同种异体软骨移植免疫排斥反应的研究进展

关节炎、颞颌关节疾病及关节机械损伤以及颌面部美容整形的发展，都使得软骨治疗成为倍受关注的对象，由于软骨组织中无血管、神经及淋巴等供应，而软骨细胞又为终末分化细胞，软骨缺损很难自身修复，故治疗以软骨移植为主。软骨移植包括自体、同种异体、异种移植，其中自体软骨移植来源有限、给患者带来二次创伤并增加患者疼痛而致应用受限，异种移植由于强烈的免疫排斥等问题研究还处在基础实验阶段，而同种异体软骨移植来源广泛，生物学性能良好，可望成为较理想的软骨移植物，但其存在的免疫排斥反应影响移植物在体内的长期存活，是目前研究不容忽视的问题。

同种异体骨软骨移植治疗软骨损伤的历史

随着体育运动的快速发展,膝关节局限性关节软骨损伤患者不断增多。由于软骨损伤不能自我修复,临床上对青壮年局限性较大软骨损伤的治疗尤为棘手。同种异体骨软骨移植是治疗青壮年大面积软骨损伤比较满意的治疗方法,美国及欧洲一些国家对同种异体骨软骨移植的研究较多,也取得了较好的临床疗效,但我国对其研究尚未得到重视和发展。鉴于此,本刊开设“同种异体骨软骨移植”专栏,将对同种异体骨软骨移植发展历史和现状、软骨组织的获取和保存及临床应用等内容进行系统介绍,以期推动我国同种异体骨软骨移植的应用与发展。

同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤的手术技术

关节软骨缺乏神经、血管和淋巴,一旦损伤很难自愈^([1-4])。同种异体骨软骨移植(osteochondral allograft transplantation, OCA)用于治疗各种关节疾病,如骨坏死、剥脱性骨软骨炎和创伤后导致的大面积(>2 cm^(2))骨软骨缺损^([5-7])。多项研究报告了OCA术后的疗效,表现为患者疼痛程度显著缓解以及日常活动能力得到恢复^([8-12])。

黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植术后兔软骨细胞凋亡及Bax、caspase-3/9表达的影响

目的 通过观察黄芪-当归对软骨细胞凋亡的干预作用,探讨黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植成活的影响。方法 4月龄新西兰白兔48只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、阳性组、黄芪当归5:1组。除假手术组外,其余组雌雄互为供体与受体,进行膝关节骨软骨交叉移植造模。药物干预8周后取材,进行大体观察、HE染色、番红-O染色、免疫组化染色、qPCR及Western blot检测。结果 与模型组相比,黄芪当归5:1组、阳性组移植修复部位愈合较好,软骨细胞形态趋于正常,分裂增殖明显;蛋白多糖沉积增多,Ⅱ型胶原含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05);qPCR及Western blot结果显示,与模型组相比,其余组Bax、caspase-3、caspase-9 mRNA及蛋白表达量均明显降低(P <0.05)。结论 黄芪-当归可促进新鲜同种异体骨软骨移植成活,其机制可能与促进胶原蛋白的产生、促进软骨细胞增殖与抑制软骨细胞凋亡有关。

同种异体骨软骨移植的新西兰兔动物模型建立与评价

目的建立同种异体骨软骨移植的新西兰兔动物模型,并评估其影像学及组织学特征。方法选取5个月龄新西兰兔共36只,雌雄不限,随机选取12只取右后肢膝关节,经处理后截取部分胫骨平台骨软骨组织做为同种异体骨软骨移植的供体。12只为实验组,在右后肢膝关节胫骨侧截取5 mm×5 mm×5 mm骨软骨缺损区,同种异体骨软骨组织截取等量组织移植固定;12只为对照组,在右后肢膝关节胫骨侧相同位置截取等量骨软骨后原位固定。术后X线评估骨愈合情况,取材后microCT评估骨小梁愈合情况,骨关节切片染色观察组织学变化。结果两组动物均存活良好,无术后并发症;术后4周X线片示骨愈合良好;术后6周膝关节取材后microCT显示截骨处骨性愈合良好;关节切片HE染色显示软骨及软骨下骨结构良好,两组关节厚度无明显差异,番红固绿染色Mankin评分两组差异无统计学意义,阿利新兰染色显示活性软骨细胞计数两组差异无统计学意义。结论新西兰兔膝关节同种异体骨软骨移植动物模型构建简单、操作性强、手术并发症少,可较好地反应同种异体骨软骨移植的病理及生理过程。

