同源框CUT样蛋白1、热休克蛋白90在脑胶质瘤中的表达及对患者预后的影响

目的探讨同源框CUT样蛋白1、热休克蛋白90在脑胶质瘤中的表达及对患者预后的影响。方法选取86例脑胶质瘤患者作为观察组,同时选取40例因颅脑外伤行额叶减压手术患者作为对照组,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测CUX-1、HSP90蛋白表达,分析CUX-1、HSP90蛋白对脑胶质瘤患者无进展生存期(PFS)的影响。结果观察组患者脑胶质瘤组织中CUX-1、HSP90蛋白相对表达量分别为(1.10±0.26)和(1.13±0.21),均明显高于对照组(P﹤0.01);WHO分级Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CUX-1、HSP90蛋白相对表达量分别为(1.29±0.10)和(1.32±0.14),均明显高于Ⅰ~Ⅱ级(P﹤0.01);CUX-1、HSP90蛋白高表达患者中位PFS分别为25个月(95%CI:23.26~26.74)和25个月(95%CI:23.64~26.36),均明显短于CUX-1、HSP90蛋白低表达患者(P﹤0.01);CUX-1和HSP90蛋白表达呈正相关(r=0.760,P﹤0.05)。结论脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CUX-1、HSP90蛋白表达上调,与WHO分级有关,且两者间存在正相关关系,同时对患者PFS有影响。

CC类趋化因子22、叉头框蛋白P1在急性髓系白血病外周血中的表达及对预后的预测价值

目的探讨急性髓系白血病(AML)病人外周血中CC类趋化因子22(CCL22)、叉头框蛋白P1(FOXP1)表达水平及其预后预测价值。方法选择2018年5月至2019年5月在孝感市中心医院、华中科技大学医学院附属同济医院及咸宁市中心医院确诊的68例AML病人设为观察组,另取同期健康体检者68例作为对照组,采用酶联免疫法测定外周血CCL22,FOXP1表达水平,分析其与临床特征的关系;采用Pearson法分析AML病人外周血中CCL22,FOXP1表达的相关性;采用Kaplan-Meier生存分析法分析CCL22,FOXP1表达与总体生存时间(OS)的关系;采用Cox比例风险回归模型分析病人预后死亡的影响因素。结果与对照组相比,观察组CCL22[(600.27±62.89)ng/L比(756.84±100.86)ng/L],FOXP1[(56.02±13.68)ng/L比(103.06±22.16)ng/L]表达均明显升高(t=10.86,14.90,均P<0.05);CCL22,FOXP1表达水平与AML病人年龄、性别、染色体预后、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、FMS样酪氨酸激酶3-内部串联重复基因(FLT3-ITD)、核仁磷酸蛋白基因1(NPM1)突变无关(χ^(2)=0.06~2.95,均P>0.05),与脾肿大、白细胞计数(WBC)有关(χ^(2)=5.90~8.59,均P<0.05);Pearson法分析结果显示,AML病人外周血中CCL22与FOXP1表达呈正相关(r=0.27,P<0.05);Kaplan-Meier法分析结果显示,AML病人外周血CCL22,FOXP1高表达组3年生存率均低于低表达组(47.06%比70.59%,44.12%比73.53%)(χ^(2)=6.50,P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,CCL22,FOXP1是影响AML病人预后的独立危险因素(P<0.05)。结论CCL22,FOXP1在AML病人外周血中呈高表达,CCL22,FOXP1高表达组病人3年生存率均低于低表达组,二者有望成为AML病人预后评估的分子标志物。

NK2同源框蛋白-1在胚胎反复种植失败中的研究进展

胚胎着床是一个复杂的生理过程,除了拥有优质胚胎以外,还需要良好的子宫内膜容受性以及母胎之间的协调对话。NK2同源框蛋白-1(NK2 homeobox protein 1,NKX2-1)是一种含有同源结构域的转录因子。最近研究表明NKX2-1可以通过调控一系列细胞因子及黏附分子的作用影响胚胎着床过程,从而导致反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)的发生。本文就NKX2-1的结构、功能及其与反复种植失败之间的关系做一综述,并对今后研究方向作一展望,以期对RIF的发生机制和防治策略有更深入的了解。

