老年人后颅窝极性成胶质细胞瘤1例报告

患者,女,67岁.主因四肢发僵,舌根麻木,走路不稳一年,加重一个月,于2003年8月27日入院.无头痛、恶心及其它不适.入院查体:言语不利,双眼外展轻度受限,眼底检查无明显异常表现,右侧鼻唇沟变浅,鼓腮不佳,站姿正常,右侧肢体肌张力和共济、轮替、指鼻实验均较左侧差,其余神经系统检查无阳性发现.头颅CT可见:右小脑半球等密度病变,增强CT病变可均匀中等增强.MRI显示:右小脑半球幕下占位约1.0 cm×2.0 cm,中等T1、T2信号.信号较均匀,边界完整清晰,未见明显的占位效应.

成胶质细胞瘤U87干细胞样细胞的培养及其代谢表型与成瘤能力鉴定

目的培养成胶质细胞瘤U87干细胞样细胞(U87 SLCs),检测其干性标志物的水平、线粒体呼吸能力和体内成瘤能力。方法DMEM/F-12中添加B-27以及生长因子EGF和bFGF作为无血清干细胞培养基培养U87 SLCs;悬浮培养U87 SLCs使用神经球培养法,贴壁培养U87 SLCs通过在培养表面包被Matrigel基质胶实现;通过RT-qPCR和Western blot检测培养物的干性标志物mRNA和蛋白质水平;通过流式细胞测量术检测培养物中CD133+细胞的比例;通过Seahorse实时细胞代谢分析检测细胞耗氧速率的变化;通过接种动物皮下移植瘤验证细胞成瘤能力的改变。结果干细胞培养基中的U87 SLCs在1周内即会成长为典型的细胞球形态,细胞球在培养过程中会不断增大;在贴壁剂合适的浓度下,U87 SLCs可以在干细胞培养基中完好地平铺贴壁增殖;CD133、nestin、OLIG2、CD44、CD15、整合素α6(ITGA6)等干性标志物的mRNA表达水平在两种方式培养后与U87相比均显著提升(P<0.05),CD133和nestin的蛋白水平在两种方式培养后也均升高(P<0.05);U87 SLCs展现出了更高的线粒体储备呼吸能力(P<0.05);U87 SLCs能够以更少的接种细胞数形成更大的皮下肿瘤(P<0.05),U87 SLCs体内增殖更加迅速,具有更强的成瘤能力。结论U87 SLCs具有典型的干性特征,是一个良好的干性更高的肿瘤细胞模型。

极性成胶质细胞瘤的CT表现（附15例分析）

目的：极性成胶质细胞瘤少见，术前定性诊断困难，报道１５例旨在提高对该病的认识。材料与方法：回顾性分析１５例经手术病理证实的极性成胶质细胞瘤的ＣＴ表现。结果：幕上１２例，幕下３例；平扫１５例中１４例表现为低密度区或多房状低密度区，边界不清，有明显灶周水肿及占位效应；１例呈边界清楚的囊状低密度区。增强后有不同程度强化，其中环状强化６例，环壁厚薄不均，形态不规则；结节状强化４例，表现圆形或类圆形结节，密度均匀或不均匀；混合型强化４例。结论：极性成胶质细胞瘤ＣＴ表现多样，术前定性诊断困难，须与血管母细胞瘤、脑脓肿、髓母细胞瘤和室管膜瘤、星形细胞瘤鉴别。

LRRC4基因表达能降低胶质母细胞瘤细胞系U251的生长和成瘤潜能(英文)

背景与目的:LRRC4是作者最近克隆的一个新基因,该基因在原发性脑肿瘤活检标本中明显表达下调。本研究旨在研究LRRC4基因是否具有抑制脑肿瘤生长的能力。方法:LRRC4基因的全长编码区被亚克隆至表达载体pcDNA3.1中,应用脂质体转染的方法将重组的质粒载体导入胶质母细胞瘤细胞系U251,经G418筛选,建立稳定表达LRRC4基因的U251的细胞系。采用细胞增殖实验、软琼脂实验、肿瘤形成实验来考察LRRC4基因表达对于细胞生长和肿瘤形成的影响。结果:经过脂质体转染和筛选,建立了稳定表达LRRC4全长编码区的U251细胞系,用于进一步实验。比较未转染组和转染空白载体组,Northernblot实验证实转染了LRRC4基因的细胞LRRC4mRNA的表达增强。细胞增殖一定时间后,转染LRRC4基因的细胞较未转染细胞的生长速度明显减慢,克隆形成率明显降低。将这些细胞注射入无胸腺裸鼠体内,40天后处死裸鼠,测量肿瘤大小,结果显示转染LRRC4基因的细胞形成的肿瘤明显小于对照组。结论LRRC4基因可转染于人脑胶质母细胞瘤细胞系U251。LRRC4在U251细胞的表达有抑制瘤细胞增殖和抑制裸鼠移植瘤的形成和生长的作用。

