高迁移率族蛋白B1对树突状细胞表型、吞噬功能及ERK/JNK/P38 MAPK信号通路的影响

目的探究高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)对硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)诱导的树突状细胞(DCs)表型、吞噬功能及细胞外信号调节激酶(ERK)/氨基末端蛋白激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶P38抗体(P38 MAPK)信号通路的影响。方法分别以30、300、600μmol·L^(-1)IS干预人原代DC细胞24 h,分为Control组、IS-30组、IS-300组、IS-600组,通过流式细胞分析鉴定细胞表型并检测细胞吞噬功能;细胞经600μmol·L^(-1)IS干预24 h后加入1 mg·L^(-1)anti-HMGB1或经1 mg·L^(-1)HMGB1单独处理后分为Control组、IS组、HMGB1组、IS^(+)anti-HMGB1组,通过流式细胞分析鉴定细胞表型并检测细胞吞噬功能;Western blot和免疫荧光染色检测ERK/JNK/P38 MAPK信号通路相关蛋白表达。结果随IS浓度增加,CD83^(+)和CD86^(+)细胞数逐渐增加(P<0.01),DCs吞噬能力逐渐下降(P<0.01);与IS组相比,IS^(+)anti-HMGB1组的CD83^(+)和CD86^(+)细胞数明显减少(P<0.01),细胞吞噬能力增加(P<0.01)。此外,与Control组比较,IS或HMGB1组p-ERK/ERK、p-P38/P38、p-JNK/JNK的蛋白表达升高(均P<0.01);与IS组相比,IS^(+)anti-HMGB1组p-ERK/ERK、p-p38/p38、p-JNK/JNK的蛋白表达降低(均P<0.01)。结论拮抗HMGB1可抑制IS诱导的DCs表型及成熟并抑制ERK/JNK/P38 MAPK信号通路激活。

IL-6通过激活JAK2/STAT3信号通路增强小鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能

目的 探讨白细胞介素6(IL-6)对MH-S小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法 脂多糖(LPS)经气道滴入激发构建小鼠急性肺损伤(ALI)模型,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6的含量。体外培养MH-S细胞,在信号转导子与转录激活子3 (STAT3)抑制剂Stattic(5μmol/L)存在与否的情况下,再加入IL-6(10 ng/mL~500 ng/mL)刺激6 h,加入荧光微球孵育2 h后,采用流式细胞术检测MH-S细胞吞噬荧光微球情况;Western blot法检测磷酸化的Janus激酶2(p-JAK2)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、肌动蛋白相关蛋白2(Arp2)、纤维型肌动蛋白(F-actin)的表达水平。结果 鼻腔滴入LPS后,小鼠BALF中IL-6含量显著升高。随着IL-6刺激剂量的增加,MH-S细胞吞噬荧光微球的作用增强,Arp2、 F-actin蛋白的表达水平升高。100 ng/mL IL-6刺激MH-S细胞后,p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达水平升高。阻断MH-S细胞STAT3信号后,IL-6促进细胞吞噬的效应完全消失,IL-6诱导的Arp2、 F-actin蛋白表达增加被抑制。结论 IL-6通过激活JAK2/STAT3信号通路促进MH-S细胞Arp2、 F-actin蛋白的表达增强吞噬功能。

基于PPARγ信号通路研究香烟烟雾提取物干预不同时间下对肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬功能影响的分子机制