超音刺猬蛋白 转录因子叉头框转录因子M1及神经胶质瘤相关癌基因同源物1在宫颈癌中的表达与临床意义

目的探究刺猬因子(Hedgehog)信号通路分子超音速刺猬蛋白(Shh)及其下游转录因子叉头框转录因子M1(FoxM1)和神经胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli1)在宫颈癌中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法选取遂宁市中心医院2016年1月至2016年8月收治的50例宫颈癌患者宫颈黏膜组织作为观察组,选取30例同期收入的宫颈黏膜组织正常的阴道炎患者作为对照组,应用免疫组化检测两组对象宫颈黏膜组织中Shh、FoxM1、Gli1的表达情况,分析宫颈癌组织中Shh、FoxM1、Gli1蛋白表达与临床病理特征之间的关系。结果 Shh、FoxM1、Gli1蛋白在宫颈癌组织中的表达阳性率分别为86%、90%、92%,较正常宫颈组织升高,差异有统计学意义(P<0.05);Shh、FoxM1、Gli1蛋白与患者年龄、肿瘤大小、浸润深度均无显著相关性(P>0.05);Spearman相关性分析显示,Shh在宫颈癌中的表达与组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移相关(P<0.05);FoxM1只与淋巴结转移相关(P<0.05);Gli1的表达水平与宫颈癌组织的分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05);Shh、FoxM1、Gli1三者之间互为正相关(P<0.05)。结论 Shh、FoxM1、Gli1在宫颈癌组织中呈高表达状态,Shh和Gli1蛋白与宫颈癌组织分化程度有关,而FoxM1蛋白只与宫颈癌是否发生淋巴结转移有关,此三者的检测,有助于宫颈癌的早期诊断,可作为预测宫颈癌发生发展的指标。

肝细胞癌中Kruppel样因子4与叉头框蛋白M1基因表达相关性及临床意义

目的探讨人肝细胞癌中核转录因子Kruppel样因子4(KLF4)与叉头框蛋白M1(FOXM1)基因表达相关性,以及两种转录因子表达对肝细胞癌生长和增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR技术检测50例肝细胞癌患者肝癌组织及8株肝癌细胞中KLF4m RNA和FOXM1 m RNA表达水平并分析其相关性;KLF4过表达质粒和KLF4 si RNA分别转染人肝癌细胞Hep3B和BEL-7402,采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹实验检测KLF4 m RNA、FOXM1m RNA及KLF4蛋白、FOXM1蛋白表达水平;通过CCK8实验检测KLF4和FOXM1基因对细胞增殖的影响。结果肝癌组织和细胞中KLF4低表达,而FOXM1高表达,两者呈负相关(r=-0.462,P=0.001);KLF4基因过表达抑制肝癌细胞增殖,而FOXM1基因过表达促进肝癌细胞增殖,FOXM1基因过表达能恢复KLF4对肝癌细胞抑制增殖作用。结论在肝细胞癌中,KLF4和FOXM1基因表达呈负相关,两者不同的表达水平可影响肝癌细胞的增殖。

下调含植物同源结构域和环指结构域泛素样蛋白1(UHRF1)的水平可抑制肾癌769-P细胞增殖并促进其凋亡

目的利用针对含植物同源结构域和环指结构域泛素样蛋白1(UHRF1)的小干扰RNA(siRNA)在肾癌769-P细胞中下调UHRF1的表达,探讨其对769-P细胞增殖和凋亡的影响。方法根据人UHRF1的mRNA序列设计并合成2对针对UHRF1的siRNA,用脂质体将其瞬时转染入769-P细胞。利用实时定量PCR检测UHRF1 mRNA的水平,Western blot法检测UHRF1的蛋白水平;利用MTT法检测细胞增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果 UHRF1 siRNA可显著抑制UHRF1的mRNA和蛋白水平,下调769-P细胞UHRF1水平后,细胞增殖显著减弱,细胞凋亡显著增加。结论下调UHRF1的表达可抑制肾癌细胞的增殖并促进其凋亡。

