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不同温度对花背蟾蜍后期胚胎发育的影响 被引量:1
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作者 冯照军 李未 +3 位作者 葛广阔 许晶晶 许峰 柏栋荫 《徐州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第2期54-56,共3页
该文探讨了不同温度对花背蟾蜍后期胚胎发育的影响.实验结果表明,在14~32℃范围内,均有一定比例的胚胎正常生长,但在20~26℃范围内,胚胎发育的成功率较高;室温下(12~20℃)胚胎发育成功率更高.11℃和35℃分别是胚胎停止发育和致死的... 该文探讨了不同温度对花背蟾蜍后期胚胎发育的影响.实验结果表明,在14~32℃范围内,均有一定比例的胚胎正常生长,但在20~26℃范围内,胚胎发育的成功率较高;室温下(12~20℃)胚胎发育成功率更高.11℃和35℃分别是胚胎停止发育和致死的温度限. 展开更多
关键词 花背蟾蜍 后期胚胎发育 温度 畸形率 死亡率
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植物胚胎发育后期富集(LEA)蛋白的研究进展 被引量:15
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作者 汤学军 傅家瑞 《植物学通报》 CSCD 1997年第1期13-18,共6页
植物胚胎发育后期富集(LEA)蛋白的研究进展汤学军傅家瑞(中山大学生命科学学院,广州510275)PROGRESSOFTHESTUDYONLATEEMBRYOGENESISABUNDANT(LEA)PROTEINS... 植物胚胎发育后期富集(LEA)蛋白的研究进展汤学军傅家瑞(中山大学生命科学学院,广州510275)PROGRESSOFTHESTUDYONLATEEMBRYOGENESISABUNDANT(LEA)PROTEINSINPLANTSTangXue-J... 展开更多
关键词 植物 胚胎发育后期 富集蛋白
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水稻OsLEA19a基因在大肠杆菌中的表达和抗逆性分析 被引量:4
3
作者 胡廷章 杨俊年 +1 位作者 吴应梅 陈再刚 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期1-4,共4页
根据胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA19a的读码框序列设计引物,PCR扩增目的基因后,利用基因重组技术成功构建原核表达载体pET30a-OsLEA19a,并将重组质粒转化到E.coli BL21中。优化诱导OsLEA19a表达的条件,使目的蛋白可在E.coli BL21中高... 根据胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA19a的读码框序列设计引物,PCR扩增目的基因后,利用基因重组技术成功构建原核表达载体pET30a-OsLEA19a,并将重组质粒转化到E.coli BL21中。优化诱导OsLEA19a表达的条件,使目的蛋白可在E.coli BL21中高效表达。OsLEA19a融合蛋白的SDS-PAGE电泳分析表明,诱导蛋白表达的最适条件是37℃、4 h,融合蛋白的大小大约为30 kDa。抗逆性分析表明,OsLEA19a的表达能增强大肠杆菌对高盐、高渗透压、高温和低温等非生物胁迫的抗性。 展开更多
关键词 胚胎发育后期丰富蛋白 OsLEA19a 蛋白表达 大肠杆菌 抗逆性
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水稻OsLEA5c基因的克隆、表达和抗逆性分析 被引量:3
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作者 胡廷章 杨俊年 +2 位作者 周大祥 黄小云 陈再刚 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第9期18-23,共6页
为了研究水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA5c 的抗逆性,利用 RT PCR技术从水稻中克隆到OsLEA5c的 cDNA。序列分析表明,OsLEA5c基因的读码框为456 bp,编码1个由151个氨基酸残基组成的蛋白。蛋白分子量为16.55 kD,等电点为5.07。OsL... 为了研究水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA5c 的抗逆性,利用 RT PCR技术从水稻中克隆到OsLEA5c的 cDNA。序列分析表明,OsLEA5c基因的读码框为456 bp,编码1个由151个氨基酸残基组成的蛋白。蛋白分子量为16.55 kD,等电点为5.07。OsLEA5c蛋白的平均亲水系数(GRAVY)为0.020,为疏水蛋白。OsLEA5c蛋白的44-140位氨基酸残基形成 LEA_2结构域。进化树分析表明,OsLEA5 c属于第5组LEA蛋白的C亚组。OsLEA5 c与5 C亚组LEA蛋白的氨基酸一致性为45.14%~61.59%。利用基因重组技术构建的原核表达载体 pET32a Os-LEA5c,转化到E.coli BL21 pLysS菌株中,诱导得到34 kD的融合蛋白。OsLEA5c在大肠杆菌中的表达增加了大肠杆菌对高温、高盐、高渗透压和反复冻融的抗性。OsLEA5c 基因在水稻抗逆和种子成熟脱水过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 水稻 胚胎发育后期丰富蛋白 OsLEA5c基因 表达 抗逆性 ORYZA SATIVA L.