环孢霉素A对组织工程软骨同种异体移植的影响

目的研究软骨细胞-聚乙醇酸(polyglycolic acid,PGA)复合体同种异体移植后新软骨形成情况及环孢霉素A治疗对新软骨形成的影响。方法兔关节软骨细胞-PGA三维支架复合培养3wk后作同种异体皮下移植,设环孢霉素A治疗组和对照组,分别于移植术后4wk、8wk和12wk分批取出标本,光镜观察软骨形成情况。结果术后4wk,软骨细胞PGA复合体周围存在炎症细胞浸润。治疗组无结缔组织长入软骨细胞-PGA复合体内现象,对照组中37.5%标本中见结缔组织长入软骨细胞-PGA复合体内。术后8wk,复合体内存在大量软骨细胞同源细胞群,软骨细胞大小、形态较规则,复合体周围已出现软骨膜样结缔组织包膜。治疗组和对照组片状软骨形成率分别为87.5%和37.5%。术后12wk,复合体内软骨细胞大小、形态规则,软骨周围有完整的软骨膜包裹。治疗组和对照组中片状软骨形成率分别为87.5%和37.5%。结论环孢霉素A治疗有利于软骨细胞-PGA复合体同种异体移植后片状新软骨形成。

同种异体软骨细胞移植修复兔膝关节软骨缺损的免疫反应

目的 :探讨同种异体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的免疫学变化。方法 :将兔分成软骨细胞移植组及骨基质明胶移植组 ,用免疫学及组织学方法 ,研究其免疫反应。结果 :软骨细胞移植组术后检到淋巴细胞增殖 ,植入物局部见到淋巴细胞浸润。结论

同种异体骨软骨移植修复关节软骨缺损的实验与应用

目的:关节软骨多处于人体骨骼的重要功能部位,在临床上由于各种原因所导致的关节软骨缺损或变性坏死很常见。目前,使损伤的骨软骨修复至正常骨软骨,许多学者进行了有益的探索。将国内外同种异体骨软骨移植的研究和应用进展,从关节软骨的基础研究、同种异体骨软骨移植的发展概况、取材制备、保存、免疫原性、临床应用等方面做以分析。资料来源:应用计算机检索Medline1980-01/2004-05关于同种异体骨软骨移植的文章,检索词为“Osteochondralallograft”,限定文章语言种类为“English”;同时计算机检索CNKI1994-01/2004-05关于异体骨软骨移植的文章,检索词为“骨软骨,移植,软骨缺损”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①有关骨软骨保存方法的实验研究。②有关同种异体骨软骨移植的基础及临床研究。排除标准:文献中重复研究。未排除非随机、对照、盲法文章。资料提炼:共收集到59篇相关文献,追朔法查找文献12篇,29篇符合纳入标准,排除30篇文献,其中8篇重复研究,22篇为异体骨软骨移植在口腔颌面部整容中的应用。资料综合:29篇文章中6篇通过实验方法进行异体骨软骨保存方法的比较研究。10篇通过动物实验或临床研究,以对照研究方法证实同种异体骨软骨移植修复关节软骨缺损的可行性,与自体骨软骨移植相比较的优越性。13篇通过基础或临床研究,证实软骨自身修复能力有限,异体骨软骨移植后的免疫排斥反映对移植的影响。结论:在探索应用何种材料能更有效地治疗关节软骨缺损的过程中,人们一直把希望寄托在比自体骨软骨更理想的替代材料上,在众多的替代材料中,同种异体骨软骨有其独特的优势和应用价值,尤其对大块及特定形态结构部位缺损的替代作用。随着同种异体骨软骨移植的免疫排斥、软骨保存、软骨退变等问题的进一步解决,必将使关节软骨缺损的治疗学产生革命性的发展。

