同种异体γδT细胞免疫疗法治疗晚期肝细胞癌的安全性及其对患者免疫功能的影响

目的:探讨使用同种异体Vγ9Vδ2 T细胞回输治疗晚期肝细胞癌(HCC)患者的安全性及治疗后患者免疫功能的变化。方法:选择2021年10月至2022年10月珠海市人民医院收治的4例晚期HCC患者,从健康供体获取外周血单个核细胞(PBMC)后经刺激扩增培养获得Vγ9Vδ2 T细胞,经质控放行后予以回输治疗,回输细胞剂量为5×10^(8)个/次,每两周一次,回输次数9次以上,治疗后检测患者αβT细胞、B细胞、NK细胞、γδT细胞各亚群比例,转氨酶、肌酐、肌酸激酶等肝、肾、心功能生化标志物,以及血常规三系(白细胞系统、红细胞系统和血小板系统)细胞数量的变化。结果:4例患者在回输治疗后均显示出对异体Vγ9Vδ2 T细胞良好的耐受性;转氨酶、肌酐、肌酸激酶等肝、肾、心功能生化标志物以及血常规三系细胞数量在回输前后均无明显变化;患者的Tfh1、Tc1、CD127^(+)TEM、HLADR^(+)CD8^(+)T细胞、CD27-B细胞比例有升高趋势,提示特异性免疫功能的增强。结论:同种异体Vγ9Vδ2 T细胞治疗晚期HCC有较好的安全性并可在一定程度上改善患者的免疫功能。

肿瘤抗原肽的HLA限制性确认和诱导反应性T细胞杀瘤能力评估

目的了解肿瘤抗原肽的HLA限制性以及其诱导的T细胞能否杀伤肿瘤细胞,探索无关供者来源细胞用于过继性抗肿瘤T细胞治疗。方法使用16个肿瘤抗原肽诱导18名无关供者外周血单个核细胞(PBMC)分化为反应性T细胞,并分析HLA型别;利用NetMHC数据库预测肽和HLA分子亲和力;选择HLA-A2限制性的肿瘤抗原肽诱导第二组17名无关供者的PBMC进行杀瘤实验,反应性T细胞作为效应细胞,T2细胞及肿瘤抗原肽同源的肿瘤细胞作为靶细胞,测量LDH(乳酸脱氢酶)释放量或者RTCA(实时无标记细胞分析仪)检测效应细胞杀瘤效率,比较HLA-A2+和A2-T细胞杀瘤效率。结果筛出和HLA-A2具有高亲和力的肿瘤抗原肽LM7,可诱导5/11 HLA-A2+为反应性T细胞,其中HLA-A2+纯合子则为3/3,而HLA-A2-者则为2/7。LM7诱导反应性T细胞杀伤肿瘤百分比A2+组明显强于A2-组(60.72±11.28 vs 47.2±4.46,P=0.03)。结论本研究显示NetMHC预测对于纯合子样品更有帮助,肿瘤抗原肽LM7具有HLA-A2限制性,可诱导部分HLAA2+PBMC分化为反应性T细胞,可杀伤肿瘤,应对供者进行HLA筛选并分析其细胞功能,其诱导的反应性T细胞可作为过继性T细胞抗肿瘤治疗的细胞来源。

