YAP抑制剂Verteporfin对食管癌细胞存活和同质黏附能力的影响

为探讨Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)抑制剂Verteporfin(VP)对食管癌细胞存活和同质黏附(即细胞间黏附)能力的影响,采用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测了不同浓度的VP对食管癌细胞KYSE150和KYSE30存活率的影响。利用细胞聚集实验、细胞分离实验检测了VP处理后对KYSE150和KYSE30细胞同质黏附能力的影响。MTT比色法实验结果显示,VP对食管癌细胞生存有抑制作用,且抑制作用随药物浓度增大而增强;细胞聚集实验和细胞分离实验结果显示,与未经药物处理的细胞相比,VP处理后的细胞聚集的团块数量较少、体积较大、细胞的分离程度小,且浓度越大越显著。以上结果提示,细胞同质黏附能力显著增强,且呈浓度依赖性。VP能抑制食管癌细胞存活,增强食管癌细胞同质黏附能力,为VP可能成为治疗食管癌的新型药物奠定了理论基础。

抑制赖氨酰氧化酶可抑制胃癌细胞体外迁移和异质黏附

目的用不同浓度的β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,BAPN)抑制赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)后,观察两株胃癌细胞MGC-803和BGC-823的迁移、黏附能力变化,以探讨LOX对胃癌发生发展的影响。方法分别培养两株胃癌细胞MGC-803和BGC-823,用Real-Time PCR法检测两株胃癌细胞中LOX的m RNA;在用BAPN抑制LOX后,通过体外划痕实验和Transwell小室迁徙实验比较两株胃癌细胞的迁徙能力的变化,以同质黏附实验和异质黏附实验比较其黏附能力的变化。结果两株胃癌细胞中均有LOX的表达;加入0.2和0.3m M BAPN均可抑制胃癌细胞MGC-803和BGC-823的体外迁移能力,增强其同质黏附能力,减弱其异质黏附能力。结论 LOX可能通过增强胃癌细胞的迁移能力,减弱同质黏附、增强异质黏附能力来促进胃癌的转移。

甘氨双唑钠对Tca-8113细胞体外放射增敏及黏附作用的影响

背景与目的:舌鳞状细胞癌是口腔癌中发病率较高的一种,治疗方法以手术加放疗为主。然而放疗常因射线对正常组织损伤或肿瘤对射线的抵抗而受到影响。因此,选择良好的放射增敏剂已成为优化舌癌治疗的新途径。本研究旨在探讨甘氨双唑钠(glycididazole sodium for injection,CMNa)联合射线对舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞放射增敏及黏附的影响。方法:取对数生长期的Tca-8113细胞作为研究对象,MTT比色实验检测CMNa对Tca-8113细胞增殖的影响。克隆形成实验检测CMNa联合不同放射剂量对Tca-8113细胞克隆形成能力的影响,用多靶单击模型拟合细胞生存曲线,得出放射生物学敏感参数Do(平均致死剂量)、Dq(准阈剂量),并计算放射增敏比。流式细胞术FITC和PI双染比较不同放射剂量与CMNa联合不同放射剂量射线处理后细胞凋亡的变化。同质黏附实验检测CMNa联合放射处理前后细胞黏附能力的改变。结果:Tca-8113细胞的存活率随CMNa作用浓度及作用时间的延长而降低。克隆形成实验中求得单纯放射组的Do值为2.50,CMNa联合放射线处理的Do值为1.48,放射增敏比为1.68。流式细胞术检测CMNa联合不同放射剂量(2、4和6 Gy)的细胞凋亡率(49.6%、63.1%和78.8%)均显著高于单纯放射组(30.0%、53.9%和61.2%,P<0.01)。同质黏附实验在振荡20 min时,单纯放射组及CMNa+放射组与对照组相比,黏附细胞数显著增高(P<0.01);但单纯放射组与CMNa+放射组相比黏附细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。在振荡40和60 min时,单纯放射组及CMNa+放射组与对照组相比,黏附细胞数显著增高(P<0.01);且CMNa+放射组与单纯放射组相比,黏附细胞数差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CMNa对Tca-8113细胞有明显的放射增敏作用,其机制可能与促进细胞凋亡有关,并可能改变Tca-8113细胞的同质黏附能力。

Aurora激酶抑制剂VX-680对食管癌细胞间黏附能力的影响

目的探讨Aurora激酶抑制剂VX-680对食管癌KYSE150及EC9706细胞间黏附能力的影响。方法培养KYSE150及EC9706细胞至密度为50%时,选取不同浓度VX-680分别作用KYSE150(0. 5和1. 0μmol/L VX-680)和EC9706(0. 1和0. 2μmol/L VX-680)细胞48 h(实验组),未经VX-680处理的细胞为空白对照。采用细胞聚集及细胞分离试验分别检测两种细胞的黏附能力;采用Western blot法检测两种细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果细胞聚集及细胞分离试验结果显示,随VX-680浓度的增加,0. 5、1. 0、0. 1、0. 2μmol/L VX-680实验组团块均减少,体积变大致密,与空白对照组比较,各实验组团块数量差异均有统计学意义(P <0. 01);与空白对照组比较,各实验组的NTC/NTE值均显著降低,差异均有统计学意义(P <0. 01)。Western blot结果显示,与空白对照组比较,各实验组E-cadherin蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(P <0. 01)。结论 VX-680能增强食管癌细胞间的同质黏附能力,抑制食管癌细胞的恶性表型,为VX-680可能作为治疗食管癌的靶向药物提供了依据。

尼美舒利抑制结肠癌侵袭和转移的作用机制研究

目的观察选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对结肠癌细胞Caco-2同质性黏附能力,E-钙黏蛋白和CD44v6表达的影响。探讨其在抑制肿瘤侵袭和转移中的作用机制。方法培养结肠癌细胞细胞株Caco-2,用不同浓度的尼美舒利进行干预,观察细胞同质性黏附能力的变化。用Westernblot检测E-钙黏蛋白表达的变化,用免疫细胞化学法检测CD44v6的变化。结果尼美舒利能增加Caco-2细胞的同质性黏附能力,增加E-钙黏蛋的表达,并呈剂量依赖性。结论尼美舒利可以通过增强结肠癌细胞的同质性黏附能力,增加E-钙黏蛋白的表达,减少CD44v6的表达来抑制肿瘤细胞的侵袭和转移。