同种异体移植物炎性因子-1在糖尿病睾丸大鼠模型中的表达及意义

目的探讨同种异体移植物炎性因子-1(AIF-1)在糖尿病(DM)睾丸大鼠模型中的表达及其意义。方法糖尿病睾丸(DMT)大鼠模型,随机分为糖尿病睾丸4周组(DMT4W组)、糖尿病睾丸8周组(DMT8W)、糖尿病睾丸12周组(DMT12W)。正常对照组(NC组)分为正常对照4周组(NC4W)、正常对照8周组(NC8W)、正常对照12周组(NC12W)。组织病理学检测各组睾丸形态学变化,免疫组织化学检测AIF-1蛋白表达,免疫荧光法观察AIF-1和NF-κB p65蛋白表达。结果组织病理学显示,与NC组相比,DMT组内睾丸内生精细胞数量,支持细胞、间质细胞、精子数明显减少。免疫组织化学结果显示,与NC组相比,DMT组睾丸内AIF-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示,与NC组相比,DMT各组AIF-1和NF-κB p65蛋白荧光强度显著增强。结论DMT组织AIF-1蛋白过表达,提示其在DMT病变过程可能起重要作用,有望成为治疗新靶点和诊断标记物。

同种异体移植炎性因子-1:一种多功能的炎性蛋白质

同种异体移植炎性因子-1(allograft inflamuatory factor-1,AIF-1)是由143个氨基酸组成的小分子蛋白质,链内含有一个可与Ca2+结合的EF-手形结构域。AIF-1最初发现于同种大鼠的异体移植心脏。AIF-1被证明与机体的免疫应答、血管病变及生殖功能紧密相关,并能调节细胞的增殖及迁移,是一种多功能的炎症蛋白质。

血清同种异体移植物炎性因子-1在2型糖尿病肾病中的变化及意义

目的探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血清同种异体移植物炎性因子-1(AIF-1)的变化及其临床意义。方法选取2018~2019年首都医科大学附属北京友谊医院收治的180例2型糖尿病肾病患者(观察组)进行前瞻性研究,根据尿白蛋白排泄率(UAER)情况将其分为正常白蛋白尿组(NA组,n=59)、微量白蛋白尿组(MA组,n=61)和大量白蛋白尿组(LA组,n=60);另选取同期健康体检者60例作为对照组。收集所有研究对象24 h尿进行UAER检测,并采集静脉血进行肿瘤坏死因子α(TNF-α)和AIF-1检测,比较各组间UAER、TNF-α和AIF-1水平,以及对DN患者UAER、TNF-α和AIF-1间的关系进行Pearson相关性分析。结果观察组患者UAER、TNF-α和AIF-1水平分别为(196.40±202.54)mg/24 h、(25.09±10.58)pg/ml和(225.06±121.50)pg/ml,较对照组(5.93±1.39)mg/24 h、(12.22±2.76)pg/ml和(79.61±16.91)pg/ml明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。NA组、MA组和LA组患者UAER、TNF-α和AIF-1水平分别为(6.93±1.79)mg/24 h、(118.74±23.98)mg/24 h、(461.66±100.87)mg/24 h,(16.08±3.33)pg/ml、(20.44±4.09)pg/ml、(38.69±4.49)pg/ml,(102.72±36.70)pg/ml、(211.95±37.25)pg/ml、(358.69±93.55)pg/ml,除NA组UAER较对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其他指标组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,DN患者AIF-1与UAER、TNF-α间的关系呈正相关性(r=0.822、0.772,P<0.01)。结论DN患者血清AIF-1水平升高,且与UAER和TNF-α呈正相关性,AIF-1极有可能成为DN诊治的新生物学标志物。

