采用同种异体脱细胞基质组织修补材料行腹外疝修补术后的中远期观察

目的观察并分析同种异体脱细胞基质组织修补材料修补腹外疝的中远期疗效。方法选取门诊或电话随访2011年11月至2013年12月在该院应用同种异体脱细胞基质组织修补材料行腹外疝修补术的65例临床病例,观察并分析其术后并发症及复发情况。结果术后随访时间5~7年,65例患者均未出现切口慢性感染及排异反应,4例复发;6例有慢性疼痛,为阵发性隐痛,未影响活动及生活质量;3例早期有局部异物感,但均在术后2~3个月内消失。结论同种异体脱细胞基质组织修补材料在修补腹外疝方面有其优势。但其与人工合成材料相比是否更具优势,仍需大量临床病例研究加以证实。

耳内镜下异体脱细胞真皮基质黏膜组织补片在鼓膜修补术中的应用

目的:探讨在耳内镜下异体脱细胞真皮基质黏膜组织补片应用于鼓膜修补术的手术效果。方法:选取2015年2月至2017年3月于我院行鼓膜修补术的患者79例,随机分为观察组(40例)和对照组(39例),观察组患者使用异体脱细胞真皮基质黏膜组织补片作为修补材料,对照组使用患者自体颞肌筋膜作为修补材料。观察比较两组患者鼓膜愈合情况、术后言语频率气导听阈改善情况。结果:术后3个月后观察组愈合率(92.5%)与对照组愈合率(89.7%)差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后3个月言语频率平均气导听阈差异无统计学意义(P>0.05)。结论:异体脱细胞真皮基质黏膜组织补片用于中央型穿孔的鼓膜修补术后愈合情况和言语频率平均气导听阈与自体颞肌筋膜修补材料基本一致,可用于鼓膜修补术。

异体脱矿松质骨基质和纳米羟基磷灰石材料应用于牙周组织工程中的可行性探讨

目的进行人牙周膜细胞(PDLCs)三维立体培养的体外实验研究,初步探讨两种支架材料应用于牙周组织工程的可行性,为进一步研究牙周组织生理病理及牙周组织工程奠定实验基础。方法组织块法培养人PDLCs,传代扩增后,接种于脱矿松质骨基质(CBM)和纳米羟基磷灰石材料(nHAC)两种三维支架上,体外继续培养3d,进行细胞计数和扫描电镜观察。结果人PDLCs在两种支架材料上均能形成良好贴附并增殖,扫描电镜可见两种支架材料均具有良好的多孔网状结构,细胞在支架材料上生长旺盛,伸展充分。结论CBM和nHAC均有望成为牙周组织工程的支架材料。

人同种异体真皮脱细胞基质在治疗女性压力性尿失禁中的临床应用

压力性尿失禁不仅影响患者的生活质量，且消耗大量社会资源。本研究采用北京清源伟业有限公司应用组织工程学技术制成的人同种异体真皮脱细胞基质（AMG）替代聚丙烯网带治疗7例压力性尿失禁患者，取得较满意的效果，现报道如下。

同种异体脱细胞真皮基质用于老年人牙槽骨再生修复的临床观察

目的:评价同种异体脱细胞真皮基质(Acellular dermis)促进老年人拔牙后牙槽骨再生修复的临床效果。方法:采用同种脱细胞异体真皮基质充填在老年人因牙根折裂而行截根拔除术后的牙槽窝内。结果:2个月后拔牙窝基本平覆,可以进行联冠修复治疗,采用同种脱细胞异体真皮基质充填后的牙槽窝平覆速度明显快于未充填同种脱细胞异体真皮基质的牙槽窝。结论:采用同种脱细胞异体真皮基质充填可加快老年人拔牙后的牙槽窝的组织修复和愈合。

