Oxford和MLST_Pasteur。

广西地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的流行特征、耐消毒剂基因检测及同源性分析

目的了解耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)临床分离菌株的流行特征,检测、分析耐消毒剂基因携带情况及菌株同源性。方法回顾性分析该院2020—2022年临床分离得到的252株CRPA的临床分布特点、耐药趋势。并随机选取其中30株菌株,采用聚合酶链反应检测耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1及aceⅠ的表达情况;采用肠杆菌科基因间重复序列-聚合酶链反应检测菌株同源性。结果CRPA的标本来源主要为痰液(63.49%)、肺泡灌洗液(17.06%);来自综合重症监护病房(ICU)和其他ICU占比为40.87%,来自非ICU的占比为59.13%,非ICU病区主要分布在康复医学科(14.68%)和呼吸科(12.70%)。除头孢吡肟、头孢他啶/阿维巴坦、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、多黏菌素外,CRPA对其他临床常用抗菌药物的耐药率均在30.00%以上。CRPA在ICU及非ICU病区的耐药率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。30株临床分离的CRPA qacEΔ1-sul1和aceⅠ基因检出率分别为16.67%、26.67%。同源性分析结果显示A型和B型为主要流行株。结论CRPA对常用抗菌药物普遍耐药,应加强对CRPA菌株的耐药性监测,根据药敏试验结果合理选择抗菌药物,减少耐药株的产生。CRPA中qacEΔ1-sul1和aceⅠ两种耐消毒剂基因均有检出,但检出率均较低,实际工作中应加强对各病区的消毒效果监测。CRPA中存在A、B两种优势型别的克隆流行,应作为铜绿假单胞菌院内感染防控的重点。

鲍曼不动杆菌抗生素耐药及同源性分析

目的了解我院住院患者及环境中鲍曼不动杆菌临床感染特点、耐药性及同源性,为临床有效治疗及感控预防提供参考。方法收集我院部分科室及环境中2018年11月至2021年6月分离的824株鲍曼不动杆菌中重点科室怀疑存在交叉感染的47株鲍曼不动杆菌,采用Vitek-II compact全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定和药敏试验,采用多位点序列分型和基质辅助激光解析电离时间质谱(MALDI-TOF MS)对菌株进行同源性分析。结果47株鲍曼不动杆菌对粘菌素表现为全部敏感,对替加环素、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦敏感率分别为89.5%、80.0%和56.6%,36株表现为3类以上抗生素耐药,MDRAB检出率为76.6%,多位点序列分型(MLST)得到8种序列型,以ST2型占优势(38株,占80.8%),其次为ST10型(2株,占4.3%)及ST132型(2株,占4.3%)。分布特点以呼吸与危重症医学科、重症监护医学科和神经外科病房为主。结论我院鲍曼不动杆菌耐药率较高,多个克隆株在院内广泛分布,部分科室存在较近的亲缘关系,提示院感防控需进一步加强。

