结肠癌中同源盒蛋白SIX-6和基质金属蛋白酶-11表达及意义

目的观察结肠癌中同源盒蛋白SIX-6和基质金属蛋白酶(MMP)-11的表达,关注其临床意义及相关性。方法69例结肠癌患者为观察组,19例结肠黏膜高级别上皮内瘤变组织为对照组1,19例结肠黏膜低级别上皮内瘤变组织为对照组2,19例正常结肠黏膜组织为对照组3。应用免疫组化二步法检测各组组织中SIX-6和MMP-11表达。结果 4组SIX-6和MMP-11表达差异有统计学意义(P<0.01),观察组SIX-6和MMP-11表达与肿瘤最大径相关,SIX-6与肿瘤的浸润深度相关,MMP-11与脉管癌栓和淋巴结转移相关,二者均与性别、年龄、分化程度无明显相关性。线性相关分析显示观察组中SIX-6和MMP-11呈正相关。结论结肠癌中SIX-6和MMP-11表达升高可以促进肿瘤的发生和进展,二者有一定相关性。

肺腺癌中同源盒蛋白SIX-6和基质金属蛋白酶-14的表达及预后意义

目的观察肺腺癌中同源盒蛋白SIX-6(SIX-6)和基质金属蛋白酶-14(MMP-14)的表达,分析其临床意义。方法以85例肺腺癌患者作为观察组,以42例肺微浸润性腺癌作为对照组1,以42例肺原位腺癌作为对照组2,以42例正常肺组织作为对照组3。应用免疫组化二步法检测四组中SIX-6和MMP-14的表达。结果四组中SIX-6和MMP-14的表达差别有统计学意义,观察组中SIX-6和MMP-14的表达与病理形态、脉管浸润、淋巴结转移及TNM分期相关,SIX-6的表达与增殖指数、肺膜累犯相关,MMP-14的表达与肿瘤的最大径相关。SIX-6和MMP-14呈正相关性。生存分析显示SIX-6和MMP-14的表达与生存时间相关。SIX-6和MMP-14的表达与预后有关。结论肺腺癌中SIX-6和MMP-14表达升高与肿瘤的形成和进展有关,二者有一定的相关性。联合检测二者的表达对判断预后可能有一定价值。

细胞分裂周期蛋白-6、同源异型盒基因-5蛋白表达水平与乳腺癌患者组织学分级的关联性分析

目的:探讨同源异型盒基因-5(HOXA5)、细胞分裂周期蛋白-6(CDC6)蛋白表达水平与乳腺癌患者组织学分级的关联性。方法:选取乳腺癌患者119例与癌前病变119例患者为研究对象。所有乳腺癌患者均采取手术治疗,并于术中切取病变组织,用免疫组化法测定HOXA5及CDC6阳性表达情况。统计乳腺癌组与癌前病变组、乳腺癌组不同组织分化程度患者间HOXA5及CDC6阳性表达情况。结果:与癌前病变组比较,乳腺癌组CDC6(74.79%vs 19.33%,P<0.05))和HOXA5(68.07%vs 26.05%,P<0.05)阳性表达率显著增加;不同组织分化程度乳腺癌患者间HOXA5及CDC6阳性表达率存在显著差异(P<0.05),且高分化患者CDC6阳性率(53.85%)低于中分化(79.59%)及低分化患者(93.55%),高分化患者HOXA5阳性率(51.28%)低于低分化患者(87.10%)(P<0.05)。结论:乳腺癌患者肿瘤组织中HOXA5及CDC6过表达与乳腺癌组织学分级密切相关。

同源盒基因Pax-6在晶状体发育过程中的表达分析

目的 建立晶状体连续发育模型,检测Pax-6基因在小鼠晶状体发育的不同阶段的表达情况,探讨该基因在小鼠晶状体发育中的作用。 方法 利用RT-PCR法和Western blot法,检测Pax-6在小鼠晶状体发育不同阶段中的表达状况。 结果 在鼠胚9.5 d(E 9.5)即可检测到Pax-6的表达,在其连续发育阶段的E12.5,E17.5及新生10、20、60 d均可检测到Pax-6的表达。Western blot法同样发现在体外培养的原代细胞,传第1、第2及第3代的晶状体上皮细胞(LECs)中均能检测到Pax-6蛋白水平的表达。 结论 小鼠晶状体发育的各个阶段均具有Pax-6基因,该基因的正常表达是晶状体发育的必要条件。