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OsLEA2基因在原核生物中的异源表达和抗性分析 被引量:2
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作者 胡廷章 钟彦 +2 位作者 陈林 杨俊年 黄小云 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期2281-2284,共4页
为了研究胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA2的功能,利用PCR方法扩增目的基因,采用基因重组、蛋白质表达和抗逆性分析对OsLEA2基因进行研究。结果表明,构建的原核表达载体pET32a-OsLEA2,转化到E.coli BL21中,得到表达OsLEA2融合蛋白的工程... 为了研究胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA2的功能,利用PCR方法扩增目的基因,采用基因重组、蛋白质表达和抗逆性分析对OsLEA2基因进行研究。结果表明,构建的原核表达载体pET32a-OsLEA2,转化到E.coli BL21中,得到表达OsLEA2融合蛋白的工程菌;SDA-PAGE分析表明融合蛋白的分子量约为29.4 kDa。OsLEA2的表达增强了大肠杆菌对高盐、高温、低温和紫外照射等非生物胁迫的抗性。该研究为进一步改良作物品种、提高农作物的抗逆性奠定基础。 展开更多
关键词 胚胎发育后期丰富蛋白 OsLEA2 异源表达 大肠杆菌 抗逆性
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OsLEA2对乳酸脱氢酶的保护分析
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作者 胡廷章 黄小云 +1 位作者 杨俊年 陈再刚 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期2327-2330,共4页
在大肠杆菌DL21中表达胚胎发育后期丰富蛋白基因Os LEA2,用Hi TrapTMchelating HP层析柱纯化得到了Os LEA2蛋白。研究表明,高温会使乳酸脱氢酶的活性降低,高温处理时间的延长会增加对乳酸脱氢酶的损害;干燥脱水5 h后,乳酸脱氢酶活性几... 在大肠杆菌DL21中表达胚胎发育后期丰富蛋白基因Os LEA2,用Hi TrapTMchelating HP层析柱纯化得到了Os LEA2蛋白。研究表明,高温会使乳酸脱氢酶的活性降低,高温处理时间的延长会增加对乳酸脱氢酶的损害;干燥脱水5 h后,乳酸脱氢酶活性几乎全部失活,其活性仅仅是未处理的3.06%;反复冻融也会降低乳酸脱氢酶的活性。在高温、脱水和冻融胁迫下,Os LEA2的加入能保护乳酸脱氢酶;随着Os LEA2的增加,乳酸脱氢酶的活性增加。因此,Os LEA2蛋白对乳酸脱氢酶具有保护作用,能减少高温、脱水和冻融对乳酸脱氢酶的损伤。 展开更多
关键词 胚胎发育后期丰富蛋白 OS LEA2 乳酸脱氢酶 保护效应
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OsLEA5c在大肠杆菌中的表达、纯化及对蛋白质的保护效应研究
7
作者 胡廷章 陈再刚 +1 位作者 秦娟 黄小云 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第12期11-14,共4页
为了研究OsLEA5c蛋白对其他蛋白的保护效应,在大肠杆菌DL21中异源表达OsLEA5c蛋白,采用HiTrap^(TM) chelating HP层析柱纯化OsLEA5c蛋白。纯化的OsLEA5c蛋白用于高温、脱水和冻融胁迫下对乳酸脱氢酶的保护效应研究。结果表明,在PBS缓冲... 为了研究OsLEA5c蛋白对其他蛋白的保护效应,在大肠杆菌DL21中异源表达OsLEA5c蛋白,采用HiTrap^(TM) chelating HP层析柱纯化OsLEA5c蛋白。纯化的OsLEA5c蛋白用于高温、脱水和冻融胁迫下对乳酸脱氢酶的保护效应研究。结果表明,在PBS缓冲体系中,50℃处理10、20、30 min后,乳酸脱氢酶的活性分别残留43.20%、24.53%、17.55%;而按1∶1的质量比加入纯化的OsLEA5c蛋白后,乳酸脱氢酶活性分别保留85.77%、74.24%、65.27%。干燥脱水5 h后,乳酸脱氢酶活性仅保留2.55%~4.19%;按2∶1、5∶1和10∶1的质量比加入OsLEA5c蛋白,乳酸脱氢酶活性分别保留17.59%、24.73%、36.39%。反复冻融5次,乳酸脱氢酶活性残留9.41%~12.14%;而按2∶1、5∶1和10∶1的质量比加入纯化的OsLEA5c蛋白,乳酸脱氢酶活性分别保留28.09%、69.44%、95.16%。表明OsLEA5c蛋白对其他蛋白质具有保护作用,能减少高温、脱水和冻融胁迫对蛋白质的损伤。 展开更多
关键词 胚胎发育后期丰富蛋白 OsLEA5c蛋白 乳酸脱氢酶 蛋白质活性
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药用野生稻OoLEA1基因的克隆和生物信息学分析 被引量:4
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作者 张大燕 李红梅 +3 位作者 李培纲 张帅 陈志雄 李亚娟 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1597-1602,共6页
药用野生稻积累了丰富的遗传多样性和有利基因,是水稻遗传改良的重要基础资源。LEA蛋白在植物抗逆反应起着重要的作用。本研究在药用野生稻干旱胁迫差异转录谱数据分析基础上,利用RT-PCR方法从药用野生稻克隆了OoLEA1基因,OoLEA1的开放... 药用野生稻积累了丰富的遗传多样性和有利基因,是水稻遗传改良的重要基础资源。LEA蛋白在植物抗逆反应起着重要的作用。本研究在药用野生稻干旱胁迫差异转录谱数据分析基础上,利用RT-PCR方法从药用野生稻克隆了OoLEA1基因,OoLEA1的开放阅读框长度为603 bp,编码一个由200个氨基酸残基组成的蛋白,分子量为20.73 k D,理论等电点为6.61。OoLEA1蛋白含有4个LEA_4结构域、8个α-螺旋构象和1个β-片层构象,该蛋白为亲水蛋白。OoLEA1受干旱和高温诱导表达,说明OoLEA1可能在水稻抗旱和抗高盐胁迫中发挥作用。 展开更多
关键词 水稻 药用野生稻 胚胎发育后期丰富蛋白 非生物胁迫
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