家蚕蛾吐出液的酶活性及蛋白质种类鉴定

家蚕羽化时用口腔吐出液溶解前端茧层的丝胶及少量丝素后脱茧而出,测定吐出液中各种酶类的活性以及鉴定吐出液中的蛋白质种类,对解析家蚕羽化过程的溶茧机制具有重要意义。在家蚕羽化前解剖收集嗉囊液,在家蚕羽化时收集蛾吐出液,解剖获取蛾下颚晶体,测定3组样品中的蛋白酶、酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性:在蛾吐出液和嗉囊液中皆检测到4种酶的活性,2组检测样品除蛋白酶活性接近外,酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性则是蛾吐出液比嗉囊液分别高出21%、57%、26%;下颚晶体不具有纤溶酶活性,其他3种酶的活性也皆比蛾吐出液和嗉囊液低。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析技术在家蚕蛾吐出液中鉴定出29种蛋白质,其中包括14种酶类、4种蛋白酶抑制剂、5种30K蛋白、1种转运相关蛋白、2种免疫相关蛋白和3种其他蛋白质。研究结果显示了蚕蛾吐出液成分的复杂性,同时说明家蚕羽化时吐出液对丝胶和部分丝素的水解除了溶茧酶的作用外,可能还有其他成分的参与。

家蚕蛾吐出液溶茧酶的溶栓作用研究

利用CM-Sepharose Fast Flow弱阳离子交换层析从家蚕蛾吐出液中收集得到溶茧酶。通过精氨酸酯酶活力测定其酶活力为11.92 U/mg,利用纤维蛋白原降解试验和纤维蛋白平板试验初步验证其具有溶栓作用。小鼠腹部皮肤皮内注射家蚕蛾吐出液溶茧酶试验发现,当每公斤体质量注射的酶剂量为0.25μg/μL时,开始出现溶血;在小鼠体内溶栓试验中,每公斤小鼠体质量注射家蚕蛾吐出液溶茧酶的剂量分别为0(对照)、100、200、300、400μg时,48 h后小鼠尾部血栓比例呈逐渐减小的趋势,去除率分别为(5.00±0.41)%、(16.67±0.21)%、(37.97±0.74)%、(49.15±0.65)%、(74.67±0.62)%。

蚕蛾溶茧酶的研究进展

溶茧酶是蚕蛾在羽化的过程中分泌的一种酶,其作用是软化和溶解茧层以便使蚕蛾从茧里出来。据目前研究所知,蚕蛾羽化时,是由多个器官合成分泌的溶茧酶共同起作用的。本文从蚕蛾吐出液的研究,溶茧酶的来源、生理生化特征、基因克隆以及开发应用等方面综述了溶茧酶的研究进展。