HOXA9和LRP6在甲状腺癌中的表达及其在预后评估中的价值

目的探讨甲状腺癌组织中同源盒基因A9(HOXA9)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)表达情况及其在预后评估中价值。方法收集山东省菏泽市立医院2018年1月至2020年1月150例甲状腺癌患者术中切除的癌组织(TC组),另以同期100例甲状腺瘤患者术中切除的组织为对照(腺瘤组)。免疫组化法检测组织HOXA9、LRP6蛋白表达,分析HOXA9、LRP6蛋白表达与临床病理特征关系。Kaplan-Meier法分析HOXA9、LRP6蛋白表达与生存率关系。甲状腺癌患者预后影响因素利用COX回归模型。结果TC组HOXA9阳性表达率(72.67%vs 16.00%)、LRP6阳性表达率(68.67%vs 14.00%)明显高于腺瘤组(P<0.05)。经卡方检验以及GEPIA数据库检索发现,甲状腺癌组织HOXA9与LRP6表达水平呈正相关(P<0.05)。HOXA9、LRP6阳性表达者临床分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、细胞低分化者占比高于HOXA9、LRP6阴性表达(P<0.05)。HOXA9阳性表达总生存率(72.48%vs 92.68%)、LRP6阳性表达总生存率(71.84%vs 91.49%)低于HOXA9阴性表达、LRP6阴性表达(χ^(2)=6.829、6.508,P=0.009、0.011)。COX回归分析显示,临床分期Ⅲ期、HOXA9阳性表达、淋巴结转移、LRP6阳性表达是甲状腺癌患者不良预后的影响因素(P<0.05)。结论甲状腺癌组织中HOXA9、LRP6呈高表达,与临床病理特征及预后有关,可用于评估甲状腺癌预后指标。

去泛素化酶USP29调控CBX6蛋白质稳定性

多梳家族(polycomb group,PcG)是一类控制细胞命运和胚胎发育的转录抑制因子,主要以转录抑制复合物(polycomb repressive complex,PRC)的形式发挥功能。染色体盒蛋白质同源物6(chromobox protein homolog 6,CBX6)是PRC1的核心蛋白质亚基之一,在基因表达调控、细胞更新分化、肿瘤发生发展和干细胞干性维持等方面发挥重要的作用。本研究发现,CBX6通过泛素-蛋白酶体依赖性途径降解,接着利用包含92个去泛素化酶(deubiquitinating enzyme,DUB)基因表达文库进行筛选,发现泛素特异性蛋白酶29(ubiquitin-specific protease,USP29)能够明显地稳定CBX6的蛋白质水平并延长其半衰期(P<0.05);免疫沉淀结果发现,CBX6通过其C-端结构域与USP29发生相互作用;进一步研究发现,USP29通过去泛素化CBX6调控CBX6蛋白质稳定性,且这个过程依赖于USP29本身去泛素化酶活性。细胞增殖结果还发现,USP29能抑制MCF7细胞的增殖(P<0.0001)。综上所述,本研究通过筛选发现,USP29能够通过去泛素化CBX6来稳定CBX6蛋白质水平,且USP29能够抑制MCF7细胞增殖进程。

