黄芪注射液对小鼠同种皮肤移植存活率的影响

目的探讨黄芪注射液对小鼠同种皮肤移植存活率的影响及对脾细胞糖皮质激素受体（GR）与血清皮质醇的调节作用。方法建立小鼠同种皮肤移植模型,通过腹腔注射给予黄芪注射液和环磷酰胺（CTX）,观察黄芪注射液对同种移植物生存期的影响;采用受体放射配基结合分析和放射免疫分析方法,观察移植后不同时间小鼠脾细胞GR及血清皮质醇的改变以及黄芪注射液和环磷酰胺对其的影响。结果与对照组相比,黄芪组、黄芪＋CTX组及CTX组移植皮片存活时间明显延长,差异有显著性（F=48.58,q=5.11~14.48,P〈0.05）。对照组移植后第14天GR结合位点数明显降低,与未移植组比较,差异有显著性（F=48.44,q=10.95,P〈0.05）;CTX组GR结合位点数进一步降低,与对照组比较,差异有显著性（q=4.22,P〈0.05）;黄芪组GR结合位点数升高至正常水平,与对照组比较,差异有显著性（q=11.79,P〈0.05）,与未移植组比较,差异无显著性（q=0.84,P〉0.05）;黄芪与CTX合用后逆转CTX对GR结合位点数的影响（q=10.72,P〈0.05）。对照组移植后第14天血清皮质醇水平明显升高,与未移植组比较,差异有显著性（F=29.46,q=7.64,P〈0.05）;CTX组血清皮质醇水平降低,与对照组比较,差异有显著性（q=3.46,P〈0.05）;黄芪组、黄芪＋CTX组血清皮质醇水平升高,与对照组比较,差异有显著性（q=4.54、5.22,P〈0.05）。结论黄芪注射液可以明显抑制同种移植排斥反应,提高移植物存活率,其作用机制可能与上调GR数量和血清皮质醇水平,从而使内源性糖皮质激素更好地发挥作用有关。

同种异基因皮肤移植对小鼠抗肿瘤效应的影响

目的:研究同种异基因皮肤移植的排斥反应对小鼠抗肿瘤能力的影响。方法:将BALB/c鼠(H-2~d基因型)分成同种皮肤移植组(C57BL/6鼠为供者,H-2b基因型)、同系皮肤移植组(其他BALB/c鼠为供者)和未移植组,分别皮下接种C57BL/6鼠来源的黑色素瘤细胞(B16,H-2b基因型)或者BALB/c鼠来源的骨髓瘤细胞(SP2/0,H-2~d基因型),观察移植排斥和肿瘤生长情况,检测脾细胞群中的CD3^+、CD8^+T细胞和H-2K^b同种反应性CD8^+T细胞的比例以及肿瘤组织中CD3^+T细胞的浸润程度。结果:B16细胞接种同种皮肤移植组小鼠后瘤体生长缓慢,直至完全消失,而接种同系皮肤移植组小鼠和未移植组小鼠后瘤体生长迅速;SP2/0细胞接种同种皮肤移植组小鼠、同系皮肤移植组小鼠和未移植组小鼠后瘤体均生长迅速,3组之间差异无统计学意义。同种皮肤移植鼠脾细胞群中针对H-2K^b移植抗原的同种反应性CD8^+T细胞比例明显高于同系皮肤移植鼠。结论:同种皮肤移植引起的排斥反应只对拥有同种异基因的肿瘤细胞具有排斥作用,而对与受者基因同源的肿瘤细胞并无明显的交叉免疫反应。

黑鳗藤新苷K对大鼠佐剂性关节炎和同种异体皮肤移植排斥反应的治疗作用

目的:研究黑鳗藤新苷K对大鼠佐剂性关节炎和同种异体皮肤移植排斥反应的治疗作用。方法:采用完全弗氏佐剂(CFA)诱导大鼠佐剂性关节炎(AA)模型观察黑鳗藤新苷K对AA大鼠原发性炎症和继发性病变的治疗作用;采用大鼠同种异体皮肤移植排斥反应模型观察黑鳗藤新苷K对同种异体移植皮片存活时间的延长作用。结果:黑鳗藤新苷K对AA大鼠致炎足肿胀度、侧足肿胀度、尾部结节数及前足红肿程度均有显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01或P<0.001),其作用强度与雷公藤多苷相当;黑鳗藤新苷K能明显延长大鼠同种异体移植皮片的存活天数(P<0.05),减少皮肤移植排斥反应。结论:黑鳗藤新苷K能有效防治大鼠佐剂性关节炎的原发性炎症和继发性病变;对大鼠同种异体皮肤移植排斥反应也有一定的治疗作用。