碱性成纤维细胞生长因子小分子干扰RNA对胶质瘤细胞株U251增殖与凋亡的影响

背景与目的:碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGFs)家族中的重要一员,bFGF是多功能细胞因子,参与创伤愈合、组织修复、未成熟神经细胞的增殖和分化过程。本课题组前期对bFGF在胶质瘤中的表达做过研究,证实bFGF在胶质瘤细胞中过表达,并刺激胶质瘤细胞的增殖和新生血管生成。本研究检测bFGF小分子干扰RNA对胶质瘤细胞的增殖和凋亡的影响。方法:用化学法合成四条针对bFGF的siRNA和一条阴性对照siRNA,并用脂质体法转染胶质瘤细胞系U251;以Opti-MEMI无血清培养基培养的U251细胞作为正常对照。通过RT-PCR和免疫组化的方法检测bFGF的表达,并用流式细胞术、MTT法检测转染后U251细胞的凋亡和增殖活性的变化。结果:转染48h后,正常对照、阴性对照、siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3和siRNA-4组U251细胞中的bFGFmRNA水平分别为0.95±0.02、0.95±0.02、0.85±0.02、0.76±0.04、0.65±0.04和0.56±0.03;转染72h后,分别为0.95±0.04、0.89±0.05、0.81±0.05、0.80±0.05、0.77±0.04和0.53±0.05。四条bFGFsiRNA中,siRNA-4作用最显著。转染48h后,siRNA-4和阴性对照组细胞增殖抑制率分别为(66.4±1.2)%和(56.3±1.4)%;转染72h后,分别为(40.0±2.6)%和(14.7±0.6)%,siRNA-4与阴性对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:理想的bFGF小分子干扰RNA能够抑制该基因的表达并抑制胶质瘤细胞的增殖活性。

靶向成纤维细胞生长因子受体抑制胶质瘤中血管生成拟态的生成

目的:探索成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂BGJ398对胶质瘤细胞形成血管生成拟态(VM)的影响。方法:运用Western blot检测BGJ398处理后人胶质瘤细胞株U87MG和U251MG中磷酸化成纤维细胞生长因子受体(p FGFR)的数量,以及基质金属蛋白酶2和14(MMP2和MMP14)的表达量;在体外应用小管形成实验观察U87MG细胞形成小管的能力;用CD34/PAS免疫组化双染法计数皮下胶质瘤模型中VM的数量;用免疫组织化学染色检测皮下移植瘤中MMP2和MMP14的表达量。结果:Western blot显示BGJ398实验组中p FGFR的数量较对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot与免疫组化染色结果显示实验组MMP2和MMP14的表达明显下调;小管形成实验中实验组中胶质瘤细胞小管周长和交点数较对照组明显减少;皮下瘤模型中实验组中VM的数量(13.85±3.96)较对照组(26.40±5.06)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体内外实验证实BGJ398通过抑制FGFR的激活可以抑制胶质瘤细胞形成VM,提示FGFR信号通路具有调节VM形成的作用。

碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达与胶质瘤恶性程度的关系

目的 探讨胶质瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)及其受体 (FGFR)表达与恶性程度的关系。方法 采用免疫组织化学和图像分析技术观测 6 1例人脑星形细胞肿瘤中bFGF和FGFR的表达规律 ,并定量检测Ⅷ因子相关抗原 (FⅧRAg)以反映内皮细胞数量和微血管密度。结果 ①FⅧRAg阳性细胞总面积和积分光密度随级别增高而显著增大 ;②bFGF反应强度与FⅧRAg表达呈正相关 ;bFGF阳性反应强度对患者生存率曲线有明显影响 ;③各级别肿瘤FGFR阳性反应强度差异无显著性 ;FGFR表达水平对患者生存率影响无显著性。

siRNA靶向沉默成纤维细胞激活蛋白α对胶质瘤细胞U87增殖的影响

目的 :探讨小分子干扰RNA(siRNA)靶向沉默成纤维细胞激活蛋白α(FAP-α)表达对神经胶质瘤细胞株U87增殖的影响。方法:实验分为空白对照组(Blank组)、阴性对照组(NC组)和siRNA组,通过脂质体将siRNA转染至胶质瘤细胞株U87,使用Western blot法检测FAP-α基因的蛋白水平,同时检测NC组和siRNA组Bcl-2、caspase-3的表达变化,使用Real-time PCR法检测FAP-α和增殖核抗原(PCNA)的mRNA水平,CCK-8法评价转染后NC组和siRNA组细胞的增殖能力。结果:①转染48 h后,siRNA组细胞FAP-αmRNA、蛋白的表达明显低于NC组和Blank组,差异有统计学意义(P<0.01),siRNA组较NC组caspase-3蛋白表达增加(P<0.05);Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01),siRNA组较NC组PCNA mRNA表达明显下降(P<0.01)。②转染后48、72和96 h siRNA组U87细胞吸光度值低于NC组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:应用siRNA沉默FAP-α基因的表达,可以抑制胶质瘤细胞U87的增殖,诱导胶质瘤细胞的凋亡。

一种胶质瘤相关的酸性成纤维细胞生长因子mRNA同源物

目的 克隆胶质瘤相关基因 .方法 取胶质瘤患者新鲜肿瘤标本及肿瘤附近正常脑组织提取 m RNA,反转录成c DNA.采用基于 PCR的消减杂交法获得差异的 c DNA,并经多聚酶链反应扩增后克隆入 T载体测序 .用打点杂交法验证差异克隆 .结果 获得一胶质瘤相关的酸性成纤维生长因子基因同源物 .结论 该酸性成纤维生长因子基因同源物是酸性成纤维生长因子 m RNA的不同拼接产物 ,可能参与胶质瘤的形成 .

治疗顽固性多形性成胶质细胞瘤的新药——替莫唑胺

替莫唑胺(ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ,商品名Ｔｅｍｏｄａｒ)用于治疗成人顽固性多形性成胶质细胞瘤,于1999年8月11日通过ＦＤＡ批准,在美国上市。其化学名为3,4二氢3甲基4氧代咪唑并[5,1ｄ]1,2,3,5四嗪8酰胺。原料药为白色或浅棕色/淡粉色粉末,相对分子质量为194.15。ｐＨ...

成纤维细胞激活蛋白α在神经胶质瘤中的表达及临床意义

目的:探讨成纤维细胞激活蛋白α(FAP-α)在神经胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法:应用免疫组织化学法检测33例神经胶质瘤和7例正常对照脑组织中FAP-α蛋白的表达,并结合临床病理资料进行分析。同时对所有病例进行随访,分析FAP-α表达与患者预后的关系。进一步检索脑肿瘤分子数据库(Rembrandt)探讨FAP m RNA表达与预后的关系。结果:低级别胶质瘤和高级别胶质瘤之间FAP-α蛋白的积分光密度值(IOD)差异有统计学意义(P<0.01),且与胶质瘤病理分级存在正相关(r=0.673,P<0.01)。7例正常脑组织FAP-α蛋白不表达或表达弱阳性,与低级别胶质瘤(P<0.05)和高级别胶质瘤(P<0.01)比较差异有统计学意义。FAP-α蛋白的表达强度与患者性别、肿瘤大小、年龄以及手术切除程度无明显相关性(P>0.05)。生存分析显示FAP-α低表达组和高表达组生存率差异有统计学意义(P<0.01),FAP-α的表达是影响胶质瘤患者预后的独立因素(P<0.05)。检索脑肿瘤分子数据库,发现FAP m RNA低表达预后明显好于高表达(P<0.01)。结论:FAP-α在神经胶质瘤中存在表达,且与神经胶质瘤的病理分级正相关,其高表达可能提示不良预后。