重症医学科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因型和同源性分析

目的:了解贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者金黄色葡萄球菌耐药变迁情况,掌握耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的主要耐药基因和耐消毒剂基因,并对部分菌株作同源性分析。方法:回顾性分析贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者2018~2021年金黄色葡萄球菌耐药情况变迁情况,以相关性分析(pearson)统计学方法探讨细菌耐药性与抗菌药物用药频度(defined daily dose system,DDDs)二者的关系。以四年间重症医学科下呼吸道感染患者送检标本分离获得的40株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为研究对象,采用仪器法对试验菌株作鉴定及药敏,通过PCR技术作耐药基因(mecA、SCCmec、femB)和耐消毒剂基因(qacA/B)检测。应用多位点序列分型(MLST)法分析40株试验菌的同源性。结果:金黄色葡萄球菌每年的平均耐药率显示青霉素耐药率一直高于92%以上。四环素、克林霉素、复方新诺明耐药率在2019年有所下降后却又再次持续升高。红霉素、苯唑西林、左氧氟沙星、奎奴普丁/达福普丁的耐药率呈现逐年增长趋势。未发现对利奈唑胺、万古霉素和替加环素的耐药菌株。相关性分析提示青霉素耐药率与苯唑西林DDDs存在明显正相关(r=0.99,P<0.05),苯唑西林耐药率与红霉素DDDs存在明显负相关等,其他抗菌药物耐药率与各药物DDDs相关性无统计学意义。基因检测发现40株耐MRSA中mecA检出率为97.5%,SCCmec和femB基因未检出,qacA/B基因检出率为15%。MLST分型结果显示共分为7个序列型,其中以ST59型占比最高,为优势型别,占比42.5%,其次为ST45型,占25%,ST239型、ST28型、ST188型、ST1型和ST630型分别占12.5%、7.5%和5%、5%、2.5%。结论:重症医学科下呼吸道感染金黄色葡萄球菌耐药率逐年增加,可选择的抗生素有限。细菌耐药性的产生与药物使用频率有一定关系,携带mecA和qacA/B基因是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产生耐药的主要原因。MLST结果表明ICU病房存在科内克隆菌株。

重症医学科产KPC-2肺炎克雷伯菌的耐药情况分析及同源性研究

目的 探究重症医学科产碳青霉烯酶-2(Klebsiella Pneumoniae Carbapenemase,KPC-2)肺炎克雷伯菌的耐药状况并分析其同源性情况。方法 回顾性选取2020年10月—2022年9月睢宁县人民医院收治的46例重症医学科患者的临床资料,从中提取46株耐青霉烯类肺炎克雷伯菌菌株,进行药敏性试验、mCIM及eCIM联合试验,并采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增法检测待测菌的耐药基因,实施序列检测,使用脉冲场凝胶电泳(Pulsed field Gel Electrophoresis,PFGE)实施同源性分析。结果 待测菌对替加环素、复方新诺明、阿米卡星、妥布霉素及庆大霉素有敏感性;mCIM及eCIM试验结果显示46株耐青霉烯类肺炎克雷伯菌均产丝氨酸碳青霉烯酶;待测菌株携带肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因阳性率达100.00%。结论 产丝氨酸碳青霉烯酶是造成ICU分离耐青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制,酶基因为KPC-2型,且本院重症医学科存在耐青霉烯类肺炎克雷伯的克隆传播。

MALDI-TOF MS在鲍曼不动杆菌同源性分析中的临床应用评估

目的评估基质辅助激光解析电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)分析鲍曼不动杆菌(AB)同源性的临床应用价值。方法剔除同一患者或环境多次送检标本中的重复菌株,收集某三甲综合医院2020年5月—2021年2月神经内科重症监护病房(ICU)住院患者痰标本及环境标本分离的46株AB,使用VITEK-MS质谱仪检测菌株,应用SARAMIS Premium软件进行聚类分析,并采用多位点序列分型(MLST)的方法进行验证。结果通过MALDI-TOF MS和MLST聚类分析和比较,46株AB中,39株为MALDI-TOF MS的MS-a型,其中,22株为MLST的MT-A簇,包括ST208型3株,ST540型3株,ST195型8株,ST369型5株,以及ST136、ST436、ST1893型各1株;16株为MT-B簇,包括ST381型4株、ST469型11株和ST938型1株;1株为MT-C簇(ST1821);MS-b型1株为ST381;MS-c型2株为ST369;MS-d型1株为ST195;MS-e型2株分别为ST540、ST369;MS-f型1株为STN1。结论作为AB同源性分析工具,MALDI-TOF MS具有一定的局限性,其菌株同源性分析结果与MLST结果一致性低,分辨特异性低,不可取代MLST技术。