同源异型框蛋白Msx1的两个新的磷酸化位点的鉴定

同源异型框蛋白Msx1的同系物Msx2中已鉴定出磷酸化修饰位点,并且发挥着重要的生物学功能。但是对Msx1的磷酸化修饰情况还不清楚,为了对Msx1的磷酸化修饰情况进行研究。利用生物信息学的方法对Msx1的磷酸化修饰位点进行预测,进一步利用免疫沉淀和质谱技术对其进行具体实验验证。C2C12细胞中的Msx1蛋白复合物经胰蛋白酶消化后,通过高效液相色谱和质谱技术进行分离和分析。结果发现两个新的磷酸化修饰位点,分别是152位的丝氨酸和160位的丝氨酸,而且两个磷酸化位点在人和小鼠中是高度保守的。进一步,制备针对这两个磷酸化位点的特异性磷酸化抗体。磷酸化位点的鉴定以及特异性抗体的获得为进一步研究Msx1的生物学功能提供了良好的条件。

乳腺癌患者唾液中转铁蛋白、间-α胰蛋白酶抑制因子重链H1、α2巨球蛋白及锌指同源框蛋白4水平测定及临床意义

目的探讨乳腺癌患者唾液蛋白内转铁蛋白(TF)、间-α胰蛋白酶抑制因子重链H1(ITIH1)、α2巨球蛋白(α2M)及锌指同源框蛋白4(ZFHX4)等4个相关蛋白的水平变化规律。方法收集18例乳腺癌患者和18例健康女性作为研究对象,采集其唾液标本,采用酶联免疫吸附试验检测唾液中TF、ITIH1、α2M及ZFHX4等4个蛋白表达水平。通过STRING和KEGG数据库对上述4种蛋白进行生物信息学分析。结果乳腺癌患者唾液中TF、ZFHX4水平分别为(3.092±0.309)mg/L、(0.546±0.084)μg/L,均高于健康女性的(2.231±0.217)mg/L、(0.207±0.059)μg/L,差异均有统计学意义(t=2.281,P=0.030;t=3.310,P=0.003)。乳腺癌患者唾液中ITIH1、α2M水平分别为(0.162±0.105)μg/L、(2.448±0.218)mg/L,均低于健康女性的(1.709±0.384)μg/L、(3.568±0.258)mg/L,差异均有统计学意义(t=3.891,P=0.001;t=3.318,P=0.003)。蛋白相互作用分析发现TF和α2M具有相互作用,TF是一个核心蛋白,还与多个蛋白具有相互作用。TF存在于缺氧诱导因子-1信号通路上,该通路在细胞生长发育和生理应激以及肿瘤的发生发展过程中具有重要作用。结论唾液中TF、ITIH1、α2M及ZFHX4等4个蛋白的水平变化可能与乳腺癌的发生发展密切相关,为乳腺癌的临床诊断提供一种新的方式。

信号转导及转录激活因子3、垂体同源框1及胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的探讨信号转导及转录激活因子3(STAT3)、垂体同源框1(PITX1)及胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(Gli-1)在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义。方法选取89例皮肤恶性黑色素瘤患者的肿瘤组织及癌旁组织。对患者进行随访,根据预后情况分为预后良好及预后不良。采用免疫组化法检测STAT3、PITX1、Gli-1蛋白表达情况,分析皮肤恶性黑色素瘤患者预后的影响因素。结果肿瘤组织中STAT3、Gli-1蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织,PITX1阳性表达率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。预后不良患者肿瘤组织中STAT3、Gli-1蛋白阳性表达率均高于预后良好患者,PITX1阳性表达率低于预后良好患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。肿瘤直径≥5 cm、STAT3阳性、PITX1阴性、Gli-1阳性均为皮肤恶性黑色素瘤患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。结论STAT3、PITX1及Gli-l蛋白在皮肤恶性黑色素瘤中存在异常表达,通过检测其水平能为临床治疗及预后提供新的思路与依据。