成胶质细胞瘤与PTEN基因及NCAM的关系

目的 :研究成胶质细胞瘤中PTEN基因突变及NCAM(神经细胞粘附分子 )的表达 ,并探讨与两者之间的关系。方法 :对 10 2例胶质瘤石蜡切片PTEN基因进行PCR SSCP分析 (聚合酶链反应 单链构象多态性分析 ) ,检测PTEN基因突变 ;同时通过免疫组化方法检测NCAM在胶质瘤中的表达。结果 :共有 11例成胶质细胞瘤发生PTEN基因突变 ,突变发生率为 2 6% ( 11 4 2 ) ,显著高于其它胶质瘤 ( χ2 =11.62P <0 .0 0 5 ) ;无一例成胶质细胞瘤发现NCAM阳性表达 ,阳性表达率显著低于其它胶质瘤 (P =0 .0 0 0 )。结论 :PTEN基因突变在成胶质细胞瘤发生、发展中起重要作用 ;NCAM在成胶质细胞瘤侵袭。

HMGB1在多形性成胶质细胞瘤中的作用及其机制研究

目的研究高迁移率蛋白(HMGB1)在多形性成胶质细胞瘤(GBM)中的作用及其机制。方法用9 L胶质瘤细胞颅内接种Wistar鼠构建同源GBM模型。建立GBM模型鼠后将其随机分为3组:GBM+Saline(n=20),GBM+Ad(n=20),GBM+Ad+Gly(n=20)。10 d后对GBM+Ad组鼠进行Ad-TRAIL感染(8×107pfu/5μl),GBM+Ad+Gly组鼠进行Ad-TRAIL感染和甘草酸(Glycyrrhizin)喂养(稀释于氢氧化钠,100 mg腹腔注射,每天两次连续喂养10d),GBM+Saline组和对照组用生理盐水处理。采用ELISA测定体内和体外HMGB1的含量水平,TUNEL法测定细胞的凋亡,免疫细胞组化(ICC)检测HMGB1的表达。结果 HMGB1在GBM+Ad组中的血清含量为5.540±0.054 ng,显著高于GBM+saline组的0.0060±0.004 ng(P=0.0001);GBM+Ad+Gly组中HMGB1血清含量(0.07±0.016 ng)显著低于GBM+Ad组(P=0.04);GBM+saline组的HMGB1血清含量高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.923)。免疫细胞组化实验中,HMGB1在GBM-Ad组中呈高阳性表达。体外检测中,GBM+Ad组中HMGB1浓度(77.505±1.196 ng)高于GBM+saline组(8.623±0.052 ng)(P=0.0003);GBM+Ad0组中HMGB1浓度低于GBM+saline组,但差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL法检测Ad-TRAIL感染GBM原代细胞后的细胞凋亡发现,GBM+Ad组的细胞死亡率为(78.91±0.17)%,显著高于GBM+saline组(18.29±0.73)%(P=0.04)。相关性分析结果显示HMGB1含量水平与细胞死亡率呈正相关,R2=0.9976,P<0.0001。GBM+saline和GBM+Ad+Gly组鼠在第12天开始出现死亡,在第24天和第25天全部死亡;而GBM+Ad组在第16天开始出现死亡,在第40天时有50%(5/10)长期存活。结论HMGB1在GBM治疗中高释放,且其浓度与细胞凋亡正相关。HMGB1是GBM的治疗靶点,并且是检测腺病毒治疗或免疫治疗GBM疗效的潜在生物标记。

rH2AX核内斑点在不同成胶质瘤细胞中的剂量时间效应研究

将成胶质瘤细胞MO59K和MO59J两种细胞分别给予1Gy,2Gy,4Gy和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h收集细胞,检测rH2AX核内斑点时间及剂量效应特点.结果发现,MO59K细胞和MO59J细胞随着照射剂量的增加rH2AX核内斑点数量增加;并且MO59K细胞接受8Gy照射后rH2AX斑点在24h内能够恢复到放疗前的水平,而MO59J细胞内rH2AX斑点不能恢复到照射前水平.提示MO59J细胞较MO59K细胞敏感,照射后rH2AX核内斑点更难恢复到未照射水平.