共表达IL-7/CCL19的新抗原反应性T细胞对小鼠肺癌的抗肿瘤研究

背景与目的新抗原反应性T细胞(neoantigen reactive T cell,NRT)具有抑制表达特异性新抗原的肿瘤生长的能力。然而,由于免疫浸润困难和肿瘤微环境的抑制,NRT在实体瘤中的治疗效果有限。本研究针对小鼠肺癌细胞设计出可以同时表达白细胞介素7(interleukin 7,IL-7)和趋化因子19(chemokine C-C motif ligand 19,CCL19)的NRT细胞(7×19 NRT),并对7×19 NRT细胞和常规NRT细胞的抗肿瘤效果差异进行了评估。方法针对小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)进行了新一代测序和新抗原预测,制备了RNA疫苗,培养了NRT细胞,构建了编码IL-7和CCL19的逆转录病毒载体,转导NRT细胞并成功表达IL-7和CCL19,成功获得了7×19 NRT,并在小鼠体内外对其抗肿瘤效果进行了评估。结果7×19 NRT细胞通过分泌IL-7和CCL19显著增强T细胞的增殖和侵袭能力,在小鼠肺癌中实现了显著的抑瘤作用,延长了小鼠的生存期。经7×19 NRT治疗后,T细胞浸润肿瘤组织及肿瘤组织坏死显著增加。此外,7×19 NRT治疗与常规NRT治疗均安全。结论通过IL-7和CCL19的表达,NRT细胞的抗实体瘤能力显著增强,这是一种对NRT安全有效的基因修饰。

结直肠癌类器官的反应性T细胞受体筛选及功能鉴定

目的本研究通过建立基于结直肠癌(colorectal cancer,CRC)类器官模型以及CRC反应性肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)扩增和分离,筛选肿瘤特异性T细胞受体(T cell receptor,TCR)并进行功能验证,为结直肠癌个体化过继性T细胞免疫治疗的临床转化提供技术平台和研究基础。方法通过体外3D培养技术构建结肠癌患者组织来源的类器官模型,并利用HE染色和免疫组化进行形态学和特征分子表达检测。随后,将CRC类器官与TIL共培养,通过流式细胞技术分选反应性TIL,通过单个T细胞受体基因克隆技术分析反应性TCR克隆特征。进一步通过细胞毒性实验对TCR功能进行验证。结果通过形态学、代表性分子(CK20和CDX2)表达水平验证了结直肠癌类器官与患者肿瘤具有高度相似性。成功筛选到CD137表达上调和IFN-γ分泌增加的结直肠癌反应性T细胞,其中TCR2-T展现出较好的肿瘤反应性和体外肿瘤杀伤功能。结论建立了基于CRC-Org的反应性TCR筛选和功能验证平台,为结直肠癌个体化T细胞治疗转化应用提供技术平台。

通过Fas-FasL途径体外清除小鼠同种异体反应性T细胞

目的 通过Fas Fas配体 (FasL)途径清除小鼠同种异体反应性T细胞 (ARTC) ,为减轻异基因骨髓移植 (allo BMT)后的移植物抗宿主病探索新的手段。方法 用磁性细胞分离系统分离BALB c小鼠 (H 2 d)Sca 1+早期造血细胞 (HC) ,然后借助逆转录病毒基因转移技术对其转染外源小鼠FasL(mFasL)cDNA基因 ;扩增 1周后与异基因BAC小鼠 (H 2 d ×b)脾细胞进行单向混合淋巴细胞培养(OWMLC) 6d ,观察处理后的BAC小鼠脾细胞对Na251 CrO4标记的BALB c小鼠脾细胞的杀伤作用。结果 成功分离出BALB c小鼠Sca 1+HC ,纯度为 (89.0± 6 .1) %。BAC小鼠脾细胞与转染外源mFasL的BALB cHC以 1∶5比例共培养 6d后 ,对BALB c源脾细胞杀伤率在不同效、靶比例时均呈显著降低 (P<0 .0 1)。结论 体外反应中 ,转染外源mFasLcDNA并高表达的早期HC可清除针对自身MHC抗原的ARTC。