用组织培养的同种异体软骨进行喉重建的实验研究

目的 观察用组织培养法保存的兔活性甲状软骨进行同种异体喉软骨移植重建的效果。方法 先取大小约 5mm× 2mm× 1mm兔甲状软骨块 ,分别用RPMI - 1640培养液及 4 %甲醛保存 2 0d ,然后将两种方法保存的软骨块同时移植于同一兔甲状软骨板中线两侧缺损处 ,培养软骨置于左侧 ,甲醛保存软骨置于右侧 ,分别于 7d、14d、30d、60d、90d、12 0d、180d、2 0 0d及 30 0d时取标本观察移植重建效果。结果 用组织培养软骨进行喉移植后与受体组织相容性好 ,移植排斥反应小 ,喉重建修复效果明显优于甲醛保存软骨。结论 用组织培养法保存的活性软骨进行同种异体喉软骨移植其排斥反应小 ,喉重建修复效果满意。

深低温骨库建立及同种异体骨与关节移植的临床应用

冷冻保存同种异体骨和骨关节在修补大块骨缺损及关节移植的应用中具有重要意义 .采用深低温冷冻法和辐照灭菌法保存的异体骨 .临床应用异体骨时 ,根据患者的需要和骨库的记录资料合理选择 ,临床应用同种异体骨和骨软骨移植手术 4例 ,未见明显排斥反应 ,疗效满意 .

双侧唇裂前唇双三角瓣和冷冻同种胎软骨移植矫正鼻畸形

目的 利用双侧唇裂修复时前唇贮存于鼻底两个三角瓣 ,和冷冻同种异体胎儿软骨移植 ,二期矫正双侧唇裂术后鼻畸形。方法 用贮存于鼻底两个三角瓣延长鼻小柱 ,双侧鼻翼软骨完全游离 ,同时将冷冻同种异体胎儿软骨修整后移植固定在鼻小柱处。结果 本组共施术 30例 ,切口均一期愈合 ,经 0 5～ 5年随访观察 ,术后效果满意 ,未见移植胎儿软骨发生排斥反应及吸收现象 ,鼻发育也未见影响。结论 利用贮存鼻底双三角瓣延长鼻小柱 ,完全游离双侧鼻翼软骨 ,和冷冻同种异体胎儿软骨移植二期矫正双侧唇裂鼻小柱过短 ,鼻尖及鼻翼低平 ,效果肯定。

组织工程化软骨细胞和骨髓间充质干细胞用于修复同种异体关节软骨缺损

背景:关节软骨几乎没有自身修复的能力,目前临床大多采用自体或异体软骨移植修复、软骨膜或骨膜移植修复、软骨细胞移植修复。由于自体软骨来源有限,异体软骨又存在慢性免疫排斥反应,最终可能导致预后不佳;软骨膜或骨膜移植修复的软骨易于退化,导致修复效果不佳。目的:总结组织工程化软骨细胞、骨髓间充质干细胞及两者共培养对同种异体软骨缺损修复作用的研究现状。方法:应用计算机检索PubMed数据库及中国期刊网全文数据库1994-01/2012-01有关组织工程化软骨细胞和骨髓间充质干细胞用于修复同种异体关节软骨缺损方面的文章,英文检索词为"cartilage defect,allograft,chondrocyte,mesenchymal stem cells,bone marrow mesenchymal stem cells",中文检索词为"软骨缺损,同种异体移植,软骨细胞,骨髓间充质干细胞"。排除重复性及非中英文语种研究,共保留35篇文献进行综述。结果与结论:随着体外细胞培养方法的不断改进,现已能够把软骨细胞从坚韧的软骨中分离出来,并获得大量高纯度的软骨细胞并繁殖出新生软骨细胞。软骨细胞培养增殖能力低,传代培养容易引起老化和去分化;而成体骨髓中骨髓间充质干细胞含量少,随传代次数的增多成软骨潜能明显降低。骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养,两种细胞相互促进增殖和分化,作为种子细胞可减少软骨细胞增殖传代次数并节省软骨细胞数量,与组织工程支架材料复合能有效修复关节软骨缺损。

踝关节牵张术联合同种异体骨软骨移植治疗距骨骨软骨损伤一例

1病例介绍患者男,38岁。因“扭伤致右踝关节疼痛3年余,加重3个月”入院。查体:右踝关节无明显肿胀,踝关节背伸、跖屈活动正常。局部无明显按压痛,抽屉试验(–)。CT、MRI检查示右踝距骨内侧关节面骨软骨损伤,关节面下骨内囊肿形成。诊断:右距骨骨软骨损伤(Hepple-Ⅴ型)。手术采用内踝截骨,暴露距骨内侧穹窿关节面,可见距骨骨软骨损伤,骨内囊肿形成,直径约1 cm;刮勺清除病灶后,采用微骨折技术,用1.0mm克氏针进行深部钻孔;使用软骨柱取出器分别在病灶处及同种异体距骨块上取出直径1cm、长1cm的骨软骨柱,将同种异体骨软骨柱填塞移植于病灶处,使距骨软骨面保持平整;内踝解剖复位,3枚3.0mm空心钉固定。