宁夏桶装水中铜绿假单胞菌的污染情况、耐药性及同源性分析

为综合评价宁夏桶装水生产企业铜绿假单胞菌污染情况、耐药性及系统进化关系,确定污染来源,提升产品质量,该研究对企业各生产环节的水样进行铜绿假单胞菌检测,并采用全自动微生物鉴定系统(VITEK-2)、基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)、16S rRNA测序法对分离菌株进行鉴定。铜绿假单胞菌的耐药性实验应用微生物全自动鉴定及药敏系统检测,采用16S rRNA基因序列测序构建系统发育树,MALDI-TOF MS进行同源性分析。结果表明,VITEK-2、MALDI-TOF MS、16S rRNA鉴定结果与常规方法分离的24株阳性菌株鉴定结果100%相符。耐药性结果表明,24株铜绿假单胞菌中2株为耐药菌株,分别是5-B-1,7-C-5,耐药率为8.3%,说明水源性菌株的耐药水平总体偏低。质谱结果表明来自同一地区的阳性菌株亲缘关系较近;16S rRNA系统发育表明铜绿假单胞菌分离株与地域不存在明显的相关性,但同一来源的铜绿假单胞菌属于同一簇,其来源主要为水源。该研究为桶装水中铜绿假单胞菌的污染溯源积累了数据,为进一步研究菌种污染溯源提供理论依据。

意大利蜜蜂乙醇胺激酶1蛋白的序列特征和同源性分析

运用生物信息学的方法分析意大利蜜蜂ETNK1的序列特征和同源性.理化性质分析显示,意大利蜜蜂ETNK1由348个氨基酸残基构成,相对分子量为41.54 kD,是一个带负电的稳定的亲水性蛋白.根据跨膜结构分析可知,ETNK1没有跨膜螺旋,不是跨膜蛋白.通过核定位信号和亚细胞定位分析可得,ETNK1很可能定位在细胞骨架中.蛋白质修饰位点分析表明,ETNK1有19个磷酸化位点,不含糖基化修饰位点.氨基酸多序列比对的结果显示,不同蜜蜂中的ETNK1的同源关系较高.系统进化树分析发现,意大利蜜蜂的ETNK1与蜜蜂属的大蜜蜂和黑大蜜蜂的进化关系比较相近.该研究有望为进一步研究意大利蜜蜂ETNK1的结构和功能提供支撑.

移动性多黏菌素耐药基因介导的大肠埃希菌药敏特点与同源性分析

目的分析多黏菌素耐药大肠埃希菌的耐药机制、药敏特点及其同源性,为有效预防和控制其暴发及流行提供分子流行病学依据。方法收集2016年5月至2022年6月分离自临床的多黏菌素耐药大肠埃希菌,应用PCR技术筛选移动性多黏菌素耐药基因(mobile colistin resistance,MCR),采用微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度。收集患者的临床资料,利用脉冲场电泳技术(PFGE)对收集到的菌株进行同源性分析并对其中1株进行全基因组测序分析。结果分离并鉴定出4株携带有MCR-1基因的多黏菌素耐药大肠埃希菌,4株菌株除了对替加环素均敏感外,对于临床常见的绝大多数抗生素均表现出不同程度的耐药。临床资料分析均未发现患者有多黏菌素使用史。该4株菌可分为2种类型,其中A型3株,B型1株。对其中1株菌进行全基因组测序分析发现MCR-1基因位于约70 kb的质粒上。结论携带MCR-1基因的多黏菌素耐药大肠埃希菌具有克隆传播的潜在威胁,对临床常见抗生素均表现出较高的耐药性,为临床治疗带来极为严重的挑战,需要加强防护措施,防止其暴发流行。

同源性心室分离伴QRS波群3∶1电交替1例

同源性心室分离是一种特殊的心电学现象,本质上是左右心室除极化不同步而出现的分离现象,心电图上QRS波群呈现出两组波形形态且固定分离。现报告1例男性患者,半年前发生急性前间壁、前壁心肌梗死,现剧烈胸痛发作,心电图表现为同源性心室分离,描述心电图特征并阐述其发生机制。

