同源盒基因10调控胰岛素样生长因子结合蛋白3与肠癌细胞5-氟尿嘧啶抵抗的关系研究

目的:研究同源盒基因10(HOXD10)调控胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)与肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)抵抗的关系。方法:原代肠癌细胞SW480敲减HOXD10,5-Fu耐药株细胞过表达HOXD10及敲减IGFBP3。CCK-8检测细胞增殖活性,细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,实时荧光定量PCR(qPCR)及免疫蛋白印迹(WB)检测HOXD10及IGFBP3表达水平。结果:耐药株在各5-Fu浓度下(5、10、20μg/ml)的增殖活性,与0μg/ml的5-Fu增殖活性比较无统计学差异(均P>0.05);而原代SW480细胞在5μg/ml的增殖活性出现下降(P<0.01)。耐药细胞组HOXD10的相对表达倍数(0.51±0.096)与原代细胞组(1.00±0.091)比较下调,而耐药细胞组的IGFBP3相对表达倍数(4.21±0.32)显著高于原代细胞组(1.00±0.22),WB也证实了耐药细胞组较原代肠癌细胞组有较低的HOXD10和更高的IGFBP3表达水平。在原代细胞组中敲减HOXD10、IGFBP3的表达水平增高;而在耐药细胞组中过表达HOXD10、IGFBP3的表达水平显著减低。在耐药株中敲减IGFBP3或过表达HOXD10后,耐药株对5-Fu敏感性增强,细胞克隆形成能力减弱。结论:HOXD10-IGFBP3调控轴与维持肠癌耐药表型密切相关,靶向抑制IGFBP3或过表达HOXD10可能在肠癌5-Fu化疗耐受提供精准干预靶点。

骨碎补及其主要成分对小鼠子宫内膜同源盒基因10 mRNA、白血病抑制因子和整合素ανβ3的影响

目的:探索骨碎补及其主要成分对胚泡着床障碍模型小鼠子宫内膜的影响。方法:实验动物分为7组:空白组、模型组、西药组I(补佳乐组)、西药组II(阿司匹林组)、骨碎补组、骨碎补总黄酮组、骨碎补柚皮苷组,以GnRHa+HMG+HCG方法造模,干预后检测各组相关指标的表达量。结果:骨碎补组及总黄酮组小鼠子宫内膜同源盒基因10(HOXA-10)mRNA表达明显增加(P<0.05);骨碎补组、总黄酮组及柚皮苷组白血病抑制因子(LIF)表达明显增加(P<0.05);骨碎补组整合素ανβ3表达明显增加(P<0.05),总黄酮组差异无统计学意义(P>0.05),但积分光密度值明显增加(P<0.05)。结论:骨碎补可能通过调节胚泡着床期子宫内膜HOXA 10、LIF、整合素ανβ3的表达,有利于胚泡对子宫内膜的黏附,从而改善子宫内膜容受性。总黄酮作为骨碎补药材的主要活性成分,亦可改善子宫内膜容受性。