老年亚急性咳嗽病人辅助性T细胞亚群分布特征及其与气道高反应性的相关性分析

目的探讨老年亚急性咳嗽病人辅助性T淋巴细胞亚群的分布特征以及与气道高反应性程度的相关性。方法选取2021年6月至2023年6月于中国人民解放军西部战区总医院诊治的201例老年亚急性咳嗽病人,按照气道高反应性分级将病人分为轻度气道高反应性组(n=94)和重度气道高反应性组(n=107)。比较2组受试者的一般资料及生化资料;采用多因素Logistic回归分析影响老年亚急性咳嗽病人发生重度气道高反应性的危险因素;构建广义线性混合效应模型(GLMMs)分析辅助性T细胞亚群水平与气道高反应性程度的关系。结果2组在年龄、性别、咽喉瘙痒、反复呼吸道感染、鼻炎、气管异物,CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞,FVC、FEV1、FEV1/FVC、IL-25、IL-33、呼出气一氧化氮(FENO)方面差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,反复呼吸道感染、CD3^(+)和CD4^(+)T淋巴细胞水平降低及CD8^(+)T淋巴细胞、FEV1、IL-25、IL-33、FENO水平升高是老年亚急性咳嗽病人重度气道高反应性的危险因素(P<0.05)。GLMMs分析结果显示,CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞水平越低和CD8^(+)T淋巴细胞水平越高,老年亚急性咳嗽病人并发气道高反应性风险越大(P<0.05)。结论老年亚急性咳嗽重度气道高反应病人外周血CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞百分比低于轻度气道高反应性病人,CD8^(+)T淋巴细胞百分比高于轻度气道高反应性病人,且CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞水平与气道高反应性程度存在相关性。

H5Nx禽流感病毒交叉反应性CD4^(+) T细胞表位预测

【目的】评估预先存在的H5Nx交叉反应性免疫记忆,为人类H5禽流感病毒的防治和广谱疫苗的研发提供理论数据。【方法】利用生物信息学方法筛选人源H5Nx禽流感病毒与季节性流感病毒的共同保守的交叉反应性CD4^(+) T细胞表位,进一步分析保守表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和B细胞表位情况以及在中国人群中的覆盖率。【结果】92.3%(513/555)的H5Nx CD4^(+) T细胞表位在季节性甲型流感病毒中具有交叉反应性,其中172个表位嵌套CD8^(+) T细胞表位和5个表位嵌套B细胞表位。这些表位与相应HLA-DRB1等位基因在全世界人群中的覆盖率为88.65%。【结论】由于反复接触季节性甲型流感病毒,人群中存在一定水平的的H5Nx交叉反应性免疫记忆,能够为H5Nx感染提供部分保护。

同种异体反应性细胞与调节性T细胞在新生期诱导的小鼠移植耐受中的作用探讨

目的:初步探讨同种异体反应性T细胞克隆清除与调节性T细胞在小鼠移植耐受中的作用。方法:雌性BALB/c小鼠与雄性C57BL/6小鼠杂交一代获得F1小鼠,不同剂量的F1小鼠脾脏细胞经眶静脉输注给新生24 h C57BL/6小鼠体内诱导耐受,成年后移植F1小鼠来源的皮肤,建立不同耐受程度的小鼠移植耐受模型;耐受小鼠脾脏细胞经CFSE标记后注射到F1小鼠体内,分析耐受小鼠来源的T细胞在体内对F1抗原的增殖能力;流式细胞术、过继转移实验分析CD4+Foxp3+调节性T细胞在移植耐受和移植排斥过程中的表达。结果:C57BL/6小鼠在新生期输注F1小鼠脾脏细胞可诱导移植耐受,耐受程度与输注的脾脏细胞剂量有关,3×107个F1小鼠脾脏细胞可诱导C57BL/76小鼠长期皮肤移植耐受,1×107个细胞诱导可使移植皮肤生存时间显著延长,但在50 d内完全排斥;体内混合淋巴细胞反应实验证明,长期耐受小鼠体内的同种异体反应性T细胞被完全克隆清除,但低剂量组小鼠体内仍存在一定数量的反应性T细胞;流式细胞分析发现,高剂量和低剂量组小鼠体内的CD4+Foxp3+调节性T细胞表达与初始小鼠相比没有显著差异;同种异体反应性T细胞过继转移给耐受小鼠,移植耐受的皮肤发生排斥反应,小鼠体内的调节性T细胞表达升高。结论:小鼠的移植耐受程度与小鼠体内的同种异体反应性T细胞的克隆清除程度有关,与CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达没有直接关系;调节细胞在移植排斥过程中表达升高,可能作为一种反馈机制参与耐受的形成。