脱细胞异体真皮基质与人脂肪干细胞的生物相容性

背景:脱细胞异体真皮基质具有优良的生物相容性和组织细胞诱导功能。目的:评价人脂肪干细胞与脱细胞异体真皮基质的生物相容性。方法:取健康成年人吸脂术后的脂肪组织分离脂肪干细胞,并行原代与传代培养,传至第3代,将细胞与脱细胞异体真皮基质联合体外培养3,7d,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架材料上的黏附、生长及增殖情况,并计算细胞在材料上的黏附率;XTT比色法检测细胞的生长增殖情况。结果与结论:脂肪干细胞在支架材料上分布均匀,24h内细胞开始伸展、黏附,二三天完全伸展变形,以梭形为主,呈网状排列;随着培养时间延长,支架上的细胞逐渐增多;人脂肪干细胞细胞与脱细胞异体真皮基质混合培养后平均黏附率为95.03%,并保持正常的生长增殖速度,表明支架对细胞具有良好的黏附性;脱细胞异体真皮基质材料与人脂肪干细胞复合后相容性良好。

NaOH消蚀法制备脱细胞真皮基质修补腹壁疝

背景:与其他疝修补材料相比,脱细胞真皮基质具有易血管化、抗感染、从而可用替代传统补片用于感染腹壁缺损重建等特点。目的:观察NaOH消蚀法制备的脱细胞真皮基质作为修补材料应用于腹疝的应用价值。方法:以全厚猪皮制成脱细胞真皮基质,45只SD雄性大鼠制备腹壁疝模型,随机数字表法分为腹壁疝组:直接缝合皮肤,Marlex网组和脱细胞真皮基质组:分别应用大小为3.5cm×4.0cm的Marlex网和脱细胞真皮基质缝合皮肤;观察修复后1周时有无腹壁疝发生,脱细胞真皮基质组修复后1,2,3,5,10周分别取材,其中每周各组取4只用于苏木精-伊红染色,光镜观察。修复后第5周Marlex网组和脱细胞真皮基质组各取6只用于抗张力试验。结果与结论:术后1周脱细胞真皮基质组与Marlex网组腹壁疝发生率均显著低于腹壁疝组(P<0.001)。脱细胞真皮基质的胶原纤维无明显变化,即有少量成纤维细胞植入,术后2周可见新生血管,术后5周脱细胞真皮基质内部血管密度基本稳定。将单独脱细胞真皮基质片与Marlex网行抗张力试验,Marlex网的抗张力显著高于脱细胞真皮基质(P<0.001)。但植入体内5周后,脱细胞真皮基质筋膜组织的抗张力高于Marlex-筋膜组织(P<0.05)。提示复合消蚀制备的脱细胞真皮基质可以作为良好的疝修补材料。

种植转染VEGF_(165)基因骨髓基质细胞的脱蛋白异体骨在裸鼠体内的成骨

目的:探讨脱蛋白骨支架种植转染血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)165基因的骨髓基质细胞体内的成骨作用。方法:从狗的髂骨穿刺骨髓分离骨髓基质细胞,应用脂质体转染VEGF165基因,以RTPCR检测转染的基因表达。随机选取4周龄BALB/C裸鼠30只,随机分为3组,各组10只。实验组A为脱蛋白骨+转染pcDNA3hVEGF165基因的骨髓基质细胞;实验组B为脱蛋白骨+骨髓基质细胞;对照组C为单纯植入脱蛋白骨+DMEM。在脊柱两侧分开肌间隙,每只裸鼠植入2块脱蛋白骨材料至肌腹内。术后4、8周处死取材,经大体观察、组织形态学与免疫组化方法检查细胞-材料复合物植入后的成骨作用及VEGF表达。结果:组织学检查A、B组均有成骨,并随时间延长而新骨增多,但其中转基因的A组其成骨作用明显,并在植入4周后免疫组化可见VEGF表达呈阳性;对照组C无成骨现象。结论:转染VEGF165基因骨髓基质细胞复合脱蛋白骨在体内具有较好的成骨作用。

本期专题:脱细胞基质材料

1构建缓慢释放碱性成纤维细胞生长因子的脱细胞羊膜人工活性真皮,见2012年8期1425-1429页。2脱细胞异体真皮基质与人脂肪干细胞的生物相容性,见2012年8期1435-1438页。3异体脱细胞真皮基质作为组织工程皮肤真皮支架的可行性,见2012年21期3864-3868页。4脱细胞真皮基质补片修复滇南小耳猪胆管损伤,见2012年12期2141-2144页。