人同种异体移植炎症因子-1的基因克隆及其在小鼠成纤维细胞中的表达

目的构建人同种异体移植炎症因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)基因的真核表达载体并在小鼠成纤维细胞系(NIH3T3)中表达,为进一步研究AIF-1蛋白的功能奠定基础。方法利用基因重组技术,构建带有AIF-1基因的2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1。利用脂质体法将2种重组质粒分别转染NIH3T3细胞,用荧光倒置显微镜及Western blot方法观察及鉴定AIF-1在细胞中的稳定表达及瞬时表达。结果酶切分析及DNA序列测定证实,AIF-1基因片段被分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)与pEGFP-C1。荧光显微镜观察到NIH3T3细胞中有绿色荧光分布。Western blot结果表明,转染重组质粒的NIH3T3细胞中,AIF-1表达量明显增高。结论成功构建了2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1,经转染NIH3T3细胞株获得了AIF-1蛋白的瞬时表达及稳定表达。

深低温冻存同种异体皮肤移植中转化生长因子β1的表达

背景:皮肤移植和创面覆盖是创伤、烧伤治疗的重要措施。目前,同种异体皮仍然是可利用的最佳创面覆盖物。目的:通过检测转化生长因子β1在深低温冻存后的大鼠同种异体皮肤移植后的表达,评估深低温贮存同种异体皮在创面上的应用。方法:取大鼠皮肤保存于低温-20℃(低温保存组)及-80℃深低温(深低温保存组),冻存1周、1,2个月后,皮片分组移植于同种大鼠背部进行实验,并以自体移植大鼠作为对照组。结果与结论:同低温保存组相比,深低温保存组转化生长因子β1的表达被抑制,移植皮肤排斥反应出现时间延迟及存活时间延长,排斥反应评分也较低。同低温冻存相比,深低温冷冻保存能使同种异体移植物的转化生长因子β1抗原表达降低。提示深低温冻存的异体皮作为一种创面临时覆盖物,在存在皮肤组织缺失或皮源不足的情况下具有广阔的应用前景。

牦牛同种移植炎症因子AIF-1基因的克隆与表达

采用RT-PCR方法从成年麦洼牦牛脾中克隆到同种移植炎症因子AIF-1的编码基因,并研究了其在各组织中的表达模式。结果表明,AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一由147个氨基酸组成的蛋白,推测其分子质量约为16.6 ku,与其他多种动物的AIF-1的氨基酸序列有89%-95%的同源性。RT-PCR半定量分析结果显示,AIF-1基因在麦洼牦牛的脾、肾中都有转录,在脾中表达水平相对较高,而在肝、乳腺、心、肌肉中未见明显表达。

大炎肽/同种异体移植炎症因子1与动脉粥样硬化的相关研究进展

大炎肽/同种异体移植炎症因子1是一个新型炎症因子,近年研究发现其主要功能是活化巨噬细胞、促进血管平滑肌细胞的增殖和迁移,在动脉粥样硬化、冠心病的发生发展过程中发挥重要作用,并与血清中动脉粥样硬化危险因子水平密切相关,可能为动脉粥样硬化的诊断和治疗提供新思路。

同种异体移植炎症因子1研究进展

同种异体移植炎症因子1(allograft inflammatory factor 1,AIF-1)是从慢性排斥的心脏移植物中克隆的一种高度保守的炎症反应支架蛋白,通过调节细胞因子、趋化因子和诱导型一氧化氮合酶等炎症介质的表达参与炎症反应,是巨噬细胞活化的标志物。AIF-1具有广泛的生物学特性,参与移植排斥反应、自身免疫性疾病、肿瘤、血管病变、生殖系统疾病和中枢神经疾病的发生及发展,在多种疾病中起重要作用。

同种异体移植炎症因子1的研究与分析

同种异体移植炎症因子1(AIF-1)是一种胞浆内钙结合炎症反应蛋白,AIF-1可由巨噬细胞、腹膜间皮细胞、生殖细胞及足细胞等表达,参与炎症反应和免疫激活,从而通过不同发生机制参与纤维化疾病、心血管疾病、肿瘤、肾脏疾病等组织病理过程。血清AIF-1水平与病情的严重程度相关,并且在多种疾病中具有作为疾病治疗新靶点的潜在价值。