微小RNA-144对人结肠癌细胞株增殖、侵袭迁移影响及其与同源盒基因A10结合力

目的 观察微小RNA-144(miR-144)对人结肠癌细胞株增殖、迁移、侵袭的影响及其与同源盒基因A10(homeobox gene A10,HOXA10)的结合力。方法 (1)人结肠癌细胞株HCT116、SW480、CL-11和永生化正常人结肠上皮细胞株FHC中miR-144及HOXA10 mRNA检测:采用实时荧光定量PCR法检测HCT116、SW480、CL-11及FHC中miR-144与HOXA10 mRNA,观察人结肠癌细胞和人结肠上皮细胞miR-144、HOXA10 mRNA表达变化,选择miR-144相对表达量最低HCT116细胞为后续研究对象。(2)miR-144对人结肠癌细胞株增殖、侵袭及迁移的影响观察:取对数生长期HCT116细胞分为3组,1组细胞顺序转染miR-144模拟物(miR-144 mimics)和HOXA10过表达质粒pcDNA3.1-HOXA10,2组细胞转染miR-144 mimics,3组细胞转染空白质粒。转染24 h时测算各组细胞增殖活性、观察各组细胞的侵袭及迁移情况、检测各组细胞miR-144及HOXA10蛋白。(3)HCT116细胞中miR-144与HOXA10的结合力观察:取对数生长期HCT116细胞分为4组:A组先后转染野生型HOXA10荧光素酶报告基因质粒(HOXA10-WT)、miR-144mimics,B组先后转染HOXA10-WT、空白对照NC-mimics,C组先后转染突变型HOXA10-MUT、miR-144 mimics,D组先后转染HOXA10-MUT、NC-mimics,转染24 h时采用双荧光素酶检测试剂测算各组细胞的相对荧光素酶活性(代表HOXA10、miR-144的靶向结合力)。结果 与FHC细胞比较,HCT116、SW480、CL-11细胞miR-144相对表达量低,HOXA10 mRNA相对表达量高(P均<0.05)。与3组比较,2组细胞miR-144相对表达量高(P<0.05),培养24、48、72 h时细胞OD值均降低,迁移及侵袭穿膜细胞数少,HOXA10蛋白相对表达量低(P均<0.05);与2组比较,1组细胞HOXA10蛋白相对表达量高,培养24、48、72 h时细胞的OD值均高,迁移及侵袭穿膜细胞数多。与B组比较,A组HCT116细胞的相对荧光素酶活性低(P<0.05)。结论 miR-144可抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移,同时抑制细胞HOXA10蛋白表达。HCT116细胞中miR-144与HOXA10靶向结合力较高,miR-144可能通过抑制HOXA10蛋白表达,进一步抑制结肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭。

同源异形盒A10基因启动子区甲基化及蛋白表达与子宫内膜异位症的关系

目的DNA甲基化在子宫内膜异位症发病机制研究中倍受到学者们关注。文中检测子宫内膜异位症(endome-triosis,EM)患者在位和异位内膜组织中同源异形盒A10(homeobox-A10,HOXA10)基因启动子区CpG岛甲基化程度及HOXA10蛋白表达水平,探讨EM与HOXA10基因异常甲基化和蛋白表达的关系及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和免疫组织化学法(SP法)检测36例EM患者中异位内膜组织(异位内膜组)、在位内膜组织(在位内膜组)及12例正常对照者子宫内膜组织(对照组)中HOXA10基因启动子区CpG岛甲基化状况和HOXA10蛋白表达情况。结果①36例EM患者的异位、在位内膜组织中HOXA10基因启动子区CpG岛甲基化率分别为38.9%、25.0%;其甲基化均发生在临床Ⅲ、Ⅳ期;12例正常子宫内膜组织中HOXA10基因均未发生甲基化;三组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。②EM患者在位、异位内膜HOXA10的表达下降,无明显的分泌中、晚期峰;异位内膜基质HOXA10的表达显著降低,低于对照组正常内膜表达,其差异有统计学意义(P<0.05)。③异位内膜组织HOXA10的蛋白表达与HOXA10基因启动子甲基化呈负相关,相关系数rs=-0.368。结论EM患者异位内膜组织中存在HOXA10基因启动子区异常甲基化导致基因失活,在EM发生发展过程中起重要作用。