乳腺癌组织中CDC6及HOXA5蛋白的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中细胞分裂周期蛋白6(CDC6)及同源异型盒基因5(HOXA5)蛋白表达水平及临床意义。方法选取60例乳腺癌患者和30例乳腺小叶增生病例分别作为观察组和对照组,均采用免疫组化检测方法检测组织中CDC6、HOXA5及ER、PR、HER-2蛋白表达水平,分析CDC6与HOXA5蛋白表达水平与乳腺癌临床病理特征的关系,同时分析乳腺癌组织中CDC6及HOXA5蛋白表达与ER、PR、HER-2蛋白表达水平的相关性,以及CDC6与HOXA5蛋白表达的相关性。结果乳腺癌组织中CDC6和HOXA5蛋白表达水平与年龄无关(>0.05),与肿瘤直径、组织学分级、淋巴结转移及TNM分期等有关(均<0.05),乳腺癌组织中CDC6表达与HOXA5蛋白表达呈正相关(<0.05),乳腺癌组织中CDC6、HOXA5蛋白表达与ER、PR、HER-2蛋白表达呈正相关(均<0.05)。结论乳腺癌组织中CDC6及HOXA5蛋白均呈高表达,CDC6及HOXA5蛋白可能参与乳腺癌发生及发展的过程。

老年胃癌患者血清整合素β6和组织中Prox-1、FAT4表达变化及意义

目的探讨老年胃癌患者血清整合素β6和组织中同源异型盒基因转录因子(Prox)-1、脂肪非典型钙黏蛋白(FAT)4表达变化及对淋巴结转移的预测价值。方法选取老年胃癌患者80例为胃癌组,老年健康志愿者48例为对照组。采集空腹肘静脉血4 ml,双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清整合素β6浓度;术中采集老年胃癌患者的胃癌组织标本和癌旁正常组织标本,免疫组化法检测Prox-1、FAT4表达。结果胃癌组血清整合素β6浓度明显高于对照组(P<0.01)。胃癌组织中Prox-1表达阳性率明显高于癌旁正常组织,FAT4表达阳性率明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。肿瘤淋巴结转移分类(TNM)分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者血清整合素β6浓度明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者Prox-1阳性率明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者,FAT4阳性率明显低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平单独和联合检测对老年胃癌患者淋巴结转移均具有较高的预测价值(P<0.05),其中血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)=0.941],特异度和阳性预测值明显高于各指标单独检测(P<0.05)。结论老年胃癌患者血清整合素β6浓度升高,组织中Prox-1高表达、FAT4低表达,且与病理指标相关,联合检测可用于对患者淋巴结转移的预测。

SNHG6通过上调ZEB1表达促进食管鳞状细胞癌TE1细胞的侵袭和转移

目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因6(small nuclear RNA host gene 6, SNHG6)促进食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞侵袭和转移的作用及其分子生物学机制。方法:使用实时定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测36例ESCC组织及其癌旁组织(标本收集自河北医科大学第四医院2019年2月至8月外科手术的ESCC患者)中SNHG6表达水平;使用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测ESCC细胞系(TE1、Yes-2、Eca9706和Kyse150)中SNHG6表达水平,选用SNHG6高表达的TE1细胞,通过转染SNHG6-siRNA敲低该细胞中SNHG6表达;通过集落形成实验、划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测SNHG6敲低前后TE1细胞克隆形成、迁移和侵袭能力的变化;采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测SNHG6敲低前后TE1细胞中锌指蛋白E-盒结合同源异形盒-1(zinc finger E-box binding homeobox factor 1, ZEB1)、MMP-2和MMP-9蛋白表达的变化。结果:SNHG6在ESCC组织和细胞系中均呈高表达状态(均P<0.01),且在TE1细胞中高表达最为显著。转染SNHG6-siRNA后TE1细胞中SNHG6表达水平显著降低(P<0.01),si-SNHG6-1和si-SNHG6-2组TE1细胞的克隆形成、迁移和侵袭能力均显著低于对照组(均P<0.01),两组细胞中MMP-2、MMP-9和ZEB1表达水平均显著低于对照组(均P<0.05)。结论:ESCC组织中呈高表达的SNHG6可促进TE1细胞的恶性生物学行为,其机制可能涉及ZEB1表达的上调。