关节镜辅助下同种异体骨软骨移植修复膝关节剥脱性骨软骨炎

目的评价关节镜辅助下采用同种异体骨软骨移植修复膝关节剥脱性骨软骨炎(osteochondritis dis-secans,OCD)伴大面积骨软骨缺损的可行性和有效性。方法2004年1月-2007年5月,收治13例膝关节股骨髁OCD伴大面积骨软骨缺损患者。男7例,女6例;年龄18～59岁。左膝8例,右膝5例;病程7d～20年,中位病程为42个月。4例有明确膝关节扭伤史。受累部位:股骨内侧髁外侧份5例,股骨内侧髁滑车面2例,股骨外侧髁6例。主动关节活动度为(95.0±13.5)°。Lysholm膝关节功能评分为(62.23±7.79)分。软骨损伤根据国际软骨修复协会分型和关节镜下的Guhl分型,均为Ⅳ型。关节镜下见骨软骨缺损面积为3～7cm2,平均4.32cm2;缺损深度0.8～2.0cm,平均1.55cm。采用同种异体骨软骨块修复缺损,并联合可吸收钉固定骨软骨块。术后指导功能锻炼。结果术后伤口均Ⅰ期愈合。13例均获随访,随访时间1年2个月～4年,平均2.2年。术后3个月2例持续活动1h以上后膝关节疼痛,指导其功能锻炼后缓解。术后6个月2例关节摩擦感明显,关节稳定性尚好,予药物保守治疗。末次随访时主动关节活动度为(137.0±9.8)°,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。X线片检查示术后4～6个月移植骨软骨与受区松质骨融合,关节面平整,关节间隙正常。末次随访EMRI检查示骨软骨愈合,关节面完整;骨软骨移植物无缺损、退行性变。术后1年Lysholm膝关节功能评分为(92.08±7.64)分,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于膝关节股骨髁OCD伴大面积骨软骨缺损,在关节镜辅助下采用同种异体骨软骨移植修复缺损能重建关节面的完整性和恢复关节稳定性,可取得良好的治疗效果。

髌骨软骨损伤的修复治疗

髌骨软骨损伤在临床上较为常见,其治疗手段多样,但目前尚无理想治疗方案。髌骨软骨修复方案如骨髓刺激术、自体骨软骨移植术、同种异体骨软骨移植术及自体软骨细胞移植术等日趋完善,使得临床医生有更多选择来实现髌骨软骨的修复。我们对髌骨软骨损伤的不同修复方式进行综述。

微骨折技术在治疗膝关节软骨缺损中的应用进展

软骨缺损是一种膝关节常见损伤且很难自愈，治疗方法包括微骨折术、自体软骨细胞移植、白体软骨移植、同种异体软骨移植、软骨成形术、关节置换术以及保守治疗等，目前还没有一种治疗的金标准。微骨折技术是一种利用骨面钻孔使得含有间质干细胞的骨髓血渗出从而修复软骨的技术。此技术一出现便很快应用于治疗膝关节软骨缺损。其费用低廉、创伤较小、操作简单、疗效可靠，

网状微钻孔同种异体骨软骨移植治疗膝大面积骨软骨缺损

[目的]介绍网状微钻孔同种异体骨软骨移植治疗膝大面积骨软骨缺损的手术技术和初步临床效果。[方法]镜下检查膝关节大面积骨软骨缺损,行切口显露病灶,清理坏死软骨。将同种异体骨软骨修整成与受区大小形态相同的移植物,嵌压入受区,用埋头钉固定。使用1 mm克氏针对移植物及受区行网状微钻孔处理,孔深至软骨下骨下9 mm左右。[结果]患者顺利完成手术,无严重并发症。随访19个月,末次随访时膝关节HSS评分和关节活动度(ROM)均较术前明显增加,患者对治疗效果满意。术后复查DR及MRI显示骨软骨移植物无降解,膝关节平面软骨平整。[结论]采用此技术可修复膝大面积骨软骨缺损,无不良反应,初步结果良好。