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细胞内Ca^2+及MERTK基因在人视网膜色素上皮细胞吞噬功能中的作用
1
作者
孙昱昭
洪晶
安刚
《中华眼底病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期193-197,共5页
目的观察细胞内Ca^2+及MERTK基因在人视网膜色素上皮(RPE)细胞的吞噬功能中所起的作用及二者的相互关系。方法用视细胞外节膜盘(ROS)于37℃孵育培养的RPE细胞,在孵育不同终止吞噬反应。双重荧光标记法检测RPE细胞吞噬动力学;钙...
目的观察细胞内Ca^2+及MERTK基因在人视网膜色素上皮(RPE)细胞的吞噬功能中所起的作用及二者的相互关系。方法用视细胞外节膜盘(ROS)于37℃孵育培养的RPE细胞,在孵育不同终止吞噬反应。双重荧光标记法检测RPE细胞吞噬动力学;钙离子荧光探针负载法在荧光显微镜下测定RPE细胞内Ca^2+的变化;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测相应时间点MERTK基因表达的变化及施加Ca^2+激活剂(A23187载体)或拮抗剂(verapamile)后MERTK基因表达的变化。结果RPE细胞与ROS孵育过程中,ROS结合于RPE细胞表面发生在15min时,RPE细胞吞噬ROS在24h时达到饱和。细胞内Ca^2+在孵育15min时升高,并在24h内保持高水平;MERTK基因表达在RPE细胞与ROS孵育5min时增强,并在全部孵育过程中呈现出高表达状态;以A23187载体开放钙通道升高RPE细胞内Ca^2+后,MERTK基因信使核糖核酸(mRNA)水平升高,并呈剂量依赖性。经A23187预处理后的孵育实验中所检测到的MERTK mRNA水平除3h这一时间点外均高于对照组;verapamile拮抗RPE细胞内Ca^2+后,MERTK基因表达明显下降并呈剂量依赖性;以verapamile预处理后继续与ROS孵育,所检测到的MERTK基因在24h内均低于对照组。结论MERTK基因及细胞内Ca^2+发挥着维持RPE细胞吞噬过程的重要作用,MERTK作为上游调控信号启动下游的细胞内Ca^2+信号来维持RPE细胞对ROS的摄入过程。
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关键词
色素上皮
眼/病理
生理学
吞噬作用/生理学
CA^2+
MERTK基因
原文传递
题名
细胞内Ca^2+及MERTK基因在人视网膜色素上皮细胞吞噬功能中的作用
1
作者
孙昱昭
洪晶
安刚
机构
中国医科大学附属第一医院眼科
北京大学第三医院眼科中心
锦州市亚东眼科医院
出处
《中华眼底病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期193-197,共5页
基金
国家自然科学基金(30471865、30670816)
教育部博士点基金(20040159010)
文摘
目的观察细胞内Ca^2+及MERTK基因在人视网膜色素上皮(RPE)细胞的吞噬功能中所起的作用及二者的相互关系。方法用视细胞外节膜盘(ROS)于37℃孵育培养的RPE细胞,在孵育不同终止吞噬反应。双重荧光标记法检测RPE细胞吞噬动力学;钙离子荧光探针负载法在荧光显微镜下测定RPE细胞内Ca^2+的变化;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测相应时间点MERTK基因表达的变化及施加Ca^2+激活剂(A23187载体)或拮抗剂(verapamile)后MERTK基因表达的变化。结果RPE细胞与ROS孵育过程中,ROS结合于RPE细胞表面发生在15min时,RPE细胞吞噬ROS在24h时达到饱和。细胞内Ca^2+在孵育15min时升高,并在24h内保持高水平;MERTK基因表达在RPE细胞与ROS孵育5min时增强,并在全部孵育过程中呈现出高表达状态;以A23187载体开放钙通道升高RPE细胞内Ca^2+后,MERTK基因信使核糖核酸(mRNA)水平升高,并呈剂量依赖性。经A23187预处理后的孵育实验中所检测到的MERTK mRNA水平除3h这一时间点外均高于对照组;verapamile拮抗RPE细胞内Ca^2+后,MERTK基因表达明显下降并呈剂量依赖性;以verapamile预处理后继续与ROS孵育,所检测到的MERTK基因在24h内均低于对照组。结论MERTK基因及细胞内Ca^2+发挥着维持RPE细胞吞噬过程的重要作用,MERTK作为上游调控信号启动下游的细胞内Ca^2+信号来维持RPE细胞对ROS的摄入过程。
关键词
色素上皮
眼/病理
生理学
吞噬作用/生理学
CA^2+
MERTK基因
Keywords
Pigment epithelium of eye/pathophysiology
Phagocytosis/physiology
Ca^2+
MERTK gene
分类号
R774.13 [医药卫生—眼科]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞内Ca^2+及MERTK基因在人视网膜色素上皮细胞吞噬功能中的作用
孙昱昭
洪晶
安刚
《中华眼底病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
原文传递
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参考文献
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