子宫内膜癌组织PROX1、FABP6表达及与临床病理特征的相关性研究

目的探究子宫内膜癌(EC)组织Prospero相关同源异形盒蛋白1(PROX1)、脂肪酸结合蛋白6(FABP6表达及与临床病理特征的相关性。方法以2018年2月至2020年2月在云南省第一人民医院诊治的96例EC患者为EC组,收集根治性手术切除的癌组织。同时期收集手术过程中获取的正常子宫内膜组织96例;比较癌组织及正常子宫内膜组织中PROX1和FABP6表达;分析PROX1、FABP6与临床病理的相关性及影响EC患者预后的危险因素。结果相较于正常组织,EC癌组织中PROX1、FABP6表达水平显著升高(P<0.05);肌层浸润深度≥1/2、肿瘤直径≥2 cm、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、病理分级G2~G3、有淋巴结转移EC患者癌组织中PROX1、FABP6阳性表达比例高于肌层浸润深度<1/2、肿瘤直径<2 cm、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、病理分级G1、无淋巴结转移患者(P<0.05);PROX1与FABP6阳性表达患者总生存率均显著低于阴性表达患者总生存率(P<0.05);FIGO分期(Ⅲ~Ⅳ)、有淋巴结转移、PROX1和FABP6阳性表达均是影响EC患者预后的危险因素。结论EC患者癌组织中PROX1、FABP6表达水平显著升高,两者与临床病理特征及患者预后密切相关。

CDC6及HOXA5蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及临床病理分析

目的：探讨细胞分裂周期蛋白6（CDC6）和同源盒异型基因5（HOXA5）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学 SP 法检测51例食管鳞状细胞癌组织和27例正常食管黏膜组织中 CDC6和 HOXA5蛋白的表达情况。分析 CDC6及 HOXA5蛋白的表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系及食管鳞状细胞癌中 CDC6与 HOXA5蛋白的相关性。结果 CDC6和HOXA5在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为66.7%（34/51）、60.8%（31/51），均明显高于正常食管黏膜组织中的阳性表达率18.5%（5/27）、22.2%（6/27）。两组 CDC6及 HOXA5的阳性表达差异有统计学意义（χ^2=16.370，P =0.000；χ^2=10.528，P =0.001）；CDC6和 HOXA5蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达与患者细胞分化程度（χ^2=9.031，P =0.011；χ^2=10.064，P =0.007）和肿瘤 TNM 分期（χ^2=10.474，P =0.015；χ^2=11.667，P =0.009）有相关性，与患者的年龄（χ^2=0.000，P =1.000；χ^2=0.001， P =0.972）、性别（χ^2=0.000，P =1.000；χ^2=0.107，P =0.743）及淋巴结转移（χ^2=3.186，P =0.074；χ^2=2.212，P =0.137）无相关性；两种蛋白在食管鳞状细胞癌中表达呈正相关（r =0.454，P =0.001）。结论CDC6和 HOXA5蛋白在食管鳞状细胞癌中的高表达均明显高于食管正常组织，且与肿瘤的 TNM 分期及组织分化程度密切相关，提示 CDC6及 HOXA5的高表达与食管鳞状细胞癌的发生、发展以及增殖密切相关。

FTO调控HOXB13的m6A甲基化修饰促进黑色素瘤侵袭与增殖

目的探讨脂肪肥胖相关蛋白(obesity-associated protein,FTO)和人同源盒蛋白HOXB13(homeobox B13,HOXB13)在皮肤黑色素瘤(cutaneous malignant melanoma,CMM)侵袭和增殖中的作用。方法自2019年1月至2020年12月,辽宁省人民医院皮肤科通过RT-PCR检测CMM细胞FTO和HOXB13表达,TCGA分析FTO和HOXB13表达及相关性,免疫沉淀检测HOXB13的6-甲基腺嘌呤(n6-methyladenosine,m6A)表达变化,CCK-8和Transwell分析FTO和HOXB13在CMM细胞增殖和侵袭中的生物学作用。结果与正常人表皮黑色素细胞相比,CMM细胞中FTO和HOXB13的表达水平均明显升高(P<0.05);FTO调控HOXB13的m6A甲基化水平。CMM中细胞敲降FTO后细胞增殖和侵袭能力明显减弱(P<0.05),而过表达HOXB13后增殖和侵袭能力明显恢复(P<0.05);FTO对CMM恶性表型的影响是通过HOXB13实现的。结论FTO可通过去除HOXB13的m6A甲基化修饰,上调HOXB13的表达促进CMM细胞的增殖和侵袭。