电针对控制性超排卵小鼠子宫内膜同源盒基因A10表达时相的影响

目的观察电针对控制性超排卵(COH)小鼠子宫内膜同源盒基因A10(HOXA10)表达时相的影响,探讨电针提高体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床妊娠率的作用机制。方法共有150只雌性和80只雄性小鼠,取50只雌性鼠为自然周期组,剩余100只雌鼠制备COH模型并随机分为COH组(50只)和电针组(50只)。各组内再根据妊娠天数分为D2、D3、D4、D5和D6共5个小组,每小组10只。取D6小组小鼠子宫,观察妊娠率及平均着床位点数;取D2、D3、D4和D5小组子宫内膜,采用Western blot和RT-PCR技术检测HOXA10、整合素αvβ3和白血病抑制因子(LIF)蛋白及mRNA的表达。结果COH组妊娠率较自然周期组低,子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF表达峰值前移,D3小组高于D2、D4、D5小组(P<0.05,P<0.01)。经电针治疗后,HOXA10、整合素αvβ3和LIF表达峰值恢复至受孕第4天,较COH组推迟,临床妊娠率有增高趋势。结论电针调控COH小鼠子宫内膜HOXA10的表达时相,恢复正常种植窗期,是电针提高IVF-ET临床妊娠率的作用机制之一。

同源盒基因A10编码蛋白的靶调节基因的筛选与鉴定

目的:筛选和鉴定同源盒基因A10编码蛋白(HOXA10)的靶调节基因。方法:以人子宫内膜细胞系AN3CA为实验对象,采用染色质免疫沉淀方法筛选HOXA10靶基因;采用平端克隆方法构建HOXA10靶基因库;采用DNA序列分析结合生物信息学方法鉴定HOXA10靶基因。结果:共获得含有HOXA10结合片段的克隆197个,选取插入片段大于100bp的质粒67个进行DNA序列分析,其中含有HOXA10结合序列TTAT的基因16个。结论:初步筛选出16个HOXA10候选靶基因,为进一步研究HOXA10的基因调节机理提供了新的思路。

子宫内膜同源盒基因A10表达及调控研究

子宫内膜同源盒基因A10(HOXA10)是内膜细胞发育和分化的调控基因,在子宫内膜的表达呈月经周期依赖性,并持续表达于妊娠子宫的蜕膜组织。HOXA10基因的表达与子宫内膜的容受性,胚胎的黏附与着床,母胎界面的免疫耐受、胚胎的生长发育等紧密相关。对HOXA10基因的深入研究将为其在人工流产、不孕不育、辅助生殖技术等方面的临床应用提供可能性。

同源盒基因A10表达下调后抑制胃癌细胞裸鼠皮下成瘤能力及相关机制研究

目的探讨同源盒基因A10(homeobox gene A10,HOXA10)表达水平改变后对胃癌细胞裸鼠皮下成瘤能力的影响及其可能涉及的机制。方法利用生物信息学方法分析The Cancer Genome Atlas website(TCGA)数据库中HOXA10在胃癌中的表达水平,构建HOXA10表达降低稳转胃癌细胞株BGC-823-sh-HOXA10并进行裸鼠皮下成瘤实验,采用western blot检测HOXA10敲减后凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-xL(Bcl-xL)表达水平的改变情况。结果分析TCGA数据库后发现胃癌中HOXA10表达水平升高。HOXA10表达下调后,胃癌细胞株BGC-823裸鼠皮下成瘤能力减弱,凋亡相关蛋白Bcl-xL表达下调。结论 HOXA10在胃癌中表达异常升高,HOXA10表达水平降低后可抑制胃癌细胞BGC-823裸鼠皮下成瘤能力,影响抗凋亡蛋白Bcl-xL表达水平可能是其发挥作用的机制。