同种异基因皮肤移植对昆明小鼠荷H22型肝癌细胞生长的影响

目的观察同种异基因皮肤移植对昆明小鼠肝细胞癌生长及相关免疫指标的影响。方法采用荷H22型肝癌昆明小鼠为动物模型并分为3组,在皮下接种小鼠H22肝癌细胞悬液后,接受C57/BL6小鼠皮肤移植物的昆明小鼠为实验组,而接受同种同基因移植和不移植组均作为对照组,比较肿瘤的生长情况;同时检测小鼠外周血淋巴细胞亚群和肿瘤组织内细胞的凋亡细胞,比较各组间差异。结果接受同种异基因皮肤移植的昆明小鼠,肿瘤的生长速度慢于其他2组;接受同种异基因皮肤移植的小鼠瘤组织内凋亡细胞数量高于对照组。结论同种异基因皮肤移植对小鼠H22肝癌细胞的生长具有抑制作用,这种作用可能通过诱导肝癌细胞凋亡而发挥作用。

小鼠异种皮肤移植模型的建立及对免疫抑制药物的药效评价

目的建立小鼠异种皮肤移植模型,以期为免疫抑制药物提供研究模型。方法将C57BL/6小鼠耳部皮肤移植到BALB/c小鼠背部,同时设立同种移植对照(BALB/c小鼠耳部皮肤移植到BALB/c小鼠背部)。选用环孢素A作为抑制异种移植引起的免疫排斥反应的免疫抑制剂,利用该模型评价环孢素A免疫抑制效果。在移植和给药后,对移植排斥评分和移植皮肤的存活率进行统计。移植手术4 d和9 d后,ELISA法对血清中IL-4、IL-12和IFN-γ的水平进行测定。12 d后,计算胸腺和脾脏系数,对脾脏T细胞中CD4^+和CD8^+的比例进行分析,同时将移植皮肤进行病理观察。结果皮肤移植后,排斥评分逐渐增加,移植皮肤的存活率逐渐下降,有明显的水肿、炎症细胞浸润等炎症反应。环孢素A可明显降低移植排斥评分,提高移植皮肤的存活率,使小鼠胸腺和脾脏系数明显降低,高剂量可明显降低脾脏T细胞中CD4^+和CD8^+细胞的比例。同时,环孢素A处理可明显降低移植皮肤的炎症反应。结论小鼠经异种皮肤移植后会出现急性移植排斥反应,环孢素A可有效抑制移植排斥反应,并呈现出明显的剂量依赖性。

不同手术方法对小鼠同种异基因移植皮片存活的比较

目的采用不同手术缝合方式观察小鼠移植皮片存活及生长情况,以建立一种简单易行、快速经济的小鼠同种异基因皮肤移植方法。方法受体BALB/c小鼠随机分为3组(Z组、J组和T组),每组20只,通过背-背法进行供体C57BL/6的皮片移植,Z组、J组和T组分别采用四周缝合、对角缝合和粘贴固定的皮片缝合方法。每天监测小鼠体重变化及生长状态,观察26天,实验第3、7、15和26天观察各组受体移植皮片存活情况,其中皮片变硬、结痂脱落或坏死判定为移植排斥。第26天取小鼠皮肤移植组织以及肝脾组织进行病理检测。结果各组小鼠移植物平均体重变化趋势类似,第6天达到最低水平,移植皮片病理检测结果显示,各组均见移植皮片真皮内淋巴细胞浸润,3组病理结果类似,肝脾病理检测发现淋巴细胞大量浸润,说明造模成功。实验26天后,Z组、J组和T组小鼠皮片分别有7、5和3只受体小鼠皮片仅观察到炎症反应。结论 3种手术方式建模均成功,但采用粘贴固定方式进行小鼠背部皮肤移植具有手术方式简单有效、对皮肤损伤小的优点,是一种较好的小鼠同种异基因皮肤移植手术方法。