FasL基因转移诱导同种异体反应性T细胞凋亡的实验研究

目的 研究FasL基因转染鼠骨髓单个核细胞 (BMMNC)后 ,诱导同种异体反应性T淋巴细胞凋亡的效率。方法 采用脂质体法将mFasL cDNA转入Balb/C小鼠造血细胞 ,Western Blot检测其是否表达 ,然后将转染mFasL cDNA的BMMNC与BAC鼠 (Balb/C×C5 7BL/6 ,H 2d×b ,F1)脾单核细胞 (SMNC)混合培养 ,通过混合淋巴细胞反应 (MLR)及流式细胞仪 (FCM)检测SMNC的凋亡效率。结果 基因转移后Western Blot分析Balb/C鼠BMNC显示明显抗FasL抗体识别的条带 (约 4 0 0 0 0 ) ,未转基因的BMMNC无阳性条带发现 ;转基因组进行MLR其每分钟脉冲数 (CPM)值为 5 6 2 8± 186 ,明显低于对照组 (96 74± 78) (t=4 4 86 ,P <0 0 0 1) ;FCM检测转基因组诱导SMNC凋亡率为 (14 8± 0 4 ) % ,明显高于对照组 [(1 8± 0 4 ) % ](t=3 0 1,P <0 0 1)。结论 采用脂质体法能将mFasL cDNA转入鼠BMMNC ,并能有效表达 。

基于Th1/Th2表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响

目的 基于Th1/Th2表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响。方法 选择40只小鼠分为对照组、模型组、SIT组及地塞米松组,每组10只。除了对照组外均建立哮喘小鼠模型,激发阶段后SIT组注射1 mg的OVA,地塞米松组灌胃0.075 mg/mL溶液,其余大鼠注射等体积的PBS溶液。采用肺功能仪检测气道反应;经瑞氏-吉姆萨染色观察肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中细胞因子IL-13、IL-4、IL-5及INF-γ;HE染色观察肺组织形态;PAS染色观察肺气道上皮杯状细胞活性;流式细胞术检测肺组织中Th1及Th2占比。结果 特异性免疫可显著降低模型小鼠气道高反应性、减少BALF内炎性细胞活性,并可通过升高Th1降低Th2而抑制哮喘发生发展。结论 特异性免疫可缓解哮喘小鼠气道高反应性,抑制炎性反应,并通过改善气道上皮杯状细胞增生而缓解通气,可能与调节Th1/Th2表达相关。

化浊解毒抑溃煎对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2平衡、应激反应及肠黏膜的影响

目的探讨化浊解毒抑溃煎对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2平衡、应激反应及肠黏膜的影响。方法SPF级别Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、化浊解毒抑溃煎低、中、高剂量(1.25、2.5、5 kg·L^(-1))组及阳性药美沙拉嗪(0.05 kg·L^(-1))组,共6组。除对照组外,其余各组大鼠均建立溃疡性结肠炎动物模型,分别灌胃给予相应药物。ELISA法检测TNF-α、IL-8、IL-13、IL-10、IFN-γ及IL-4水平;相关试剂盒检测SOD、MDA及GSH-Px水平;HE染色观察肠道组织病理形态并计算评分;TUNEL法检测肠道上皮细胞凋亡率;免疫印迹检测肠组织NF-B、TLR4、MyD88、Bcl-2及Bax蛋白水平。结果与模型组相比,化浊解毒抑溃煎组TNF-α、IL-8、IL-13、MDA、IFN-γ、病理评分、肠上皮细胞凋亡率、NF-B、TLR4、MyD88及Bax水平降低(P<0.05),IL-10、IL-4、SOD、GSH-Px、Bcl-2水平升高(P<0.05)。结论化浊解毒抑溃煎可明显抑制溃疡性结肠炎大鼠氧化应激及炎症反应,促使Th1/Th2平衡,并发挥肠黏膜保护作用,其作用机制与抑制NF-B/TLR4/MyD88信号通路相关。