大段同种异体骨移植复合BMP_2和TGF-β_2对兔桡骨中段骨缺损愈合的影响

[目的]探讨外源性TGF-β2和BMP2复合同种异体骨对骨缺损愈合的作用。[方法]用兔桡骨骨缺损模型,在骨缺损局部单独或联合应用TGF-β2和BMP2与同种异体骨复合,A组:同种异体骨与BMP2复合;B组(对照组):自体骨;C组:同种异体骨与TGF-β2复合;D组:同种异体骨与TGF-β2、BMP2复合;通过不同时间X线片、生物力学、骨密度和骨痂钙含量的检测对骨缺损愈合情况进行评估。[结果]B组的骨痂钙含量、骨缺损愈合情况和愈合后的力学强度明显优于A、C、D组(P<0.01),D组优于A、C组(P<0.05),C组优于A组(P<0.01)。[结论]TGF-β2和BMP2在骨缺损愈合过程中均发挥了重要的作用。在兔骨缺损周围局部应用外源性TGF-β2和BMP2与同种异体骨复合,可明显促进骨缺损愈合,使骨痂量增加,增强骨折愈合后的力学强度。并且在骨折愈合时间上接近自体骨移植骨折愈合的时间,从而在临床上缩短了需要大段植骨患者治疗时间,减轻了患者痛苦。单用TGF-β2的作用强于BMP2。它们联合应用时,这种作用进一步增强,在促进骨缺损愈合方面具有协同作用。同时也为异体骨复合何种因子及因子的剂量提供可靠的参考指标。

血清AIF-1、Bmi-1、MAP19联合诊断宫颈癌的价值分析

目的探究宫颈癌患者血清中同种异体移植物炎性因子1(AIF-1)、B细胞特异性莫洛尼白血病毒插入位点1(Bmi-1)、甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAP19)水平变化及对宫颈癌患者的诊断价值。方法选取2023年1—12月武汉大学中南医院妇产科收治宫颈癌患者180例为观察组,另选取同期健康体检者180例为健康对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组研究对象血清AIF-1、Bmi-1、MAP19水平;比较宫颈癌不同分期患者血清中AIF-1、Bmi-1、MAP19水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清AIF-1、Bmi-1、MAP19水平对宫颈癌的诊断价值。结果与健康对照组比较,观察组患者血清AIF-1、Bmi-1、MAP19水平上升(t=13.054、13.598、10.601,P均<0.001);不同分期宫颈癌患者血清中AIF-1、Bmi-1、MAP19水平随分期升高而升高(F=32.001、8.232、10.602,P均<0.001);宫颈癌患者血清AIF-1、Bmi-1、MAP19高水平在病理低分化、HPV阳性、FIGOⅢ~Ⅳ期和淋巴结转移中比例升高(AIF-1:χ^(2)=41.162、27.607、13.718、23.824,P均<0.001;Bmi-1:χ^(2)=33.563、22.060、22.599、18.451,P均<0.001;MAP19:χ^(2)=49.585、14.913、25.545、13.605,P均<0.001);血清AIF-1、Bmi-1、MAP19水平及三者联合预测宫颈癌病变的AUC分别为0.759、0.726、0.751、0.839,三者联合优于各自单独预测价值(Z=2.499、3.363、2.749,P=0.012、<0.001、0.016)。结论宫颈癌患者血清AIF-1、Bmi-1、MAP19水平显著上升,且随宫颈癌分期升高而升高,三者联合对宫颈癌具有较高的诊断效能。

牦牛AIF-1蛋白表达及对巨噬细胞炎性因子mRNA的影响

旨在对牦牛同种移植炎症因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)蛋白进行原核表达、纯化,并探讨其对巨噬细胞炎性因子的影响。采用q-PCR检测AIF-1基因在牦牛5种组织中的表达量,构建原核表达载体表达纯化AIF-1蛋白,q-PCR检测小鼠巨噬细胞4种炎性因子的表达量。结果表明,AIF-1基因在麦洼牦牛脾中表达水平最高,极显著高于其它组织(P<0.01)。表达并纯化出约29.47 ku的AIF-1重组蛋白,1.0、10.0、100.0μg·mL^-1 AIF-1蛋白均能促进小鼠巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS的表达。这表明AIF-1在巨噬细胞免疫应答中发挥着一定作用,为深入研究牦牛AIF-1功能提供参考。