同源异形盒A10及上皮性钙黏蛋白在人子宫内膜癌组织中的表达

目的探讨同源异型盒基因A10（HOXA10）及上皮性钙黏蛋白（E—cad）在人子宫内膜癌组织中的表达及其相关性，探讨二者在子宫内膜癌发生发展及浸润转移中的作用。方法选取锦州市中心医院2012年1月-2013年1月手术切除的40例子宫内膜癌存档蜡块作为实验对象，选择同期因良性病变切除子宫的正常子宫内膜标本30例作为对照。免疫组化实验检测子宫内膜癌和正常子宫内膜标本中HOXA10和E—cad蛋白的表达。结果子宫内膜癌中HOXAl0蛋白的阳性表达率低。E-cad蛋白的正常表达率低，与正常子宫内膜比较，差异有统计学意义（P〈0．05）：并与子宫内膜癌的组织学分级、临床分期、肌层浸润深度、有无淋巴结转移有关（P〈0．05）；二者在子宫内膜癌中的表达呈中度正相关r=0．448，P〈0．05）。结论子宫内膜癌组织HOXA10表达下降或缺失可能通过某种机制下调了E—cad的表达，通过上皮间质转化途径促进Trio瘤的转移和侵袭。联合检测HOXA10和E—cad在子宫内膜癌的表达。可能有助于了解子宫内膜癌的恶性程度。

HOXA10基因表达对子宫内膜异位症患者胚胎着床的作用

同源异型盒(HOX)蛋白质是高度保守的转录因子,决定着包括人类在内的许多物种的部分生物性状的表达。HOXA10基因通过调节下游基因及雌激素、孕激素的表达直接影响子宫的胚胎发育和着床。根据体内激素的调控作用,HOXA10基因在子宫内膜上呈周期性表达,其表达高峰发生在植入窗期。HOXA10基因在子宫内膜异位症(EMs)病变中表达对子宫内膜组织的"从头开始"发育过程是必要的。EMs患者的子宫内膜存在影响胚胎着床的诸多不利因素,提示胚胎着床失败可能是EMs患者不孕的主要因素之一。EMs患者通常不会出现HOXA10表达水平在黄体中期上升的现象,可以解释EMs是造成不孕的原因之一。

HOXA10基因敲低对非小细胞肺癌安罗替尼敏感性的影响

目的 探讨同源异型盒基因A10 (HOXA10)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞安罗替尼敏感性的影响。方法 采用实时定量PCR检测HOXA10在NSCLC细胞中的表达。应用小干扰RNA在A549和PC-9细胞中敲低HOXA10表达,并用不同浓度安罗替尼处理细胞。Western blotting检测HOXA10蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖活性,以明确安罗替尼的细胞毒性,并计算半数抑制浓度(IC_(50));克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 HOXA10在NSCLC细胞中呈高表达;敲低HOXA10能够降低安罗替尼在A549和PC-9细胞中的IC_(50);敲低HOXA10能够增强安罗替尼对肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的抑制能力;敲低HOXA10能够促进安罗替尼诱导的细胞凋亡。结论 敲低HOXA10能够增加NSCLC细胞对安罗替尼的敏感性。

双酚A通过MLL1调控子宫内膜蜕膜化分子标志物HOXA10表达的分子机制

目的探讨组蛋白甲基化转移酶混合谱系白血病基因(MLL1)在双酚A(Bisphenol,BPA)影响子宫内膜间质细胞蜕膜化中的作用机制。方法CCK-8实验检测10pM、10nM、10μM BPA对细胞增殖能力的影响;RT-PCR和Western Blot检测BPA暴露后蜕膜化子宫内膜间质细胞中的MLL1及同源盒基因A10(HOXA10)mRNA和蛋白表达情况;CoIP实验验证MLL1和雌激素受体α(ERα)是否相互结合,以及BPA是否影响两者的结合;ChIP检测MLL1和ERα在HOXA10启动子区的富集效率。结果三种浓度BPA均不损害细胞的增殖能力;蜕膜化子宫内膜间质细胞中MLL1和HOXA10 mRNA和蛋白表达随着BPA浓度的升高逐渐降低;MLL1是ERα的共同作用因子,BPA暴露影响MLL1与ERα的结合;BPA暴露抑制了MLL1和ERα在HOXA10启动子ERE元件区域的富集。结论BPA通过影响转录因子ERα和共同作用因子MLL1在HOXA10启动子区的富集,调控HOXA10的表达,影响子宫内膜间质细胞蜕膜化。