脱细胞骨基质研究进展

因严重创伤及骨肿瘤所致的骨不连、骨缺损严重影响人体生活质量甚至威胁生命，一直是困扰骨科医生的难题。中国每年有数百万人面临骨不连、骨缺损的痛苦。目前常用的治疗方法主要采用自体骨移植、异体骨移植和人工骨移植等修复骨缺损。这些方法各有优缺点，难以满足临床上修复各种骨缺损的需要。也就是说，目前还没有十分理想的骨移植材料。寻找理想的骨支架材料成为骨组织工程研究的焦点。异体或异种骨成为理想的骨支架材料必须解决两个问题：一是如何降低或消除骨的抗原性，二是如何保留其诱导和促进细胞增殖分化的作用。目前消除或减弱骨抗原性的方法有脱脂、脱钙、脱蛋白、深低温冷冻、冷冻干燥、γ射线辐照、煮沸、高温煅烧等，这些方法没有一种能取得令人满意的效果。脱钙、冷冻或冻干不足以消除骨的抗原性；煮沸、煅烧、大剂量射线辐照和化学脱蛋白等方法又破坏了植骨内的生物活性物质。

一种脱细胞真皮基质(ADM)制备方法的实验研究

目的:优化实验条件,建立提取脱细胞真皮基质的可靠方法。方法:选择20例包皮环切术后切除包皮为研究材料,用胰蛋白酶的消化方式、高渗盐水分离皮肤表皮,用去垢剂法和胰蛋白酶去除真皮细胞成分,用组织病理学,抗原性和生物原性观察制备后细胞真皮基质进行鉴定。结果:20例同种异体真皮在组织学、抗原性及生物原性体征方面符合真皮基质的特性。结论:用酶消化法分离皮肤表皮,用酶消化法祛除真皮细胞成分,方法可靠,操作简单,制备脱细胞基质,符合真皮基质的特征,制成的真皮基质真皮基底膜完整,抗原性小,是理想的组织修复材料。

两种细胞洗涤剂制备脱细胞同种生物带瓣管道支架的研究

目的 比较去氧胆酸钠(deoxycholic acid,DOA)和十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulphate,SDS)两种细胞洗涤剂制备脱细胞的同种生物带瓣管道(homograft bioprosthetic tube valved,HBTV)支架的效果,为体外构建组织工程瓣(tissue- engineering heart valve,TEHV)提供同种生物瓣支架材料。 方法 对同种带瓣主动脉管道和带瓣肺动脉管道,分别用含0 .5 % DOA或0 .0 3% SDS的Tris低渗缓冲液共同孵育4 8h,脱去经液氮保存、具有活性的HBTV表面的内皮细胞,固定剂固定后分别进行HE、胶原纤维和弹力纤维染色的光镜观察,以及扫描电镜观察,摄片。 结果 两种洗涤剂均完全地脱去了HBTV表面的内皮细胞,中心部位的成纤维细胞有部分存留;细胞外基质,如胶原纤维和弹力纤维等均较完整地保留下来,其形态结构与脱细胞前无明显改变。 结论 0 .0 3%～0 .1% SDS或0 .5 % DOA的低渗缓冲液对制备HBTV脱内皮细胞支架效果均较佳,有利于HBTV再内皮化时种植细胞的黏附和扩增,可进一步应用于体外构建TEHV的研究。对于脱主动脉壁的细胞,SDS浓度应增至0 .1%为佳。

异体软组织修复材料在口腔颌面部缺损中的应用

目的 探讨异体软组织修复材料 (异体脱细胞真皮基位 )在口腔颌面外科应用的可行性。方法 选择口腔粘膜组织缺损患者 4 6例 ,在创面上采用异体脱细胞真皮基质覆盖 ,并对修复后创面情况和组织病理进行观察。结果 所有口腔粘膜创面愈合良好 ,无 1例出现排斥反应。经 4～ 6月后组织学观察 ,异体脱细胞真皮基质处所生成的组织与正常粘膜组织不易区分。结论 异体脱细胞真皮基质可以作为口腔粘膜缺损的修复材料推广使用。