n-3多不饱和脂肪酸预防同种异体移植血管硬化的作用

目的研究n-3多不饱和脂肪酸预防同种异体移植血管硬化的作用。方法SD和Wistar大鼠各240只,随机配对成240对建立颈总动脉同种异体移植血管模型,并随机平均分成4组,每组60对。对照组:术前、术后未喂食n-3多不饱和脂肪酸;A组:术前2周始喂食n-3多不饱和脂肪酸600mg/kg(以EPA含量计,下同),直至摘取标本;B组:喂食300mg/kg;C组:喂食150mg/kg。分别于术后1、7、14、21和28d摘取受者移植血管,观察移植血管在活体的搏动情况,HE染色光学显微镜下观察移植血管的组织学病理改变,电子显微镜观察移植血管的超微结构变化,免疫组织化学染色检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和细胞核因子κB(NF-κB)在移植血管的表达。结果对照组术后7d移植血管开始有病理改变,28d时最为明显,管腔已基本堵塞;A组、B组、C组移植血管的病理改变均较对照组迟缓,管腔通畅率优于对照组。对照组ICAM-1,VCAM-1,NF-κB的表达较A组、B组和C组明显增强(P<0.05)。移植术后1d、7dICAM-1、VCAM-1、NF-κB的表达A组、B组、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05),移植术后14、21和28d的表达C组较A组、B组明显增强(P<0.05),而A组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论n-3多不饱和脂肪酸能够预防同种异体移植血管硬化,表现为移植血管病理改变发生迟缓,管腔通畅率高,ICAM-1,VCAM-1和NF-κB的表达减弱,n-3多不饱和脂肪酸以300mg/kg用量达到的效果最佳。

TGF-β1与大鼠慢性同种移植肾病的相关性

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在慢性同种移植肾病(CAN)发病早期移植物内的表达.方法:按照国际标准CAN试验大鼠模型要求选择遗传背景清楚的近交系雄性Fisher344(F344)大鼠和Lewis(Lew)大鼠利用显微外科技术行F344-Lew大鼠左肾原位移植(n=10),F344(n=9)和Lew(n=8)大鼠右肾切除作对照.利用免疫组化(LSAB)法进行检测TGF-β1在移植物内的表达.结果:在移植后第12wk,免疫组化结果显示TGF-β1在移植物内的表达增多.结论:TGF-β1是参与CAN早期发病的一个重要因子.

宫颈癌患者淋巴结转移的危险因素分析及血清TFF3、AIF-1、S100-A11、DKK1预测价值分析

目的 探讨宫颈癌患者淋巴结转移的危险因素分析及血清三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)、同种异体移植物炎性因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)、S100钙结合蛋白-A11(S100 calcium-binding protein-A11,S100-A11)、Wnt通路抑制因子Dickkopf-1(Wnt pathway inhibitor Dickkopf-1,DKK1)的预测价值。方法 选择2021年1月—2023年1月本院收治的71例宫颈癌患者作为研究对象,根据患者有无盆腔淋巴结转移分为淋巴结转移阳性组(28例)和淋巴结转移阴性组(43例)两组。收集两组患者临床病理特征,并检测血清TFF3、AIF-1、S100-A11、DKK1水平。结果 单因素分析显示,FIGO分期、宫旁浸润、肌层浸润、血清TFF3、S100-A11、DKK1是患者发生宫颈癌淋巴结转移的影响因素(P<0.05)。与年龄、分化程度、肿瘤大小、组织学类型、脉管浸润及血清AIF-1无关(P>0.05);Logistic多元回归分析显示,FIGO分期、宫旁浸润、肌层浸润及血清TFF3是影响宫颈癌淋巴结转移的独立因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,TFF3对淋巴结转移有中等预测价值(AUC=0.649),明显大于机会参考线下面积(P<0.05)。而AIF-1、S100-A11、DKK1对淋巴结转移无预测价值(AUC分别为0.477、0.517、0.524),与机会参考线下面积比较无统计学意义(P>0.05)。结论 FIGO分期高、宫旁浸润、肌层浸润、血清TFF3异常升高是宫颈癌淋巴结转移的危险因素,血清TFF3有望成为预测宫颈癌淋巴结转移的新标志物;血清AIF-1、S100-A11、DKK1对宫颈癌淋巴结转移的预测效能不理想。