lncRNA NEAT1调节miR-15a-5p/HOXD10轴对子痫前期滋养细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,NEAT1)对子痫前期(preeclampsia,PE)滋养细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及分子机制。方法体外培养人绒毛膜滋养细胞HTR-8/Svneo,分为正常对照(NC)组、si-NC组、si-NEAT1组、si-NEAT1+anti-NC组和si-NEAT1+anti-miR-15a-5p组。采用四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞术和Transwell小室实验检测细胞增殖活性、凋亡和侵袭能力;实时定量聚合酶链反应检测细胞中NEAT1、miR-15a-5p和同源盒基因D10(homeobox D10,HOXD10)mRNA表达;蛋白质印迹法检测细胞中HOXD10和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白[钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和神经钙黏素(N-cadherin)]的表达;双荧光素酶报告基因和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证HTR-8/Svneo细胞中NEAT1、miR-15a-5p和HOXD10的调控机制。结果敲减NEAT1可显著促进HTR-8/Svneo细胞增殖、侵袭和EMT,抑制细胞凋亡,并上调miR-15a-5p表达,抑制HOXD10的mRNA和蛋白表达(P<0.05);下调miR-15a-5p的表达可明显逆转NEAT1敲减对滋养细胞增殖、凋亡和侵袭的影响(P<0.05)。双荧光素酶和RIP实验证实NEAT1可靶向结合并负调控HTR-8/Svneo细胞中的miR-15a-5p,且HOXD10是miR-15a-5p的靶标。结论敲减NEAT1可通过上调miR-15a-5p抑制HOXD10表达,进而促进滋养细胞的增殖和侵袭,并抑制滋养细胞的凋亡。

同源异形盒基因D10启动子甲基化与胆管癌患者预后的关系

目的:研究同源异形盒基因D10(homeobox D10,HOXD 10)在人胆管癌组织中的启动子甲基化状态,并探讨HOXD 10基因启动子甲基化与胆管癌患者预后的关系。方法:采用甲基化特异性PCR法检测87例人胆管癌组织与30例癌旁组织中HOXD 10基因启动子的甲基化情况,并进一步采用重亚硫酸盐测序法检测HOXD 10基因启动子中27个胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(cytosinephosphateguanosine,CpG)位点的甲基化程度。然后,应用Spearman相关检验分析HOXD 10基因启动子甲基化与其蛋白表达的相关性,用cutpoint生存分析和Kaplan-Meier法检验HOXD 10基因启动子区CpG位点甲基化数目与胆管癌患者预后的关系。结果:胆管癌组织中HOXD 10基因启动子甲基化率明显高于癌旁组织(P<0.05),而且癌旁组织中HOXD 10启动子区域的CpG位点数目少于胆管癌组织。HOXD10蛋白表达和HOXD 10基因启动子甲基化在胆管癌中呈显著负相关性(r=-0.82,P<0.000 1)。HOXD 10基因启动子区有7个CpG位点甲基化是胆管癌患者生存分析的最佳"截点"(P<0.001),CpG位点数目为0～6个的胆管癌患者生存时间明显长于CpG位点数目≥7个的患者(P<0.01)。结论:基因启动子甲基化与HOXD10蛋白的表达失活密切相关,HOXD 10基因启动子区存在≥7个CpG位点甲基化可作为胆管癌患者预后不良的预测指标之一。

控制性超排卵对围着床期小鼠子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF表达的影响

目的:观察围着床期小鼠子宫内膜同源盒基因A10(HOXA10)、整合素αvβ3和白血病抑制因子(LIF)的表达,探讨控制性超排卵(COH)对小鼠子宫内膜容受性的影响。方法:昆明纯种性成熟小鼠经COH模型制备、胚泡移植后,随机分为自然囊胚+自然假孕组、COH囊胚+自然假孕组、自然囊胚+COH假孕组、COH囊胚+COH假孕组。取受孕第6天小鼠,观察各组妊娠率及平均着床位点数,采用Western blot和RT-PCR技术检测受孕第5天小鼠子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF蛋白及mRNA的表达。结果:COH假孕鼠接受囊胚移植后妊娠率、平均着床位点数较自然假孕鼠低;子宫内膜HOXA10、整合素αvβ3和LIF表达显著性低于自然假孕鼠,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:超排卵药物能下调种植窗期子宫内膜HOXA10、αvβ3和LIF的表达,降低子宫内膜容受性,导致临床妊娠率低下。