目的:观察香烟烟雾提取物(CSE)干预不同时间下肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬功能的变化,探讨其对肺部疾病炎症反应的影响及分子机制。方法:大鼠肺泡巨噬细胞NR8383采用10%CSE分别干预6 h、12 h、24 h、48 h,分为6 h空白对照组、6 h-10%CSE组、12 h空白对照组、12 h-10%CSE组、24 h空白对照组、24 h-10%CSE组、48 h空白对照组、48 h-10%CSE组。10%CSE干预12 h后联用PPAR抑制剂/激动剂,分为PPAR抑制剂组、PPAR激动剂组。Alamar Blue法检测PPAR激动剂对NR8383细胞增殖及毒性作用;流式细胞术检测NR8383细胞胞葬、吞噬功能及M1、M2极化分型;酶联免疫吸附实验检测TNF-α、TGF-β1、MFG-E8含量;免疫印迹法检测PPARγ信号通路及下游分子CD36蛋白表达;qPCR检测PPARγ、CD36 mRNA的表达。结果:10%CSE干预6 h后,NR8383细胞吞噬及胞葬功能均有所升高,PPARγ表达下调,CD36 mRNA表达增加,TNF-α、TGF-β1、MFG-E8表达均升高,但无明显极化方向;干预12 h,NR8383细胞吞噬功能及胞葬率显著降低,PPARγ、CD36表达显著下调,TNF-α表达增强,TGF-β1、MFG-E8表达降低,向M1型巨噬细胞极化;干预24 h后,NR8383细胞胞葬率降低,但吞噬大肠杆菌的功能增强,PPARγ表达下调,CD36蛋白表达降低,TNF-α表达降低但差异无统计学意义,TGF-β1、MFG-E8表达仍处于降低状态,有明显的M1型极化倾向;48 h后NR8383细胞胞葬率仍旧降低,但吞噬能力显著提升,PPARγ表达显著降低,CD36表达显著增加,TNF-α表达降低,TGF-β1、MFG-E8表达增加,巨噬细胞向M1、M2方向极化均增加。选择10%CSE干预12 h联合PPAR激动剂、抑制剂后发现,PPAR激动剂增强NR8383细胞胞葬及吞噬能力,上调PPARγ、CD36表达,抑制炎症因子TNF-α表达,促进抑炎因子TGF-β1、胞葬辅助因子MFG-E8表达。结论:随着CSE干预时间的变化,肺泡巨噬细胞从早期炎症反应的活化状态,逐渐进展为慢性炎症反应状态,进而导致肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬功能障碍,该机制与PPARγ通路被抑制有关。

龙眼肉多糖对Aβ诱导耐受的小胶质细胞吞噬功能的影响及其机制

目的探究龙眼肉多糖(LAPs)对Aβ诱导耐受的小胶质细胞(BV2)吞噬功能的影响及其机制。方法采用4μmol·L^(-1)Aβ处理(48+24)h诱导细胞成为耐受模型,使用LAPs 0.8、1.6 mg·mL^(-1)进行干预。MTT法检测细胞增殖,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,倒置荧光显微镜观察细胞吞噬功能及mTOR抑制剂(Rapa)和HIF-1α抑制剂(BAY)对LAPs作用的影响,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt及HIF-1α蛋白表达。结果经Aβ处理的BV2细胞增殖率和目的蛋白表达提高,线粒体膜电位和细胞吞噬能力降低(P<0.05,P<0.01);LAPs能逆转上述指标变化,并且其提高吞噬功能的作用可被抑制剂阻断(P<0.05,P<0.01)。结论LAPs能提高Aβ诱导耐受的BV2细胞吞噬功能,作用途径可能与其促进耐受BV2细胞的增殖、提高其线粒体膜电位水平有关,并涉及PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α信号通路的激活。

由mtDNA清除THP-1细胞构建的人单核/巨噬细胞系Rho0细胞周期、凋亡、吞噬功能、炎症因子表达变化

目的 观察由线粒体DNA(mtDNA)清除人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)构建的人单核/巨噬细胞系Rho0细胞周期、凋亡、吞噬功能、炎症因子表达变化。方法 取THP-1细胞,使用溴化乙锭(EB)清除细胞中mtDNA,构建新的人单核/巨噬细胞Rho0。取Rho0细胞,分别给予1 mg/mL LPS或溶媒刺激24 h(计为Rho0-LPS组、Rho0-溶媒组);另取未经EB处理的THP-1细胞,分别给予1 mg/mL LPS或溶媒刺激24 h(计为Control-LPS组、Control-溶媒组);采用流式细胞术PI染色检测各组细胞周期,流式细胞术Annexin V-FITC/PI法测算各组凋亡细胞数,Red-Zymosan染料吞噬实验评估各组细胞吞噬功能(平均荧光强度)。取Rho0细胞(Rho0组)和取未经EB处理的THP-1细胞(Control组),采用RT-qPCR法检测炎症因子(IL-1α、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12 mRNA)。结果 与Control-溶媒组比较,Rho0-溶媒组G0~G1期、S期、G2/M期比例降低及细胞凋亡数增加和平均荧光强度增强,Control-LPS组细胞凋亡数增加和平均荧光强度增强(P均<0.05);与Rho0-溶媒组比较,Rho0-LPS组G0~G1期比例降低及细胞凋亡数增加(P均<0.05)。与Control组比较,Rho0组IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 mRNA表达升高(P均<0.05)。结论 清除mtDNA可导致Rho0细胞周期停滞,促进细胞凋亡,增强细胞吞噬功能及促炎功能。

