吖啶类荧光探针与蛋白质相互作用的研究

文章研究3种新型吖啶类荧光探针(N-(2-二甲氨基)乙基-9-氯吖啶-4-甲酰胺(NCAF)、9-[(N-2-二甲氨乙基)吖啶-4-甲酰胺]-α-丙氨酸(NAFA)和4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺(DNAF))与牛血清白蛋白(BSA)的相互结合作用机理。分别对3种吖啶类探针自聚集情况、与牛血清白蛋白结合常数KA和结合位点数n、热力学参数H、G以及S、能量转移效率E和结合距离R0进行比较,并对实验数据进行分析。研究了3种吖啶类探针对蛋白质内源荧光猝灭的猝灭机制和主要作用力类型,为进一步研究新的生物探针及其在生物大分子识别分析应用提供了一定的实验和理论支持。

吖啶类荧光探针用于微量蛋白质测定的研究

目的：利用合成的3种新型的蛋白质分子荧光探针N-（2-二甲氨基）乙基-9-氯吖啶-4-甲酰胺（NCAF）、9-[（N-2-二甲氨乙基）吖啶-4-甲酰胺]-α-丙氨酸（NAFA）和4,9-二[N-（2-二甲氨基）乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺（DNAF）结合荧光发射光谱,建立了3种新的微量蛋白质测定方法。方法：通过建立适宜的NCAF-SDS（十二烷基硫酸钠）、NAFA-SDS和DNAF-SDS荧光猝灭体系,牛血清白蛋白（BSA）的加入对体系的荧光具有恢复作用,并随着BSA加入浓度的增大,荧光恢复程度逐渐增强,并在一定的浓度范围内呈线性关系,由此建立了用新型吖啶类荧光探针测定BSA的荧光分析新方法。结果：从NCAF、NAFA到DNAF测定线性范围分别为5.0×10-9~6.8×10^-7,9.0×10^-9~8.2×10^-8和5.0×10^-9~8.3×10^-7mol·L^-1;测定灵敏度（3σ/K）分别为1.1×10^-10,3.8×10^-10和1.0×10^-10mol·L^-1。结论：该测定方法具有良好的荧光响应和稳定性,为微量蛋白质定量分析提供了新的技术体系。