外周T细胞淋巴瘤患者血清代谢产物与临床特征的相关性分析

目的 观察外周T细胞淋巴瘤患者血清能量代谢产物的变化,从能量代谢角度寻找监测外周T细胞淋巴瘤的血清生物标志物。方法 收集2020年11月至2021年12月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心诊治的16例外周T细胞淋巴瘤初诊患者,并招募同期10名健康志愿者作为对照。采用选择性反应/多反应监测技术(selected/multiple reaction monitoring, SRM/MRM)检测其血清中能量相关代谢产物的差异,并结合其临床资料,包括病史、影像学、实验室检查等进行回顾性分析。结果 与健康对照相比,外周T细胞淋巴瘤患者血清中能量代谢相关产物水平表达谱存在差异,其中环磷腺苷、琥珀酸、柠檬酸和顺乌头酸含量显著降低(P<0.05),6-磷酸葡萄糖水平升高(P<0.05),且患者血清中的柠檬酸和琥珀酸水平与疾病危险度分级(低危、中危、高危)和临床分期呈负相关(P<0.05),同时,苹果酸和柠檬酸水平与患者中期疗效评估结果[完全缓解/部分缓解(CR/PR)或疾病稳定(SD)]呈明显负相关(P<0.05)。对于结外NK/T细胞淋巴瘤患者(n=10),与健康对照相比,其血清中环磷腺苷、琥珀酸、柠檬酸、异柠檬酸和顺乌头酸含量亦有显著降低(P<0.05),其中柠檬酸与琥珀酸的水平与结外NK/T细胞淋巴瘤患者的临床分期呈负相关(P<0.05),与中期疗效评估(CD/PR或SD)呈明显相关性(P<0.05);对于血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤患者(n=6),与健康对照相比,其血清中环磷腺苷、柠檬酸和琥珀酸的含量明显降低,而6-磷酸葡萄糖的含量明显升高(P<0.05),其中琥珀酸水平分别与患者临床分期和危险度分级都表现出明显的负相关(P<0.05)。结论 外周T细胞淋巴瘤患者与健康对照人群在血清代谢产物水平上共鉴定出5个差异代谢产物,其中琥珀酸、柠檬酸有希望成为血清生物标志物。

去细胞同种异体神经一期修复治疗毁损性断指再植指神经缺损的临床研究

目的:研究在毁损性断指再植指神经缺损的治疗中应用去细胞同种异体神经一期修复的作用。方法:择取2020年1月—2023年1月茂名市人民医院收治的20例毁损性断指再植指神经缺损病例,以随机数字表法为依据将其分为对照组和观察组,每组10例。对照组实施神经松解缝合或自体腓肠神经移植,观察组实施去细胞同种异体神经一期修复,通过门诊复查、上门随访、电话随访三种途径收集患者感觉功能恢复情况数据,随访时间6个月以上,同时观察两组临床疗效、不良反应发生情况。结果:观察组总有效率略高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组感觉功能恢复的总优良率略高于对照组,但组间差异无统计学意义(P>0.05)。两组均未出现感染及排斥等不良反应,相关差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在毁损性断指再植指神经缺损的治疗中,应用去细胞同种异体神经一期修复的效果确切,而且安全性良好,临床价值显著。