免疫添加物对大黄鱼血液白细胞数量及其吞噬功能的影响

采用低聚糖益力素、稳定型维生素Ｃ、渔用多维等免疫、营养添加物定期投喂大黄鱼， 以粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、吞噬百分率、吞噬指数等为指标，跟踪检测试验大黄鱼血液中 白细胞组成数量和吞噬细胞吞噬能力的变化。研究结果表明，免疫添加物可以提高大黄鱼血 液中白细胞数量和吞噬细胞的吞噬能力，增强大黄鱼的非特异性免疫功能，促进大黄鱼的健 康生长。

沙尘暴PM_(2.5)、PM_(10)对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 探讨了沙尘暴PM2 5、PM10 对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 沙尘暴颗粒物采集自北京市城区 ,细胞毒性测定用MTT法 ,巨噬细胞吞噬功能采用流式细胞法 ,以荧光标记的胶珠 (Latexbeads ,D =2 4 μm)来测定。 结果 MTT结果显示 ,随着染毒浓度的增加 ,巨噬细胞存活率逐渐减低 ,高剂量组约为对照的 85 %左右。流式细胞仪分析表明 ,各颗粒物染毒组细胞的平均荧光强度逐渐减弱 ,提示巨噬细胞摄入沙尘暴颗粒物后 ,其吞噬荧光胶珠的能力明显减低 ;另外各染毒组的平均侧向光散射强度 ,即摄入的总颗粒数 (沙尘暴颗粒 +荧光胶珠 )低于对照 ,提示巨噬细胞的吞噬功能受到了损伤。沙尘暴PM2 5的细胞毒性比相同浓度的PM10 大 ,对吞噬功能的损伤也更明显。结论 沙尘暴PM2 5、PM10 均能损伤大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能 ,削弱其非特异性防御能力。

实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶活性及吞噬功能的研究

目的研究实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶活性及其吞噬功能。方法用四氧嘧啶腹腔注射复制 SD大鼠糖尿病动物模型 ,测定大鼠肺泡及腹腔巨噬细胞内酸性磷酸酶 ,精氨酸酶 ,乳酸脱氢酶及异柠檬酸脱氢酶的活性并测定腹腔及肺泡巨噬细胞对中性红的吞噬能力。结果糖尿病大鼠肺泡及腹腔巨噬细胞内 4种酶活性均高于对照组 ,其对中性红的吞噬能力也大于对照组。结论糖尿病时巨噬细胞处于激活状态 ,此激活的巨噬细胞可能参与糖尿病并发症之发生。

中国对虾血细胞吞噬功能的研究

本研究建立了检测中国对虾血细胞吞噬功能的橙检测法。该检测法可同时直观地观察中国对虾血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬和杀伤情况：一项试验可同时获得吞噬和杀伤百分率，吞噬和杀伤指数四个指标。用本法研究四种免疫增强剂对时虾血细胞吞噬功能的作用，结果表明，他们均可提高血细胞对金葡菌的吞噬活力以及血淋巴中的溶菌活力和酚氧化酶活力，但经统计学分析，结合攻毒试验的结果，浙农Ⅰ号和湖州Ⅰ号的免疫效果优于湖州Ⅱ号和湖州Ⅲ号。

人工风寒环境对小鼠单核巨噬细胞系统吞噬功能的影响

我们将小鼠置于人工风寒环境中刺激10h后,观察到其网状内皮系统(RES)廓清功能及φ腹腔巨噬细胞φ(PM噬)释放H_2O_2量均受到明显抑制,动力学观察结果表明,免疫抑制高峰发生在风寒刺激后第3天,刺激后第5天、第7天逐渐恢复正常,表现出一过性免疫抑制。免疫抑制的原因可能是风寒刺激过程中应激激素大量分泌所致。提示中医六气病因学说中的风寒二气,其致病的作用机理可能与抑制机体非特异性细胞免疫功能有关,该结论可与《内经》的"邪之所凑,其气必虚"发病理论相映证。