异基因脂肪干细胞对皮肤移植免疫调节的影响

目的:探讨异基因ADSCs对大鼠同种异体皮肤移植抗免疫排斥的作用。方法:3-4周Wistar大鼠30只,雌雄不限,体质量150-300g,取新西兰大白兔肾周脂肪行传代培养ADSCs至第四代鉴定、备用;将30只大鼠随机等分三组,A组为自体皮肤移植组,B组为同种异体皮肤移植+PBS局部注射组,C组为同种异体皮肤移植+ADSCs局部注射组;术后3、7、14 d观察皮片成活情况、白细胞计数、巨噬细胞活化率、IL-2、IL-10、IFN-γ表达水平,行统计学分析。结果:A、B、C组大鼠移植皮片坏死时间、血液白细胞计数、巨噬细胞活化率及ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-10含量均表明C组与A、B组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脂肪来源干细胞在体内具有较低的免疫原性,对大鼠同种异体皮片移植有抗免疫排斥的作用。

异基因皮肤移植对小鼠胸腺细胞亚群的影响

目的观察同种异基因小鼠皮肤移植急性排斥对受体小鼠胸腺细胞亚群组成的影响。方法以BALB/c小鼠作为供体,C57BL/6为受体,建立小鼠同种异基因皮肤移植模型,于术后第7天拆线,第10天取胸腺,制备胸腺单细胞悬液,通过流式细胞仪检测胸腺细胞各个亚群的比例。结果与对照组相比,同种异基因皮肤移植小鼠胸腺明显萎缩,胸腺细胞总数明显减少,胸腺细胞亚群细胞数量显著降低,同时,调节性T细胞及胸腺细胞发育和迁出不同阶段细胞绝对数均减少。结论皮肤移植排斥反应明显抑制受体小鼠胸腺及胸腺细胞的发育。该研究结果提示,急性移植排斥反应对中枢免疫器官胸腺中的T细胞发育分化具有重要影响。

雷公藤甲素减轻同种异体植皮排斥反应及其机制探讨

目的 :探讨雷公藤甲素液局部应用对同种异体植皮的影响 ,并研究其影响机制。方法 :雷公藤甲素液浸泡供皮片后行同种异体移植 ,部分皮片行表皮郎克罕氏细胞 (Lc)计数及琥珀酸脱氢酶定性检测后观察皮片开始排斥时间、平均成活时限及组织学切片。结果 :浸泡过药液的供皮片行同种异体移植后其开始排斥时间推迟 ,平均成活时限延长 ,供皮片的Lc发生了质和量的改变。结论 :雷公藤甲素液 3 3μg/mL 37℃ 3h浸泡供皮片后再异体移植可减轻排异反应 ,其机制可能是Lc功能受抑 ,此方法值得临床应用推广。

水凝胶促进骨髓间充质干细胞在同种异体皮肤移植中的免疫调节作用

骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有免疫调节作用，在皮肤移植方面已有一定的应用，但其治疗效果极大地受限于移植细胞的滞留率和存活率。水凝胶（Hydrogel）是种新型生物材料，已被实验证实可以促进干细胞的增殖和分化，我们将应用可注射性水凝胶作为载体输送BMSCs到移植皮肤中，促进移植细胞的定植与存活，从而提高移植皮肤的功能。

黄芪注射液对同种移植小鼠糖皮质激素受体及移植物生存的影响

目的探讨黄芪注射液(AMI)是否通过调节糖皮质激素代谢影响同种移植物生存。方法体内应用AMI后,逐日观察同种移植小鼠移植物生存状况;应用受体放射配基结合分析测定脾细胞糖皮质激素受体(GR)结合位点;利用放射免疫分析检测血清皮质醇水平。结果同种移植早期小鼠脾细胞GR结合位点数和血清皮质醇明显升高,此后逐渐下降,在排斥高峰期(第14天)达到最低值。单用AMI(60 g/kg)或环磷酰胺(CTX,100 mg/kg)及二者联合应用均可显著延长同种移植物的生存时间。AMI单独或与CTX联合应用可以明显上调排斥高峰期受体小鼠脾细胞GR位点数和血清皮质醇水平,AMI可以逆转CTX引起的GR结合位点数的下降(P<0.05)。结论 AMI可明显抑制同种移植排斥反应,与CTX联用可明显提高移植物存活率,其作用机制可能与上调GR结合位点数和血清皮质醇水平,促进内源性糖皮质激素发挥作用有关。

血管化复合同种异体移植的干细胞治疗进展

血管化复合同种异体移植是指来自不同胚层的多种组织构成的复合移植,可显著提高患者术后外形、功能和生活质量。皮肤排斥是血管化复合同种异体移植免疫不耐受的关键,术后需长期使用免疫抑制剂,因此导致多种急性和慢性并发症,是目前血管化复合同种异体移植广泛应用的主要障碍。干细胞的营养和旁分泌作用,抑制炎症反应和免疫抑制调节特性,在血管化复合同种异体移植免疫耐受的相关研究中得到了广泛关注。该文对当前血管化复合同种异体移植的干细胞治疗的研究进展进行综述,为开展相关研究提供参考。