TLSF_(JM)对同种异体抗原诱导的小鼠杀伤性T细胞分化及效应功能的影响

本文以小鼠混合淋巴细胞反应为模型，研究了ＪＭ 急性Ｔ 淋巴细胞白血病细胞分泌的抑制因子（ ＴＬＳＦＪＭ）在体外对同种异体抗原诱导小鼠Ｔ 细胞增殖和杀伤性Ｔ 细胞分化的影响。结果表明：（１） ＴＬＳＦＪＭ 可明显抑制同种异体抗原刺激的Ｔ 细胞增殖， 且具有剂量依赖性；（２） ＴＬＳＦＪＭ 能有效地抑制同种异体抗原诱导的小鼠ＣＴＬ 分化；（３）ＴＬＳＦＪＭ 对杀伤相ＣＴＬ 的杀伤活性没有抑制作用。

GM-CSF基因修饰同种异体肺癌细胞疫苗诱导CD8^+ T细胞的免疫反应

目的探讨GM-CSF基因修饰同种异体肿瘤疫苗是否可诱导CD8+ T细胞的特异性免疫反应。方法以接种Lewis肺癌(Lewis Lung Cancer,LLC)细胞株的C57BL小鼠作为动物模型。利用含小鼠粒-巨细胞集落刺激因子(macrophage-colony-stimulating factor,GM-CSF)基因的重组质粒GM-CSF-pIRES2-EGFP,转染小鼠肺癌细胞株LA795,制备同种异体肿瘤疫苗。C57BL小鼠预防接种该疫苗3次后,皮下接种LLC细胞株,分别于免疫前、每次疫苗注射后采集小鼠脾淋巴细胞,采用ELISPOT法检测淋巴细胞经LLC抗原刺激后的活化;脾细胞及其中的CD8+ T细胞对LLC细胞株的杀伤活性;同时采用免疫组化方法检测注射部位淋巴细胞浸润情况。结果疫苗注射部位可见明显的CD8+T细胞浸润;经ELISPOT方法检测,GM-CSF基因修饰LA795疫苗接种后,小鼠脾淋巴细胞经LLC抗原刺激后活化细胞比例均显著升高(P<0.01);同时,脾细胞及其中的CD8+ T细胞对LLC细胞的杀伤活性明显升高(P<0.05)。结论GM-CSF分泌性同种异体瘤苗可诱导CD8+ T细胞的活化,以及对自体肿瘤细胞的杀伤,即可诱导特异性抗肿瘤免疫反应。

同种异体肾移植患者血清细胞因子与亚临床排斥反应的相关性研究

目的:探讨同种异体肾移植术后患者血清细胞因子(IL-2、IL-6、IL-8、IL-10)表达与亚临床排斥反应的关系。方法:采用ELISA检测15例亚临床排斥反应患者(亚临床排斥反应组)血清细胞因子,并与23例无排斥反应患者(无排斥反应组)和20例健康体检者(正常对照组)进行比较。结果:肾移植患者术后4个月肾移植患者血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平高于正常对照组,其中IL-6、IL-8、IL-10与正常对照组和无排斥组相比有统计学差异(P<0.05);亚临床排斥反应组干预后血清细胞因子水平明显降低,均达到正常值,其中IL-6、IL-8、IL-10与干预前比较有统计学差异(P<0.05)。结论:术后IL-10与IL-6、IL-8的动态检测,对于及早发现亚临床排斥反应和干预疗效的评估具有重要意义。

细胞凋亡调控基因bcl-2、bax在同种异体肢体移植急性排斥反应中的表达

目的探讨细胞凋亡调控基因bcl-2、bax表达在同种异体肢体移植急性排斥反应时的作用及其意义。方法选用近交系SD大鼠、Wistar大鼠进行同种异体肢体移植。实验组:异基因(SD→Wistar);对照组:同基因(Wistar→Wistar)。于术后第1、3、5、7天分别取移植肢体皮肤、肌肉组织进行病理学观察。原位末端标记法(TUNEL)和免疫组化方法检测移植肢体中的凋亡细胞及bcl-2、bax表达的变化。结果病理学检查结果显示实验组大鼠在术后发生由轻到重的急性排斥反应,术后第7天因严重排斥而使小血管广泛栓塞。对照组无明显排斥现象。实验组的细胞凋亡数明显高于对照组,同时bcl-2表达降低,bax表达增高。结论细胞凋亡在大鼠异基因肢体移植急性排斥反应中发挥重要作用,调控基因bcl-2、bax可作为判断移植肢体预后及监测排斥反应的重要指标。