基于迁移卷积神经网络的夜间低照度图像同源性的鉴定算法

图像的二次编辑和篡改大大降低了图像的可信度,受夜间光线影响,图像分类过程不稳定,图像来源取证准确率较差,为此,研究基于迁移卷积神经网络的夜间低照度图像同源性鉴定算法。基于迁移卷积神经网络,将夜间低照度图像分类,计算不同特征图像之间的相关性;增强与降维处理夜间低照度图像,为图像同源性鉴定提供标识性依据;通过划分图像块,实现夜间低照度图像同源性鉴定。经实验论证分析,应用算法能使夜间低照度图像内容更为完整,细节显示更多,图像同源性鉴定准确率和类别纯度更高,具有有效性与实用性。

基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响

目的:基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响。方法:从36只SD大鼠中随机选取6只作为对照组,其余大鼠给予高脂饲料联合1%链脲佐菌素(30 mg·kg^(-1))建立糖尿病模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、黄连解毒汤高剂量组(6.25 g·kg^(-1))、黄连解毒汤中剂量组(3.13 g·kg^(-1))、黄连解毒汤低剂量组(1.56 g·kg^(-1))及二甲双胍组(100 mg·kg^(-1)),每组各6只。各药物组按照相应剂量灌胃给药,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续21 d。第7天、第14天及第21天灌胃后,收集大鼠粪便,提取肠道菌群DNA。利用ERIC-PCR技术和Sanger测序检测大鼠肠道菌群结构与DNA同源性。结果:灌胃第7天,对照组条带较多集中在100~750 bp;与对照组比较,模型组条带在1 000~2 000 bp的亮度增强,在300~750 bp的亮度减弱;与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在750 bp的亮度增强。灌胃第14天,与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在1 000 bp以上的亮度减弱。灌胃第21天,与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在300~750 bp的亮度增强。DNA测序结果显示,灌胃第21天,对照组500 bp条带的优势菌群为拟杆菌属、杜氏邓氏菌和金黄杆菌属;模型组400 bp和1 000 bp条带的优势菌群为梭菌目细菌、普拉梭菌、铜绿假单胞菌和杆菌属。灌胃第7天,黄连解毒汤高剂量组750 bp条带的优势菌群为布劳特菌和拟杆菌属;黄连解毒汤中剂量组200 bp条带的优势菌群为脆弱拟杆菌和拟杆菌属;黄连解毒汤低剂量组1 200 bp条带的优势菌群为双发酵副梭菌;二甲双胍组1 000 bp条带的优势菌群为大肠埃希杆菌。灌胃第14天,黄连解毒汤高剂量组700 bp条带的优势菌群为拟杆菌目细菌和假单胞菌;黄连解毒汤中剂量组550 bp条带的优势菌群为假锁杆菌属和链霉菌属;黄连解毒汤低剂量组350 bp条带的优势菌群为Muribaculum gordoncarteri、肠杆菌、杜氏邓氏菌和杆菌科细菌;二甲双胍组290 bp条带的优势菌群为弗格森埃希菌和大肠埃希杆菌。灌胃第21天,黄连解毒汤高剂量组1 000 bp条带的优势菌群为普雷沃氏菌属;黄连解毒汤中剂量组600 bp条带的优势菌群为Muribaculum gordoncarteri、杜氏邓氏菌和拟杆菌属;二甲双胍组400 bp条带的优势菌属为Muribaculum gordoncarteri、肠杆菌、普雷沃氏菌属、杆菌科细菌和杆菌属。结论:黄连解毒汤对T2DM大鼠的肠道菌群结构具有调节作用,菌群调节效果受药物剂量和治疗时间的影响。