多形性成胶质细胞瘤的肿瘤基因组学及其信号通路

多形性成胶质细胞瘤(Glioblastoma Multiforme,GBM)是成年人中最常见的原发性脑瘤,包括原发性和继发性GBM。GBM的遗传学的变异主要包括杂合性的丧失(Loss of heterozygosity,LOH)以及众多的基因突变和表达异常。其产生的机理与DNA修复的错误以及许多生长因子和癌基因信号通路有关。具有无限自我更新能力的胶质细胞瘤的干细胞(Gloima stem cells)可能来自停止发育的神经祖细胞或来自去分化的星形胶质细胞,是GBM复发的主要原因,有可能成为GBM治疗的新的靶点。

碱性成纤维细胞生长因子生物学特性及与胶质瘤关系

碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)是 FGF家族成员之一 ,由 15 5个氨基酸所组成 ,相对分子质量为 18kd的低分子量b FGF是其活性主要形式。其基因位于人类染色体的 4q2 5处。b FGF与细胞作用需要有 2个受体成纤维细胞生长因子受体 ( FGFR)和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖 ( HSPG)才能完成它的生物学功能。 b FGF具有广泛的细胞增殖效应 ,可诱导新生血管生成 ,在伤口愈合过程中和胚胎的早期发育过程中发挥重要作用 ,参与神经系统的分化与维持 ,还是骨组织工程中信号调节因子之一。b FGF在胶质瘤的血管生成中有作用 ,并且能够促进肿瘤血管内皮细胞及肿瘤细胞的增殖 。

microRNA参与调控成胶质细胞瘤发生发展的研究进展

神经成胶质细胞瘤起源于神经胶质细胞,是成人最常见的原发性颅内肿瘤,患者预后极差。MicroRNAs(miR-NAs)是一类内源性约18～26nt的非编码RNA,在多种生命过程中扮演重要的角色,其表达失控与成胶质细胞瘤发生发展密切相关。因此,本文就miRNAs在成胶质细胞瘤进展中的调控作用等方面作一综述。

原发与复发性成胶质细胞瘤中DNA错配修复蛋白、p53蛋白表达和DNA倍性的差异

目的:探讨原发与复发性成胶质细胞瘤的临床病理特点和分子遗传学差异。方法:应用免疫组化和流式细胞学方法对32例广东籍成胶质细胞瘤hMSH2,hMLH1和p53蛋白表达及DNA倍性进行检测,结合临床病理学资料,分析它们之间的相关性。结果:32例成胶质细胞瘤患者的DNA倍性与p53的表达存在显著的相关性P0.05,23例非整倍体DNA含量的肿瘤中,有20例87.0%出现p53蛋白的过度表达。在原发与复发性成胶质细胞瘤中,肿瘤的DNA含量和p53蛋白表达有显著的差异性P<0.05,复发性成胶质细胞瘤中,有87.5%14/16出现了p53蛋白的过度表达,93.8%15/16为非整倍体的DNA含量;而原发性成胶质细胞瘤,则有56.3%9/16呈p53表达正常表达,50.0%8/16是二倍体或近二倍体DNA含量。另外,丢失了hMSH2蛋白的2例成胶质细胞瘤,全部是复发性的肿瘤,均呈p53蛋白的过度表达和非整倍体的DNA含量。结论:广东籍成胶质细胞瘤患者的发病年龄明显低于欧美人。绝大多数的复发性成胶质细胞瘤是沿染色体不稳定性Chromosomalinstability,CI途径而发展,多数出现p53基因的异常表达,少部分肿瘤可同时涉及微卫星不稳定Microsatellite.instability,MSI途径;约一半的原发性成胶质细胞瘤既不沿CI途径发展,也未出现p53基因的异常,同时又无证据显示与MSI途径有关。

碱性成纤维细胞生长因子在不同级别人脑胶质瘤中的表达

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与人脑胶质瘤恶性程度之间的关系。方法:取手术切除人脑胶质瘤标本45例,手术内减压正常脑组织5例,免疫组织化学染色观察bFGF在正常脑组织及不同级别脑胶质瘤组织中的表达水平。结果:正常脑组织无bFGF表达,随胶质瘤级别增加bFGF表达率明显增高,正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤两两之间差异有显著性(P<0.05)。结论:bFGF在正常脑组织中不表达,其表达与人脑胶质瘤的恶性程度正相关,可成为判断胶质瘤恶性程度和预后的一项指标,并为胶质瘤的治疗提供新的途径。