CD4^+CD25^+调节性T细胞在同种异体移植免疫耐受中的研究进展

同种异体器官移植已经成为终末器官衰竭患者修复病损的组织和器官,并重建其功能必要的治疗方法。受者往往都需要长期接受免疫抑制剂来维持移植物在其体内的存活。由于免疫抑制剂的非特异性及毒副作用,长期应用该类药物会导致受者免疫力低下而出现易感染、癌症等副作用。因此,解决该问题的关键是诱导受者对供者移植抗原产生特异性地"移植免疫耐受"。大量研究结果显示,CD4+CD25+调节性T细胞能特异性地抑制免疫排斥反应,在调控免疫应答与维持外周免疫耐受中发挥着重要作用。本文对近年来CD4+CD25+调节性T细胞的作用机制及其在同种异体移植免疫耐受方面的研究进行了综述。

测定同种异体反应中分泌细胞因子的T淋巴细胞及其临床意义初探(英文)

本研究目的是测定同种异基因外周血单个核细胞 (PBMNCs)刺激后分泌不同细胞因子的T淋巴细胞水平并对其临床意义进行研究 ,以建立一种监测同种异体反应性T淋巴细胞的新方法。首先 ,利用新颖的细胞因子分泌检测方法 (CKSA)从单细胞水平定量测定了人混合淋巴细胞反应后分泌IFN γ ,IL 4和IL 10的T淋巴细胞水平 ;然后根据上述实验结果 ,分析 2例接受异基因骨髓移植后发生急性移植物抗宿主病 (aGVHD)的患者外周血中分泌IFN γ的T细胞水平。结果表明 :经同种异体PBMNCs刺激后分泌IFN γ的T淋巴细胞水平显著升高 [(1.12± 0 .13) % ],而分泌IL 4和IL 10的T淋巴细胞则无升高 ,分别为 (0 .12± 0 .0 3) %和 (0 .10± 0 .0 3) %。患者外周血分泌IFN γ的T淋巴细胞水平和aGVHD的发生及严重程度有一定的相关性。结论 :利用CKSA从单细胞水平定量测定同种异体PBMNCs刺激后分泌IFN γ的T淋巴细胞水平的技术具有临床应用价值 ,可以应用于对aGVHD的识别。

滤泡辅助性T细胞及其在抗体介导的肺移植排斥反应中作用的研究进展

伴有新生供者特异性抗体(donor-specific antibodies,DSA)产生的体液免疫或抗体介导的排斥反应已成为器官移植后长期生存的重要障碍,1/3同种异体移植物的功能丧失与之密切相关。由于肺区别于其他实体器官,致使约50%接受同种异体肺移植的患者都会发生慢性排斥反应,临床表现为慢性移植肺功能障碍(chronic lung allograft dysfunction,CLAD)。肺移植慢性排斥反应具有两种不同的临床亚型:限制性CLAD(restrictive CLAD,rCLAD)或称限制性移植物综合征(restrictive allograft syndrome,RAS)和闭塞性细支气管炎综合征(bronchiolitis obliterans syndrome,BOS),其中rCLAD/RAS患者的生存率明显低于BOS患者。最新的小鼠模型研究证实,B细胞及其分泌的供者特异性抗体(即同种抗体)在肺移植后RAS的同种移植物纤维化中发挥了不可或缺的作用。因此,为了预防和更好地治疗肺移植患者的同种异体排斥反应,需要深入探究启动和维持B细胞介导的抗供者免疫应答的具体机制。近年来越来越多的研究表明,同种抗体反应在很大程度上依赖于滤泡辅助性T(follicular helper T,Tfh)细胞的作用。本文对Tfh细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR)中作用的最新研究进展予以综述,并讨论了可能的干预策略。