多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉稀酶耐药基因及共同源性分析

探讨多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因及共同源性分析。方法 选择2022年1月至2023年6月耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌作为研究对象,另选2021年6月至2021年12月期间的耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌作为对照,统一对其进行抗菌药物敏感实验,并分析菌株的同源性。结果 研究结果显示,2022年以后鲍曼不动杆菌耐药性显著高于2021年,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。RAPD分型结果显示,耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌可分为6个基因型,其中A型的占比情况最大。结论 OXA-51基因是本次实验中耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌的主要基因,存在院内交叉感染现象。

综合医院ICU患者及环境分离多重耐药菌耐药率及同源性

目的调查某院重症监护病房(ICU)患者及环境分离多重耐药菌(MDRO)同源性,为临床预防控制MDRO感染提供依据。方法收集2021年11月17日—12月17日某三级甲等综合医院重症监护病房(ICU)患者及环境分离的MDRO,对分离株进行药敏分析以及脉冲场凝胶电泳(PFGE)试验及聚类分析。结果共收集22株MDRO[耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)6株,多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)11株,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)5株],其中临床患者来源菌株11株,环境来源菌株11株,部分环境株与临床株高度同源。ICU环境,包括工作人员生活区域物体表面、微波炉按键和开关等均检出MDRO。患者床旁桌和水池消毒处理后仍被检出CRKP、MDR-AB,护理员洗手后手检出与患者使用的听诊器完全同源的MRSA。CRKP对常用抗菌药物均耐药(头孢他啶/阿维巴坦除外);MDR-AB临床株对米诺环素耐药率为40.0%,对其他抗菌药物耐药率均≥60%,MDR-AB环境株耐药率较临床株低。结论ICU MDRO临床株与环境株高度同源,存在MDRO通过医院环境在医院传播和交叉感染的可能。应加强环境清洁消毒措施的落实,提高手卫生依从性,切断病原菌医院传播途径,减少MDRO医院感染的发生。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐消毒剂基因检测及同源性分析

目的 探讨武汉地区临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)中耐消毒剂基因的携带状况及耐消毒剂基因携带菌株的同源性,为有效预防和控制CRKP传播提供理论依据。方法 收集2018—2019年武汉市3所三级医院临床住院患者分离的非重复性CRKP菌株,采用最低抑菌浓度测定方法对药敏结果进行复核,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测耐消毒剂基因qacEΔ1、cepA,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对同时携带qacEΔ1和cepA基因的CRKP菌株进行同源性分析。结果 共收集62株CRKP,77.42%来源于重症监护病房(ICU),40.32%来自痰标本。所有CRKP均为多重耐药菌,对厄他培南、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑林、头孢他啶、头孢曲松5种抗生素的耐药率均为100%,对临床其他常见抗菌药物也呈现高度耐药。耐消毒剂基因检出率为95.16%(59/62),其中qacEΔ1、cepA基因检出率分别为64.52%(40/62)、91.94%(57/62),38株(61.29%)同时检出qacEΔ1和cepA。PFGE结果显示,38株CRKP可分为A~K共11个型别,以E型为主,占42.11%(16株)。结论 武汉地区CRKP菌株耐药形势严峻,广泛携带耐消毒剂基因,存在不同医院、不同科室间的克隆传播,应加强流行病学监控,合理使用消毒剂。

2021年桂林市食源性沙门菌的同源性及耐药特征分析

目的了解桂林市食源性沙门菌的同源性及耐药特征,为沙门菌食物中毒的防治提供科学依据。方法对2021年桂林市食品沙门菌监测的生猪肉及草鱼等生鲜食品样品、同年食源性腹泻患者的粪便/肛拭子样本进行沙门菌鉴定,并采用微量肉汤稀释法分析其耐药性,脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对其进行分子分型。结果沙门菌的总检出率为17.54%。在市售肉制品中,以生猪肉的沙门菌检出率最高(75.00%);共检出沙门菌116株,分属17个血清型,以里森沙门菌为主(33.62%),其次是鼠伤寒沙门菌(25.86%)和伦敦沙门菌(17.24%);该3种菌株在生猪肉与腹泻患者中均具较近的亲缘关系。116株沙门菌对四环素的耐药率最高(80.17%)。结论桂林市的食源性沙门菌检出率较高,具多重耐药性,且耐药率高;市售肉制品和腹泻患者的沙门菌有交叉感染现象。