配对相关同源框1蛋白、癌易感性候选基因2在原发性肝癌组织中的表达及临床意义

目的:分析配对相关同源框1蛋白(paired related homoeobox-1,PRRX1)、癌易感性候选基因2(cancer susceptibility candidate-2,CASC2)在原发性肝癌组织的表达特点,探讨其与临床病理参数和预后的关系。方法:收集2014年1月至2017年1月收治的72例经手术切除的原发性肝癌患者癌组织、癌旁组织石蜡标本。采用实时荧光定量聚合链反应(real-time fluorescence quantitative polymerization chain reaction,qRT-PCR)检测PRRX1、CASC2表达。分析PRRX1、CASC2表达与临床病理参数的关系。以随访期间患者死亡为终点事件,分析PRRX1、CASC2表达与患者预后的关系。结果:原发性肝癌组织中PRRX1、CASC2表达均低于癌旁组织(P<0.05)。PRRX1表达与血管侵犯、肝内转移、远端转移和TNM分期有关系(P<0.05);CASC2表达与肿瘤分化程度、TNM分期有关系(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,PRRX1低表达组、CASC2低表达组原发性肝癌患者3年生存率均低于PRRX1高表达组、CASC2高表达组患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,远端转移、PRRX1低表达、CASC2低表达与原发性肝癌患者不良预后独立相关(P<0.01)。结论:PRRX1、CASC2在原发性肝癌组织中呈低表达。PRRX1、CASC2低表达可能与原发性肝癌发生和进展有关,可作为其预后评估的辅助指标。

卵巢高级别浆液性癌组织中叉头框转录因子M1和胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1的表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的探究卵巢高级别浆液性癌组织中叉头框转录因子M1(forkhead box M1,FOXM1)、胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(glioma-associated oncogene homoglog-1,Gli-1蛋白)的表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法选取2009年1月至2013年9月中国人民解放军中部战区总医院妇产科收治的经手术病理证实为卵巢高级别浆液性癌的82例患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测石蜡标本中FOXM1和Gli-1蛋白的表达情况;收集患者临床资料,分析FOXM1和Gli-1蛋白表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果临床分期Ⅲ~Ⅳ期、高中分化和伴腹水的卵巢高级别浆液性癌患者FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达率均显著升高(均P<0.05)。FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达患者的20、40、60个月生存率均显著低于阴性表达患者(均P<0.05),累计存活时间均显著短于阴性表达患者(均P<0.05)。结论临床分期Ⅲ~Ⅳ期、高中分化和伴腹水的卵巢高级别浆液性癌患者FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达率均显著升高,且FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达患者的生存率均下降。

老年子宫内膜样癌患者术后组织神经纤毛蛋白1、2和锌指E-盒结合同源异形盒-1的表达及意义

目的检测对老年子宫内膜样癌患者癌组织中神经纤毛蛋白(NRP)1、2和转录因子锌指E-盒结合同源异形盒(ZEB)-1的表达,探讨三者关系及在不同临床特征中的表达差别。方法收集145例老年子宫内膜样癌患者手术后存留的蜡块及临床资料作为研究组,收集90例子宫平滑肌瘤行子宫全切术后的正常子宫内膜组织作为对照组,应用免疫组化方法检测NRP1、2和ZEB-1表达。结果研究组NRP1、2和ZEB-1蛋白表达阳性率明显高于对照组(P<0.000 1),研究组NRP1、2和ZEB-1表达均与肿瘤TNM分期、浸润深度、脉管累犯和Ki67指数密切相关。NRP1、2和ZEB-1的表达呈正相关。结论老年子宫内膜样癌患者癌组织NRP1、2和ZEB-1高表达,三者可以有效促进肿瘤发生和进展且可能具有一定的协同作用。

Ras鸟苷酸释放蛋白1、垂体同源框1、消皮素D在皮肤黑色素瘤中的表达及相关性研究

目的探讨Ras鸟苷酸释放蛋白1(RASGRP1)、垂体同源框1(PITX1)、消皮素D(GSDMD)在皮肤黑色素瘤中的表达及诊断价值。方法选取2013年1月至2019年12月在该院诊治的72例皮肤黑色素瘤患者为研究组,对其癌组织、癌旁组织标本进行免疫组化染色,同时选取同期在该院进行整形手术的皮肤正常者40例为对照组。对待测标本中RASGRP1、PITX1、GSDMD表达进行检测,对比、分析RASGRP1、PITX1、GSDMD在不同临床特征皮肤黑色素瘤中的表达,探讨三者间的相关性及对皮肤黑色素瘤的诊断价值。结果与对照组比较,研究组癌组织中RASGRP1、PITX1表达降低,GSDMD表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。RASGRP1、PITX1、GSDMD的表达与皮肤黑色素瘤患者性别、年龄无关(P>0.05),与肿瘤最大径、浸润深度、分化程度、淋巴结转移、其他部位转移、预后情况、临床分期有关(P<0.05),且肿瘤最大径≥2 cm、ClarkⅢ~Ⅴ期、低分化、淋巴结转移、其他部位转移、预后不良、Ⅳ期皮肤黑色素瘤患者RASGRP1、PITX1表达较低,GSDMD表达较高(P<0.05)。Pearson相关分析显示,RASGRP1与PITX1呈正相关(r=0.523,P=0.001),RASGRP1与GSDMD呈负相关(r=-0.612,P=0.001),PITX1与GSDMD呈负相关(r=-0.569,P=0.001)。RASGRP1、PITX1、GSDMD联合检测对皮肤黑色素瘤的诊断价值优于单项检测(P<0.05)。结论RASGRP1、PITX1在皮肤黑色素瘤组织中低表达,GSDMD呈高表达,RASGRP1、PITX1、GSDMD可作为皮肤黑色素瘤的检测指标。

沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)与阿尔茨海默病研究进展

沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)激动可通过抑制β淀粉样蛋白沉积、tau蛋白磷酸化、炎症反应,调节突触可塑性,以及与Akt/蛋白激酶B通路共同作用,改善阿尔茨海默病(AD)的认知功能障碍。该文就SIRT1与AD研究进展进行综述。

配对相关同源框1基因与胃癌淋巴结转移的相关性

目的检测配对相关同源框1 (PRRX1)基因与上皮间质转化(EMT)相关蛋白(上皮型钙黏蛋白(E-ca)、波形蛋白(Vim))在胃癌组织及转移淋巴结组织中的表达水平以及PRRX1与E-ca、Vim表达的相关性,分析PRRX1的表达与胃癌淋巴结转移的相关性。方法分别收集转移淋巴结组织及胃癌组织标本,其中转移淋巴结组织标本65例,胃癌组织标本93例。通过实验分别测定胃癌组织及转移淋巴结组织中PRRX1、E-ca、Vim的表达情况,进一步根据实验数据探讨在胃癌组织、转移淋巴结组织中PRRX1和E-ca、Vim的表达差异及三者之间的相关性,结合临床病理学资料分析其临床意义。结果 (1) PRRX1和Vim在胃癌组织中的阳性表达率分别为69.89%、63.44%,在转移淋巴结组织中PRRX1和Vim的阳性表达率分别为43.08%、36.92%,两者之间差异具有统计学意义(P <0.05);E-ca在胃癌组织中的阳性率(44.09%)显著低于转移淋巴结组织(61.54%),两者之间差异具有统计学意义(P <0.05);(2)转移淋巴结组织中PRRX1蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴管侵犯、血管侵犯、神经侵犯密切相关(P <0.05);(3) PRRX1与Vim、E-ca在淋巴结转移组织中的表达分别呈正相关关系(r=0.429,P <0.05)、负相关关系(r=-0.334,P <0.05);(4)回归分析显示胃癌淋巴结转移的独立危险因素包含3个方面:PRRX1的表达、肿瘤大小、浸润深度。结论 PRRX1可能通过调控EMT促使胃癌发生淋巴结转移过程,影响患者预后。

手术标本YAP1、POU2F2、Cath-D表达与局限性肾癌术后复发的相关性及预测意义

目的研究手术标本Yes相关蛋白1(YAP1)、POU2家族同源框2(POU2F2)和组织蛋白酶D(Cath-D)表达与局限性肾癌术后复发的相关性及预测意义。方法回顾性分析2019年1月至2022年3月新乡医学院第一附属医院收治的282例局限性肾癌手术患者的临床资料,根据术后2年随访期内(2例失访)复发情况分为复发组42例和未复发组238例。比较两组患者的基线资料以及手术标本YAP1、POU2F2、Cath-D表达水平,采用多因素Logistic回归分析局限性肾癌术后复发的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析手术标本YAP1、POU2F2和Cath-D表达单一及联合预测局限性肾癌术后复发价值,采用Pearson相关分析法分析手术标本YAP1、POU2F2和Cath-D表达与复发时间的相关性。结果复发组患者的2017AJCCTNM分期T2期、Fuhrman分级Ⅳ级患者占比分别为80.95%、40.48%,明显高于未复发组患者的62.31%、21.85%,差异均有统计学意义(P<0.05);复发组患者的YAP1阳性率、POU2F2 mRNA和Cath-D阳性率分别为78.57%、1.70±0.36和83.33%,明显高于未复发组患者的47.90%、1.48±0.41、50.00%,差异均有统计学意义(P<0.05);校正前多因素Logistic回归分析结果显示,2017AJCCTNM分期T2期、Fuhrman分级>Ⅱ级、YAP1阳性、POU2F2mRNA、Cath-D阳性均与局限性肾癌术后复发相关(P<0.05),校正后YAP1阳性、POU2F2 mRNA和Cath-D阳性仍是局限性肾癌术后复发的独立相关危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,三者联合预测局限性肾癌术后复发的AUC为0.915,敏感度为80.95%,特异度为89.00%,明显高于各指标单独预测(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,手术标本YAP1、POU2F2、Cath-D表达与复发时间呈负相关(r=-0.802、-0.769、-0.834,P<0.05)。结论局限性肾癌患者手术标本YAP1、POU2F2和Cath-D表达水平与术后复发密切相关,其联合预测局限性肾癌术后复发具有良好参考价值。