老年人单核/巨噬细胞吞噬功能及一氧化氮产生能力的改变

目的 探讨老年人单核巨噬细胞免疫功能的变化。方法 比较老年组与对照组外周血单核巨噬细胞吞噬功能及一氧化氮 ( NO)产生能力的变化。结果 老年组与对照组单核巨噬细胞吞噬百分率分别为 ( 37.2± 3.2 ) %、( 59.1± 4 .7) % ,吞噬指数分别为 0 .6 0± 0 .0 8和 1 .0 7± 0 .0 9;细菌脂多糖 ( L PS)刺激前后细胞培养上清中 NO的浓度老年组为 9.7± 1 .0μmol/L与 2 5.1± 6 .1μmol/L ;对照组为 1 6 .9± 1 .1μmol/L与 4 8.5±6 .7μmol/L。老年组均低于对照组。结论 老年人单核巨噬细胞免疫功能减退 ,提高老年人单核巨噬细胞吞噬功能及

孔雀绿比色法测定巨噬细胞吞噬功能的研究

测定巨噬细胞(Mφ)吞噬功能是了解机体免疫功能的试验。本文利用无色孔雀绿测定血浆中微量的血红蛋白含量,对用孔雀绿比色法测定小鼠Mφ的吞噬功能进行了研究。实验结果表明小鼠腹腔细胞贴壁2小时,效靶细胞比例1∶100、吞噬时间1小时为该方法的最佳条件。同时,还用本法进行了胸腺素和氢化可的松对体外Mφ吞噬功能影响的测定,结果胸腺素组OD值明显高于对照组,而氢化可的松组OD值明显低于对照组,该方法操作简单,孔雀绿呈色稳定,是定量测定Mφ吞噬功能较满意的试验方法。

怀牛膝对重型颅脑损伤大鼠血清IL-2、sIL-2R及外周血PMN吞噬功能的影响

目的通过采用硬膜外自由落体打击法建立重型颅脑损伤模型,研究不同剂量怀牛膝水煎剂对重型颅脑损伤大鼠血清白介素-2(IL-2)、可溶性白介素-2受体(sIL-2R)及外周血中性粒细胞(PMN)吞噬功能的影响,探讨怀牛膝对重型颅脑损伤大鼠免疫调节作用。方法将65只SD大鼠随机分成假损伤组、模型组、怀牛膝高剂量组、中剂量组、低剂量组(每组n=13)。伤后第7日分别采集血标本。采用ELISA及免疫学细胞技术方法检测IL-2、sIL-2R及外周血PMN吞噬功能。结果①模型组、低剂量组血清IL-2明显降低,分别与假损伤组、高剂量组、中剂量组比较差异均有显著性(P<0.01)。②模型组血清sIL-2R明显升高,与假损伤组、高剂量组比较差异均有显著性(P<0.05)。③模型组、中剂量组、低剂量组PMN吞噬率明显降低,与假损伤组比较差异均有显著性(P<0.01);高剂量组分别与模型组、低剂量组比较差异有显著性(P<0.05)。结论重型颅脑损伤后大鼠的免疫功能状态受抑制,中、高剂量怀牛膝水煎剂可以改善重型颅脑损伤后免疫功能抑制状态,尤以高剂量明显,可能与怀牛膝本身能增强免疫功能及改善中枢神经免疫调控障碍等有关。

茵陈蒿汤分煎、合煎对利胆及腹腔巨噬细胞吞噬功能影响的比较研究

大鼠经十二指肠分别给予茵陈蒿汤分煎、合煎药液，观察药后０．５、１、２、３、４ｈ的胆汁排出量，实验结果表明，茵陈蒿汤分煎、合煎的１４．８５ｇ／ｋｇ剂量组能明显增加大鼠胆汁排出量。以茵陈蒿汤分煎、合煎药液对泼尼松造型的小鼠分别灌胃７ｄ，能显著提高其腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。在两种药效学指标上，茵陈蒿汤分煎。