同源盒基因-A10在人体睾丸组织的表达及其临床意义

目的比较同源盒基因-A10(HOXA10)在正常人和隐睾症患者睾丸组织的表达差异。方法收集正常人和隐睾症患者的睾丸组织,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学的方法检测HOXA10的表达水平。结果HOXA10在正常人和隐睾症患者的睾丸组织均有表达,与正常组织比较,HOXA10在隐睾症患者睾丸组织的表达显著降低。结论HOXA10的表达减少与隐睾症的发生有密切关系。

同源盒基因C10对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响及在肿瘤微环境中的作用机制

目的探讨同源盒基因C10(HOXC10)对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响及其在肿瘤微环境中的作用机制。方法应用癌症基因组图谱(TCGA)与中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库分析HOXC10在高级别胶质瘤(胶质母细胞瘤)和低级别胶质瘤中的表达水平及其对患者生存的影响。按照HOXC10-siRNA转染操作说明书分别将HOXC10-siRNA 1(HOXC10-siRNA 1组)、HOXC10-siRNA 2(HOXC10-siRNA 2组)和siRNA NC(NC组)转染至U251细胞,在转染组中分别加入100 ng/ml重组蛋白趋化因子配体2(reCCL2),记为HOXC10-siRNA 1+reCCL2和HOXC10-siRNA 2+reCCL2组。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测各组细胞中HOXC10 mRNA和目的蛋白的表达,细胞计数试剂盒8法检测各组细胞的增殖能力,Transwell实验和划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,多因子检测各组细胞中趋化因子的表达。共孵育实验检测HOXC10和趋化因子配体2(CCL2)招募并极化肿瘤相关巨噬细胞(M2型巨噬细胞)的作用。结果TCGA数据库高级别脑胶质瘤中HOXC10中位表达水平(8.51)高于低级别脑胶质瘤(1.00,P<0.001),CGGA数据库高级别脑胶质瘤中HOXC10中位表达水平(0.83)高于低级别脑胶质瘤(0.00,P<0.001)。TCGA数据库HOXC10高表达患者5年生存率(28.2%)低于HOXC10低表达者(78.7%,P<0.001),CGGA数据库HOXC10高表达患者5年生存率(20.3%)低于HOXC10低表达者(58.0%,P<0.001)。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组细胞迁移数[分别为(45±3)个和(69±4)个]均低于NC组[(159±3)个,均P<0.05]。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组48 h细胞迁移率[分别为(15±2)%和(28±4)%]低于NC组[(80±5)%,均P<0.05]。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组细胞中Vimentin的表达水平分别为141740.00±34024.56和94655.00±5687.97,N-cadherin的表达水平分别为76810.00±14.14和94254.00±701.45,β-catenin的表达水平分别为75786.50±789.84和107296.50±9614.53,均低于与NC组(分别为233768.50±34114.37、237154.50±24715.50和192449.50±24178.10,均P<0.05)。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组细胞(96 h)吸光度值(分别为0.44±0.05和0.32±0.02)低于NC组(0.92±0.12,均P<0.05),HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组细胞凋亡率[分别为(10.23±1.24)%和(13.81±2.16)%]高于NC组[(4.60±0.07)%,均P<0.05]。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组U251细胞中CCL2的表达水平分别为271.63±44.27和371.66±50.21,低于NC组(933.93±29.84,均P<0.05),CCL5(分别为234.81±5.95和232.62±5.72)、CXCL10(分别为544.13±48.14和500.87±15.65)、CXCL11的表达水平(分别为215.75±15.30和176.18±16.49)均高于NC组(分别为9.98±0.71、470.54±18.84和13.55±0.73,均P<0.05)。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组招募CD14+THP1细胞数分别为(159.33±1.15)个和(170.67±1.15)个,低于NC组[(360.00±7.81)个,均P<0.05];HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组招募CD14^(+)THP1细胞数分别为(159.33±1.15)个和(170.67±1.15)个,低于HOXC10-siRNA 1+reCCL2组和HOXC10-siRNA 2+reCCL2组[分别为(287.00±3.61)个和(280.67±2.31)个,均P<0.05]。HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组细胞中肿瘤生长因子β表达水平(分别为0.30±0.02和0.28±0.02)低于NC组(1.06±0.10,均P<0.05),HOXC10-siRNA 1组和HOXC10-siRNA 2组细胞中NOS2表达水平(分别为11413.95±1911.85和5894±945.21)高于NC组(13.39±4.32,均P<0.05)。结论HOXC10在脑胶质瘤中高表达,且与脑胶质瘤患者不良预后有关。敲低HOXC10的表达可降低人脑胶质瘤U251细胞的增殖、迁移及转移能力。HOXC10在脑胶质瘤微环境中可能通过促进CCL2的表达进而招募并极化肿瘤相关巨噬细胞即M2型巨噬细胞从而发挥免疫抑制的作用。