circFOXM1作为新型胃癌标志物调控胃癌发生、发展的机制研究

目的分析新型胃癌标志物环状叉头框蛋白M1(circFOXM1)在胃癌发生、发展机制中的调控作用。方法选取2022年1月至2023年4月该院肿瘤科收治的60例胃癌患者作为研究对象,检测其胃癌组织及癌旁组织中circFOXM1的表达水平。根据circFOXM1的表达水平,将60例患者分为circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组。比较circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组的临床病理资料(淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法检测GES-1、HGC-27、BGC-823、MKN-45、MKN-1细胞中circFOXM1信使RNA(mRNA)、微小RNA(miR)-182-5p mRNA与母亲信号蛋白同源物7(SMAD7)mRNA及SMAD7蛋白的表达水平。体外培养MKN-45细胞,将其随机分为对照组、circFOXM1敲低组[转染circFOXM1小干扰RNA(siRNA)质粒]、circFOXM1过表达组(转染circFOXM1过表达质粒)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-182-5p抑制剂阴性对照)、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组(转染circFOXM1 siRNA质粒和miR-182-5p抑制剂),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组MKN-45细胞circFOXM1 mRNA、miR-182-5p mRNA与SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白的表达水平;采用Transwell侵袭及细胞划痕试验检测各组MKN-45细胞侵袭迁移情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组MKN-45细胞增殖情况。取50只裸鼠随机分为对照小鼠组、circFOXM1敲低小鼠组、circFOXM1过表达小鼠组、共转染阴性对照小鼠组、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,每组10只。将各组MKN-45细胞接种在对应裸鼠右腋附近背部皮下构建胃癌移植瘤模型,饲养4周后检测各组移植瘤裸鼠MKN-45细胞增殖率、肿瘤体积及肿瘤质量。将MKN-45细胞随机分为野生miR-182-5p+空载组、野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组、突变miR-182-5p+空载组、突变miR-182-5p+circFOXM1过表达组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic组,再按照不同方式对各组MKN-45细胞进行转染。采用荧光素酶报告试验检测各组MKN-45细胞circFOXM1对miR-182-5p、SMAD7的靶向调控。结果circFOXM1低表达组有17例患者,circFOXM1高表达组有43例患者。circFOXM1低表达组和circFOXM1高表达组患者淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。MKN-45、HGC-27、BGC-823、MKN-1细胞中circFOXM1 mRNA、SMAD7 mRNA、SMAD7蛋白表达水平均高于GES-1细胞,miR-182-5p mRNA表达水平均低于GES-1细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组circFOXM1 mRNA表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组和circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1过表达组,低于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平均低于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,均低于circFOXM1过表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低小鼠组MKN-45细胞增殖率低于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,肿瘤体积及肿瘤质量均小于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1过表达小鼠组MKN-45细胞增殖率高于对照小鼠组、肿瘤体积及肿瘤质量均大于对照小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组相对荧光素酶活性低于野生miR-182-5p+空载组(P<0.05)。野生SMAD7+miR-182-5p mimic组相对荧光素酶活性低于野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组(P<0.05)。结论敲低circFOXM1可经上调miR-182-5p而抑制表达SMAD7,从而抑制胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及其体内肿瘤生长,可作为胃癌的新型标志物。

