同源盒基因A13降低胃癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性及其机制研究

目的探讨同源盒基因A13(HOXA13)表达水平对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响及其可能的机制。方法以HOXA13过表达与敲减稳转胃癌细胞株为研究工具,通过药物敏感实验检测HOXA13表达水平改变后,胃癌细胞对5-FU的敏感性有无改变。CCK-8、EdU实验检测HOXA13表达改变后对5-FU细胞增殖抑制作用的影响;流式细胞术检测HOXA13表达下调后对5-FU诱导胃癌细胞凋亡的影响;二代测序探讨HOXA13介导胃癌5-FU耐药的潜在机制。结果HOXA13表达上调后,胃癌细胞5-FU的IC25和IC50升高;下调HOXA13表达能够促进5-FU对胃癌细胞增殖的抑制作用,并促进5-FU诱导的细胞凋亡。ABC转运蛋白通路的激活可能是HOXA13引起胃癌细胞5-FU耐药的潜在机制。结论HOXA13表达异常升高后能够削弱5-FU对胃癌细胞增殖的抑制作用,引起胃癌细胞对5-FU耐药,ABC转运蛋白可能作为重要下游效应分子参与该过程。

同源盒基因A13转染对肾小管上皮细胞间充质转化和骨形成蛋白7表达的影响

目的探讨转染同源盒基因A13(HOXA13)对人血清白蛋白(HSA)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)间充质转化(EMT)和骨形成蛋白7(BMP-7)表达的影响。方法体外培养的HKC细胞株经人血清白蛋白(20 mg/m L)作用48 h后,采用免疫印迹法检测HKC细胞角蛋白(CK)、波形蛋白(vimentin)和HOXA13蛋白的表达。应用脂质体转染技术上调HKC细胞HOXA13表达,观察HOXA13不同表达水平对人血清白蛋白超载诱导CK、vimentin、BMP-7表达改变的影响。结果 20 mg/m L HSA刺激HKC细胞48 h后,HKC细胞出现EMT样改变:CK表达下降(P<0.01)、vimentin表达增高(P<0.01);HSA超载同时使HKC细胞内HOXA13、BMP-7表达下降。HOXA13转染上调HKC细胞内HOXA13表达后,显著抑制了HSA超载诱导的EMT发生(P<0.05)和BMP-7表达的下降(P<0.05)。结论转染HOXA13可拮抗白蛋白超载诱导HKC细胞发生EMT的作用,这种作用可能与HOXA13上调BMP-7表达有关。

同源盒基因A13下调对小细胞肺癌细胞增殖、周期、凋亡和耐药性的影响

目的探讨小细胞肺癌细胞同源盒基因A13(HOXA13基因)的表达及其下调前后对小细胞肺癌细胞株H146和H446增殖、细胞周期、凋亡以及耐药性的影响。方法利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blot法检测小细胞肺癌细胞株H69、H69AR、H1688、H146、H446及人支气管上皮细胞16HBE中HOXA13mRNA和蛋白的表达水平;应用RNAi技术下调HOXA13基因高表达细胞株H146和H446中HOXA13基因表达水平,采用CCK8法和流式细胞术检测HOXA13基因细胞增殖、周期、凋亡及耐药性变化。结果与16HBE细胞相比H69、H1688、H146、H446四种细胞中HOXA13基因高表达;而与H69、H1688细胞相比,H146、H446细胞中HOXA13基因分别相对高表达;下调H146、H446细胞HOXA13基因表达后,细胞增殖受到抑制,细胞周期S期阻滞,细胞凋亡率和药物敏感性增强。结论下调HOXA13基因可抑制小细胞肺癌细胞增殖和促进细胞凋亡,并增强细胞对化疗药物(阿霉素、顺铂和足叶乙甙)的敏感性,提示HOXA13基因可能在小细胞肺癌发生发展及耐药性的产生过程中发挥重要作用。

HOXA13蛋白表达与激素耐药型肾病综合征的关系

目的探讨同源盒基因A13(homeobox A13,HOXA13)蛋白的表达水平与激素耐药型肾病综合征的关系。方法选取2014年4月至2016年10月沈阳市第四人民医院收治的15例原发性肾病综合征患儿为研究对象,按照是否对糖皮质激素耐药将其分为激素敏感组(9例)和激素耐药组(6例),采用半定量评分法评价肾小管间质病理损害程度,免疫组织化学法检测肾小管上皮HOXA13蛋白的表达水平。结果激素耐药组患儿肾小管间质半定量评分显著高于激素敏感组(P<0.05),激素耐药组患儿HOXA13蛋白表达水平明显低于激素敏感组(P<0.05),且激素耐药组患儿HOXA13蛋白表达水平与肾小管间质病理损害评分呈负相关(r=-0.892,P<0.05)。结论原发性肾病综合征患儿肾小管上皮细胞HOXA13蛋白表达水平下降可能与糖皮质激素耐药有关。