天蓝色链霉菌中分化发育基因参与同源性重组

在天蓝色链霉菌中，SCP2质粒接合转移频率的快增长，SCP2质粒介导的质粒同源性重组频率的快增长与气生菌丝的形成同步。在1株bld基因突变株中，3株whi基因突变株中，测定SCP2质粒接合转移及其介导的质粒同源性重组，结果表明，除whiA基因突变导致质粒接合转移频率不稳定外，其余3个基因突变对质粒接合转移不产生影响，但在所测定的4个基因突变株中，质粒同源性重组的频率降低超过10倍。

G_1和G_2期细胞对X射线引起双链DNA断裂修复的影响

目的:探讨X射线对G_1和G_2期细胞双链DNA断裂损伤修复的动力学影响。方法:采用3%多聚甲醛或70%乙醇固定受X射线放射细胞的M059J、M059K和Hela,用流式细胞仪分选G_1和G_2期Hela细胞,以脉冲场电泳分析双链DNA断裂修复动力学。结果:乙醇固定不影响X射线放射引起的双链DNA断裂修复动力学,可用于固定Hela细胞G_1和G_2期的分选,且G_2期细胞双链DNA断裂修复速率显著慢于G_1期细胞。结论:G_1和G_2期细胞中的双链DNA断裂可能采用不同的修复方式。G_1期细胞主要采用快速的末端连接修复方式,而G_2期细胞主要采用相对较慢的同源性重组修复方式。

无标记的变异链球菌的clpP基因缺陷株的构建

目的 构建无标记的clpP基因缺陷的变异链球菌（简称变链菌）突变株.方法 设计引物PCR扩增大观霉素（Sp）抗性基因,使loxP位点位于Sp抗性基因的两侧,构建出大观霉素抗性基因盒（loxP-Sp-loxP）.将clpP基因克隆到pGEM-T-Easy TA载体后,双酶切以去除clpP基因的部分序列,并连入loxP-Sp-loxP,得到clpP基因缺陷的同源重组载体pIB△clpP-Sp.将该载体线性化并电转变链菌标准株,大观霉素筛选得到clpP基因缺陷株.再以温敏质粒pCrePA电转缺陷株,Cre重组酶表达并删除选择标记基因,继而在限制性温度下培养以消除pCrePA,获得无标记的clpP基因缺陷株,并进行PCR及DNA测序鉴定.结果 PCR及DNA测序结果表明clpP基因内部分序列已被删除,且无Sp抗性基因,该部位只留有一个34 bp的loxP位点.结论 在变链菌中成功构建出无标记的clpP基因缺陷株,为进一步研究clpP基因的功能及其在变链菌致龋过程中的作用奠定了基础.

拷贝数变异及其在眼病分子遗传学研究中的应用

拷贝数变异（CNV）是人类基因组内大于1kb的DNA片段拷贝数的异常变化，它广泛存在于正常个体，可能是人类表型变异的重要原因之一，是研究包括眼病在内的人类疾病的热点。目前认为CNV的形成机制可能是非等位基因同源性重组和非同源末端连接等所致。本文对CNV的多态性与表型变异、形成机制、检测方法及其在青光眼、白内障、虹膜发育不良、葡萄膜黑色素瘤、X-连锁眼白化病等眼病分子遗传学中的应用进行综述。