子宫内膜样腺癌组织中PRRX1蛋白的表达及临床意义

目的探讨配对相关同源框1(paired related homoeobox 1,PRRX1)蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床意义。方法选取安徽医科大学第一附属医院以及安徽医科大学附属巢湖医院267例子宫内膜组织标本,其中正常子宫内膜86例,子宫内膜上皮内瘤变90例,子宫内膜样腺癌91例,均行免疫组化EliVision法检测,观察不同子宫内膜组织中PRRX1表达及子宫内膜样腺癌临床病理特征与PRRX1的关系。结果PRRX1蛋白表达主要定位于子宫内膜样腺癌组织的细胞核中,91例子宫内膜样腺癌组织中PRRX1阳性率为79.1%,高于正常子宫内膜组织(0)、子宫内膜上皮内瘤变组织(10.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜样腺癌患者按FIGO分级分类,FIGO1级的PRRX1阳性率低于FIGO 2、3级,差异有统计学意义(P<0.05);按患者年龄、临床分期、有无淋巴结转移分组,PRRX1阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论子宫内膜样腺癌组织中的PRRX1表达量高,且与FIGO分级相关。

急性心肌梗死外周血单个核细胞中CUX1、CTSD表达水平及其对预后的诊断价值

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)病人外周血单个核细胞(PBMC)中剪样同源盒1(CUT1)、组织蛋白酶D(CTSD)表达及两者对AMI预后的诊断价值。方法:选取2019年2月—2020年2月我院诊治的96例AMI病人为研究对象,根据随访1年内AMI病人是否发生主要不良心血管事件(MACE),将AMI病人分为预后不良组(32例)和预后良好组(64例)。以同期我院进行健康体检的60名健康者为对照组。应用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测各组病人PBMC中CUX1、CTSD的表达。比较各组CUX1、CTSD水平、临床生化指标及心功能指标。采用Pearson相关分析法分析AMI病人CUX1、CTSD表达与临床生化指标及心功能的相关性。采用多因素Logistic回归分析AMI病人MACE发生的影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析CUX1、CTSD对AMI病人MACE发生的诊断效能。结果:与对照组比较,AMI预后良好组及预后不良组病人PBMC中CUX1、CTSD表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组AMI病人PBMC中CUX1、CTSD表达及超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)明显升高,左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)及心排血量(CO)明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。AMI病人PBMC中CUX1、CTSD表达与hs-cTnT、NT-proBNP呈正相关,与LVEF、LVFS及CO呈负相关(P<0.05)。hs-cTnT升高、LVEF降低、CUX1升高及CTSD升高是AMI病人MACE发生的独立危险因素(P<0.05)。CUX1、CTSD及二者联合检测预测AMI病人MACE的曲线下面积(AUC)分别为0.776、0.874及0.910。二者联合检测预测AMI病人MACE的AUC显著高于单一指标检测。结论:AMI病人PBMC中CUX1、CTSD表达升高,是影响AMI病人不良预后的独立危险因素,两者联合检测有助于判断AMI病人临床预后。

癌组织FOXP1、CHI3L1表达与分化型甲状腺癌病人临床病理因素及预后的关系

目的 探索分化型甲状腺癌(DTC)病人癌组织叉头框转录因子P1(FOXP1)、壳多糖酶-3样蛋白-1(CHI3L1)表达情况及其与病人临床病理因素和预后的相关性。方法 选取2016年1月~2017年12月在本院行手术治疗的256例DTC病人,收集癌组织与癌旁组织(距癌旁组织>3cm),检测其FOXP1、CHI3L1表达水平;分析癌组织FOXP1、CHI3L1表达水平与预后的关系;以COX回归模型分析病人预后不良的影响因素。结果 DTC病人癌组织FOXP1阳性表达率低于癌旁组织,CHI3L1阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。DTC癌组织FOXP1、CHI3L1表达水平均与病灶数目、肿瘤直径、T分期、淋巴结转移、腺外浸润、分化程度有关(P<0.05)。DTC病人预后不良发生率为27.73%,FOXP1阳性表达病人预后不良发生率低于阴性表达病人(P<0.05),CHI3L1阳性表达病人预后不良发生率高于阴性表达病人(P<0.001)。肿瘤直径>2 cm、T3~T4分期、淋巴结转移、腺外浸润、低分化、癌组织CHI3L1阳性表达均是DTC病人预后的危险因素(P<0.05)。结论 DTC病人癌组织FOXP1表达下调,CHI3L1表达上调,二者均与DTC病人临床病理因素和预后显著相关。