未成熟树突状细胞诱导皮肤移植免疫耐受的研究进展

树突状细胞（dendritic cell，DC）是一类重要的专职抗原呈递细胞，虽然在体内的数量较少，但是其强大的抗原呈递和处理功能在机体的免疫反应中起重要的作用。DC的发育分化过程伴随着其由未成熟的前体细胞向成熟细胞的转变，未成熟的DC（immature dendritic cell，imDC）与成熟DC（mature dendritic cell，mDC）在表型特征以及生物学功能上都有区别，而imDC最大的特点就是在体外可以诱导T淋巴细胞特异性低应答。临床上同种异体皮肤移植是目前大面积深度烧伤患者早期创面覆盖最直接、

不同方法诱导小鼠产生CD8^(+)记忆性T细胞的研究

目的探讨不同方法诱导小鼠产生CD8^(+)记忆性T细胞的效果。方法将100只雌性Bal B/C小鼠作为受体小鼠,并将其中75只小鼠按随机数字表法分为移植组、1×10^(6)注射组、5×10^(6)注射组、1×10^(7)注射组和空白对照组,每组15只。取1只C57小鼠(供体小鼠)的脾脏淋巴细胞,按上述不同个数溶于0.2 ml PBS缓冲液后注射于各注射组小鼠腹腔中;颈椎脱臼处死后,取15块0.25 cm^(2)背部皮肤移植到移植组小鼠背部。处理后1、2、3个月时采用流式细胞术检测上述5组小鼠脾脏CD8^(+)记忆性T细胞百分比和CD3^(+)T细胞总数。剩余25只小鼠(每组5只)按上述方法分组和处理,然后纯化分选CD8^(+)记忆性T细胞,与经过辐照后的C57小鼠脾脏淋巴细胞进行共培养,1周后用流式细胞仪检测CD8^(+)记忆性T细胞增殖指数。结果前5组小鼠在处理后1个月时产生的CD8^(+)记忆性T细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05),但在2、3个月时3个注射组高于空白对照组和移植组(均P<0.05),3个月时更明显(均P<0.05)。其中1×10^(6)注射组在2个月时CD8^(+)记忆性T细胞比例最高;在CD3^(+)T细胞总数方面,移植组及3个注射组组内比较均在2个月时最高,差异均有统计学意义(均P<0.05),但组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组CD8^(+)记忆性T细胞的增殖指数差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过体内注射脾脏淋巴细胞来诱导CD8^(+)记忆性T细胞是更高效的方法。

异种脱细胞真皮基质的研究进展及其在口腔黏膜缺损中的应用

一、背景技术 脱细胞真皮基质的研究经历了漫长的过程，1985年Heck等报道应用异体真皮作为自体表皮的移植载体，将二者复合移植于动物模型和烧伤患者的切痂创面，取得了较好的创面修复和抑制瘢痕增生的效果。但此后的应用和研究发现，同种异体皮肤移植所引发的免疫排斥反应主要源于表皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞等细胞，由此推动真皮的无细胞化研究。

脱细胞真皮基质材料的研究及应用

脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix,ADM）的研究经历了漫长的过程,1985年Heck等报道应用异体真皮作为自体表皮的移植载体,将二者复合移植于动物模型和烧伤患者的切痂创面,取得了较好的创面修复和抑制瘢痕增生的效果。但此后的应用和研究发现,同种异体皮肤移植所引发的免疫排斥反应主要源于表皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞等，

CD4小分子拮抗剂的筛选及功能测定

目的筛选靶向CD4 D1功能表位的小分子化合物，并对其介导的免疫抑制功能进行初步评价。方法分别利用MqT以及^3H-TdR掺人法，检测小分子化合物对混合淋巴细胞反应（MLR）的抑制作用，筛选出具有一定剂量依赖抑制效应的小分子化合物；并进一步通过C57BL／6→BALB／c小鼠同种异体皮肤移植模型，对筛选出的小分子化合物的抗移植排斥作用进行初步评价。结果在筛选的19个小分子化合物中，J2呈现出良好的剂量依赖性地抑制T淋巴细胞增殖的作用。进一步抗小鼠皮肤移植排斥反应实验发现，J2能够有效延长皮肤植片的存活时间。结论小分子化合物J2具有良好的免疫抑制作用。