当归及不同配伍对环磷酰胺诱导的小鼠免疫器官、吞噬功能的影响

目的:观察当归及不同配伍对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫器官、巨噬细胞吞噬功能的影响,筛选具有提高免疫力作用的当归最佳配伍药对。方法:昆明种小鼠270只,分为3批,每批90只。将每批小鼠随机分为空白对照组、模型组、当归组、当归白芍组、当归熟地黄组、当归制首乌组、当归人参组、当归党参组、当归黄芪组。除空白对照组外,其余各组均腹腔注射环磷酰胺,建立免疫功能低下小鼠模型。连续灌胃8天后,检测各组小鼠脾指数、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、廓清指数等各项指标。结果:与模型组比较,当归及当归各配伍组小鼠脾脏、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、廓清指数均显著升高(P<0.05)。与当归组比较,当归人参组、当归党参组小鼠的脾指数、廓清指数显著升高(P<0.05),当归黄芪组小鼠脾指数、巨噬细胞吞噬率、廓清指数均显著升高(P<0.05)。当归白芍组小鼠胸腺指数、巨噬细胞吞噬率、廓清指数与模型组比较显著升高(P<0.05),但仍显著低于正常组(P<0.05)。结论:当归、当归不同配伍药对均能增强免疫功能低下小鼠的免疫功能,对免疫失衡机体具有保护作用。最佳配伍药对是当归配人参、当归配党参、当归配黄芪。

慢性阻塞性肺疾病肺泡巨噬细胞吞噬功能低下机制的研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是目前世界范围内老年人中致死性疾病上升速度最快的疾病之一,造成了严重的经济和社会负担。COPD急性加重(AECOPD)是COPD患者病程中造成病情进展、肺功能恶化的非常重要的过程,是造成COPD患者住院率和死亡率增加的最主要原因。众所周知,多种炎性细胞和肺部的结构细胞参与了COPD的发病,其中肺泡巨噬细胞(AM)因直接暴露于环境中的香烟烟雾。

西洋参抗疲劳作用及对迟发型超敏反应单核吞噬细胞功能影响的实验研究

目的:观察西洋参抗疲劳作用,对迟发型超敏反应强度、单核吞噬细胞功能的影响。方法:通过游泳法,观察西洋参对氢化可的松所致阴虚小鼠的游泳生存时间的影响;采用溶血空斑法,观察西洋参对豚鼠迟发型超敏反应强度的影响;采用小鼠碳粒廓清法,观察西洋参对小鼠单核细胞吞噬指数的影响。结果:西洋参能显著延长阴虚小鼠的游泳时间,与模型对照组比较,高、低剂量组均有显著性差异(P<0.01,P<0.05);可显著提高豚鼠迟发型超敏反应的强度,空斑实验比色OD值与模型对照组比较,高、低剂量组均有显著性差异(P<0.01);可提高小鼠单核细胞的吞噬指数,高、低剂量组与模型对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:西洋参可显著提高氢化可的松所致阴虚小鼠免疫能力;提高迟发型超敏反应的强度和小鼠单核吞噬细胞的能力。说明该药具有提高机体免疫力,扶正固本的作用。

青蒿琥酯对高温内毒素复合因素下巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 研究青蒿琥酯(AR)对高温内毒素(LPS)复合因素下巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 采用体外培养的巨噬细胞系RAW2 64 7细胞,分成空白对照组、AR组、LPS组及AR +LPS组,分别于3 7℃和40℃,含95 %O2 、5 %CO2 条件下培养1、2、3、4h后,台盼蓝染色计数细胞存活数,吞噬中性红实验检测巨噬细胞的吞噬功能。结果 经不同条件处理3h后各组细胞存活数无差异,均大于95 %;高温内毒素复合因素使巨噬细胞的吞噬功能明显降低,青蒿琥酯亦使巨噬细胞的吞噬功能下降,但青蒿琥酯加内毒素组的吞噬功能明显强于单纯内毒素组。结论 青蒿琥酯对高温内毒素复合因素下的巨噬细胞的吞噬功能有增强作用。

水溶性苜蓿多糖对肉仔鸡巨噬细胞吞噬功能的影响

本实验将水溶性苜蓿多糖 (WSAP)以 3种方式给予艾维茵肉仔鸡 ,在肉仔鸡不同生长阶段 ,通过碳廓清试验来检测机体巨噬细胞的吞噬功能 ,结果表明 :WSAP对被试肉仔鸡巨噬细胞的吞噬功能影响不明显 。