高明地区手足口病EV71的分子流行病学情况及核酸序列同源性的进化性分析

目的:探究高明地区手足口病肠道病毒71型(EV71)的分子流行病学,并对其核酸序列同源性进行进化分析。方法:选择2020年1月-2022年12月高明区人民医院及疾控中心提供来源于1547例手足口病患者的标本共1547份,采用荧光定量RT-PCR对标本进行肠道病毒核酸检测,并对其进行EV71、柯萨奇病毒A组16型(CA16)、非EV71/CA16(N)分类,从时间、地区、年龄、性别、疾病类型5个方面对EV71病毒引起手术口病的分子流行病学进行调查,分离部分EV71毒株进行全基因测序分析,另采用生活信息学软件对病毒基因特征进行分析。结果:5-7月为EV71病毒引起手足口病高发时间;高明地区与佛山市其他地区EV71病毒引起手足口病病例占比无显著差异;≤1岁患者为手足口病高发群体,2021年和2022年EV71病例占比分别为36.36%和36.28%;男性为手足口病高发群体,2021年和2022年EV71病例男女比例分别为2.140∶1和2.092∶1。基于全基因序列构建亲缘进化树,分离的6株EV71毒株与C4亚型毒株具有最近的亲缘性和最高的同源性。结论:2021-2022年EV71病毒是高明地区手足口病流行的主要病原,EV71毒株属C4型且遗传性较为稳定。

致犊牛肺炎A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及同源性分析

本研究旨在对江苏某牧场引发犊牛呼吸道综合征的多杀性巴氏杆菌进行分离鉴定,并分析其遗传进化关系及耐药情况。首先对引起犊牛呼吸道症状致犊牛死亡案例进行剖检,发现肺脏肿大,肺门淋巴结肿胀、出血,肺部形成多处结节,然后取肺门淋巴结进行细菌分离培养与鉴定,并进行16S rRNA扩增、测序分析、血清型鉴定和耐药性分析。质谱鉴定和测序分析结果显示,该菌株与A型多杀性巴氏杆菌属于同一亚群,其序列与已经发布的CQ2、CQ7菌株同源性较近。药敏结果显示,该菌株对林可霉素耐药,对其余13种常用抗生素具有高度敏感性。以上结果表明,引发该牧场犊牛肺炎的病原为A型多杀性巴氏杆菌,且与国内报道的A型多杀性巴氏杆菌同源性较高,提示A型多杀性巴氏杆菌在国内牧场具有较广泛的流行性。本研究为犊牛呼吸道综合征的病原学调查和多杀性巴氏杆菌流行病学提供数据参考。

乌鲁木齐生牛乳中金黄色葡萄球菌的肠毒素检测及分离株同源性分析

探究乌鲁木齐生牛乳中金黄色葡萄球菌经典肠毒素携带情况及分离株同源性差异,为金黄色葡萄球菌的防控提供参考。对乌鲁木齐地区采集的131份生牛乳样品采用特异性选择培养基结合PCR方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,并通过PCR方法检测金黄色葡萄球菌5种经典肠毒素(sea、seb、sec、sed、see)携带情况和根据测序结果对分离株进行同源性分析。结果显示,共分离鉴定到金黄色葡萄球菌13株,总分离率为9.92%(13/131);13株金黄色葡萄球菌经典肠毒素阳性菌株5株,阳性率为38.46%;13株金黄色葡萄球菌的同源性在93.7%~99.7%之间,遗传差异在0.3~6.6之间。研究表明,该地区生牛乳中存在一定金黄色葡萄球菌的污染,经典肠毒素阳性率较高,不同来源的分离株同源性高、差异性小。