同种异体骨移植中的骨形成相关因子表达研究

目的:从分子水平研究骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)及其相关因子—转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)在同种异体骨移植中的表达。方法:以移植兔桡骨为研究对象,分别于同种异体骨和自体骨植入后4、6、8、10和12周取各组节段骨痂,提取总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(reverse trans cription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测BMP-2、TGF-β和VEGF的mRNA表达和变化趋势,比较同种异体骨和自体骨移植的多因子表达情况。结果:RT-PCR结果经半定量分析显示,BMP-2、TGF-β和VEGF在4～12周的变化均呈非线性曲线,在第8周时BMP-2及TGF-β、VEGF的表达量均为最高。结论:同种异体骨和自体骨移植后骨组织内存在BMP-2、TGF-β和VEGF的持续分泌表达,其表达趋势与成骨细胞骨形成的活跃程度呈正相关,并且同种异体骨和自体骨移植后多因子表达无明显差异。

复合环孢素同种异体骨与冻干同种异体骨移植后免疫学比较

目的比较复合环孢菌素同种异体骨(cyclosporine-impregnated allograft bone,CAB)与冻干同种异体骨(freeze-dried allograft bone,FDAB)移植后的免疫学反应。方法 60只新西兰大白兔随机分为材料提供组、实验组和对照组,每组20只。取材料提供组双侧髂骨制备CAB及FDAB。实验组、对照组动物制备右侧桡骨中段10 mm的骨与骨膜缺损,实验组植入CAB修复,对照组植入FDAB修复。术后2周、4周、8周、12周每组各取5只动物,进行全血及移植部位骨组织IL-2、TNF-α浓度测定。结果术后2周、4周、8周、12周血中IL-2、TNF-α浓度两组之间无差异。术后2周、4周移植部位骨组织中IL-2、TNF-α浓度实验组低于对照组(P值分别为0.000、0.015),术后8周、12周移植部位骨组织中IL-2、TNF-α浓度两组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CAB移植后不会引起全身免疫反应,其引发的移植局部免疫排斥反应弱于FDAB。

慢性同种移植肾病大鼠早期MMP-9的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在大鼠慢性同种移植肾病(CAN)早期发病中的表达。方法按照国际标准的慢性同种移植肾病模型要求,以雄性Fisher(F344,RT1V1)大鼠作供体,雄性Lewis(LEW,RT1)为受体进行左肾原位移植。移植后第12周行功能学检查,按照Banff97工作分类标准进行组织学评价以及通过免疫组化检测MMP9和TGFβ1的表达。结果与对照组比较,实验组表现为移植肾肾小球不同程度的系膜增生和局灶节段性硬化,小管间质明显的单个核细胞浸润,局部小管萎缩,小动脉内膜轻度增厚和中层平滑肌细胞增殖并向内膜移行(P<0.01)。MMP-9在早期移植物内的表达增加,并与间质单个核细胞浸润相平行(r=0.77)。结论MMP-9作为一个重要因子参与CAN早期发病并在CAN单个核细胞浸润早期发病事件中起促进作用。

IL-1RA对急性排斥期大鼠角膜移植物TRAIL及其受体DR_4表达的影响

目的研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)对急性排斥期角膜移植物肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体-4(DR4)表达的影响。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,设生理盐水处理组和IL-1RA治疗组。免疫组织化学法检测急性排斥期角膜植片TRAIL及DR4表达,并以正常大鼠角膜作对照。结果TRAIL及DR4在正常角膜均有表达,主要分布于上皮层。急性排斥期角膜植片各层TRAIL及DR4 表达均增高;与IL 1RA治疗组相比,生理盐水处理组TRAIL及DR4表达增高更明显。结论TRAIL及DR4的表达参与角膜移植免疫排斥反应的发生,IL-1RA可通过调节其表达抑制角膜移植免疫排斥反应。