HOXA10及相关微小RNA在子宫内膜异位症中的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是一种世界范围内普遍存在的妇科疾病,其具体的发病机制至今尚未明确。越来越多的证据表明EMs是一种表观遗传学疾病,通过DNA甲基化和微小RNA(microRNA,miRNA)调控等参与EMs的发生发展。同源盒基因A10(HOXA10)是DNA甲基化靶向调控的基因之一,不仅在雌性生殖系统中发挥着重要作用,且其异常表达及异常甲基化模式与EMs发病及不孕密切相关。miRNA是一类由大约22个核苷酸组成的高度保守的非编码调控RNA,通过调控子宫内膜细胞黏附、侵袭及血管生成等多种病理生理过程影响着EMs,但其确切作用机制尚未完全明确。近年研究发现HOXA10与miRNA在EMs患者中的表达存在相关性,miRNA能够异常调控HOXA10的表达进而促进EMs的发生发展。就HOXA10及相关miRNA在EMs中的研究进展进行综述,以期为进一步阐明EMs发病可能的分子机制及其临床诊治提供新的思路。

靶向沉默同源盒A10基因对白血病NB4细胞的影响

目的探讨慢病毒载体介导的短发夹RNA（shRNA）靶向沉默同源盒A10（HOXA10）基因对白血病NB4细胞增殖、凋亡和耐药的影响。方法将NB4细胞分为干扰（1enti—shHOXA10）组、阴性对照组和未处理组，用慢病毒感染NB4细胞5d后进行相关实验。运用流式细胞仪测定慢病毒对NB4细胞的感染效率。实时荧光聚合酶链反应（RT—PCR）、蛋白质印迹法（Westernblot）测定慢病毒干扰载体对HOXA10基因的沉默作用；MTF法检测细胞的增殖抑制情况。流式细胞术检测3组细胞凋亡率的变化，Westernblot方法测定干扰HOXA10基因对多药耐药1（MDR-1）蛋白的影响。结果慢病毒对NB4细胞的感染率达90％左右。干扰组HOXAl0mRNA和蛋白的表达水平均较对照组下降，干扰组细胞抑制率和凋亡率分别为（52．12±4．02）％、（30．0±2．7）％，与阴性对照组和未处理组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot结果显示干扰HOXA10基因的表达能降低MDR-1基因的表达水平，逆转白血病细胞耐药。结论慢病毒载体靶向干扰HOXA10基因的表达，能有效抑制NB4细胞增殖和促进其凋亡，逆转白血病细胞耐药。HOXA10基因有望成为逆转白血病耐药的新靶点。