应用人脱细胞同种异体真皮基质材料修补硬脑膜缺损的随机对照研究

目的探讨人脱细胞同种异体真皮基质材料在硬脑膜缺损修补术中的应用效果.方法采用随机、平行对照临床研究方法,纳入2015年5月至2018年9月复旦大学附属华山医院神经外科(53例)和上海交通大学附属仁济医院神经外科(35例)收治的需行硬脑膜修复术的患者.将88例受试者随机分配至试验组(45例)和对照组(43例).试验组采用人脱细胞异体真皮基质进行修补,对照组采用猪来源生物型硬脑膜补片进行修补.术中术者评价材料的韧性、延展性和可缝合性.术后定期住院或门诊随访患者的负压球引流量及不良事件的发生情况.术后10 d、3个月及6个月复查头颅CT或MRI,观察术区硬膜外积液及皮下积液情况,以判断有无脑脊液漏.比较两组患者的基线资料、术中材料的评估结果以及术后不良事件的发生情况等.结果两组患者的年龄、性别等基线资料的差异均无统计学意义(均P>0.05),具有可比性.两组患者比较,术后24 h负压球引流量的差异无统计学意义(P=0.977).两组受试者术后伤口均为Ⅰ级愈合,均无皮下积液和脑脊液漏.至术后6个月末次影像学随访,两组患者的影像学检查均提示硬脑膜修补局部无异常信号.试验组与对照组一般不良事件发生率[62.2%(28/45)对比48.8%(21/43)]和严重不良事件发生率[6.7%(3/45)对比4.6%(2/43)]的差异均无统计学意义(均P>0.05).两组患者均未发生与人工修补材料相关的不良事件.与对照组比较,术中术者对试验组人工修补材料的韧性、延展性及可缝合性更为满意(均P<0.05).结论人脱细胞同种异体真皮基质材料在硬脑膜缺损修补术中具有较好的韧性、延展性和可缝合性,修补效果与常规硬脑膜补片相似,且不增加术后不良事件的发生.

人同种异体真皮脱细胞基质在尿道重建中的临床应用

目的观察人同种异体真皮脱细胞基质(AMG)在尿道重建中的临床应用,寻求理想的尿道修复材料。方法将组织工程学材料人同种异体真皮AMG作为尿道重建的替代材料,治疗男性尿道患者16例,年龄18～46岁,平均26.5岁,其中13例因骨盆骨折尿道断裂致后尿道狭窄,2例前尿道狭窄,1例尿道下裂。术时将AMG缝合成管状,替代缺损尿道,术中置F18～22尿管作支架,4～6周后拔除尿管。结果16位患者拔除尿管后均恢复排尿,尿道造影显示尿道连续性好,膀胱尿道镜示AMG腔表面已被尿路上皮细胞覆盖,与自体尿道几乎不可分辨。3例随后出现尿道再狭窄,其中2例行尿道扩张术,1例行尿道内切开术。所有患者均未发生排斥反应。随访12～72个月,平均45.6个月,患者可通过尿道正常排尿,4例患者定期行尿道扩张。结论人同种异体真皮AMG作为尿道修复材料,无排斥等不良反应,适合于长段的尿道狭窄或缺损,是较理想的尿道替代材料。

脱细胞细胞外基质组织补片修补腹壁疝二例

例1女，65岁，维吾尔族，巨大难复性白线疝。病史6年，疝块不能回纳半年，时有隐痛。查体：患者矮胖，站立位脐上见一半球状突出的巨大包块，约30cm×25cm×15cm，质软，轻触痛，表面皮肤明显变薄，可触及肠管，平卧手推包块只能部分还纳，未触及腹壁缺损边缘。CT示疝环约10cm×8cm。患者合并慢支、冠心病、房颤、胆石症、脂肪肝。术前相关检查除外手术禁忌，经改善心肺功能治疗2周后，用脱细胞细胞外基质材料（acellular extracellular matrix，AEM）行疝修补术。

脱细胞基质材料生物补片治愈无张力疝修补术后感染一例

目前,无张力疝修补术已经成为腹股沟疝的主要治疗方式[1]。随着材料学的发展,修补材料的组织相容性越来越好[2]。与传统手术比较,伤口感染率差异无统计学意义,然而一旦发生术后感染,处理方法相对于传统手术复杂、棘手[3]。