吡咯喹啉醌和葡醛内酯对产蛋高峰早期蛋鸡生产性能、蛋品质及血浆激素和生化指标的影响

试验旨在研究吡咯喹啉醌(PQQ)和葡醛内酯对产蛋高峰早期海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质及血浆激素和生化指标的影响。试验选取360只体重相近且健康的25周龄海兰褐蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组分别为:基础日粮+0.4 mg/kg吡咯喹啉醌(吡咯喹啉醌组);基础日粮+300 mg/kg葡醛内酯(葡醛内酯组);基础日粮+0.2 mg/kg吡咯喹啉醌+150 mg/kg葡醛内酯(吡咯喹啉醌+葡醛内酯组)。试验预饲期2周,正式期8周。结果显示:饲粮添加吡咯喹啉醌、葡醛内酯或二者共同添加对生产性能无显著影响(P>0.05);饲粮添加吡咯喹啉醌、葡醛内酯或二者共同添加对蛋品质无显著影响(P>0.05);与对照组相比,吡咯喹啉醌组和葡醛内酯组蛋鸡血浆孕酮水平显著提高(P<0.05);与对照组相比,葡醛内酯组蛋鸡血浆甘油三酯水平显著降低(P<0.05),吡咯喹啉醌组、吡咯喹啉醌+葡醛内酯组蛋鸡血浆谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05)。研究表明:吡咯喹啉醌和葡醛内酯虽然未显著提高产蛋高峰早期蛋鸡的生产性能和蛋品质,但可显著提高机体的激素水平,显著降低甘油三酯水平和谷草转氨酶活性,起到调节机体生理水平及预防疾病的作用。

吡咯喹啉醌对运动性疲劳小鼠血清代谢组学的影响

目的:探讨吡咯喹啉醌(PQQ)对运动性疲劳小鼠血清代谢组学的影响,寻找关键标志物,揭示PQQ在缓解运动疲劳中的代谢途径及其潜在的调节机制。方法:采用反复力竭游泳构建运动性疲劳的小鼠模型,进行为期两周的PQQ补充干预,剂量为每日10 mg/kg,利用色谱与质谱联合技术对小鼠血清中的代谢产物进行检测,并对筛选出的关键代谢物及其相关的代谢路径进行详细分析。结果:(1)反复力竭后,运动性疲劳小鼠与正常安静小鼠相比,血清中有32种差异代谢物;(2)反复力竭后,补充PQQ小鼠,与没有补充PQQ的小鼠相比,血清中有10种潜在差异代谢物;(3)进一步的组间比较揭示了两组小鼠中共有的4种显著差异的代谢物,包含N-乙酰-L-苯丙氨酸、柠檬酸、木糖醇及L-脯氨酸;(4)代谢通路分析显示,主要的差异代谢路径包括由柠檬酸参与的三羧酸循环中的乙醛酸循环支路和木糖醇参与的糖醛酸途径。结论:PQQ在维持运动性疲劳小鼠的正常血清代谢水平上发挥着关键作用,其所具有的作用机制或许与调控柠檬酸、木糖醇、L-脯氨酸以及N-乙酰-L-苯丙氨酸等关键代谢物及其所属的代谢通路存在紧密关联。

HPLC法测定吡咯喹啉醌(PQQ)中咪唑并吡咯喹啉(IPQ)的含量

目的:建立吡咯喹啉醌(PQQ)中IPQ的含量测定方法。方法:采用TCI Kaseisorb LC ODS 2000色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为乙腈-缓冲溶液(配制10mmol的磷酸氢二钾和15mmol的四丁基溴化铵水溶液,用磷酸调节pH至7.4)[28∶72];紫外检测器,检测波长为259nm;流速为1.0mL/min;进样量为20μL。结果:IPQ在0.05μg/mL^0.2μg/mL范围内线性关系良好,相关系数大于0.999。IPQ的回收率在104%~113%之间,RSD最大为3%。结论:该方法具有良好的专属性、检测灵敏度、精密度、线性和准确度,适用于PQQ中IPQ的质量控制。

吡咯喹啉醌二钠盐加工环境的稳定性研究

为研究吡咯喹啉醌二钠盐(PQQ·Na2)在2种常见饮料剂型(固体饮料、近水饮品)中的稳定性。以PQQ·Na2含量为核心指标,通过影响因素试验(压力、pH值、杀菌强度)、加速试验、光照试验和长期试验系统性地考察PQQ·Na2在饮料开发、生产、储存过程中的稳定性。结果表明,PQQ·Na2在固体饮料中受压片压力影响较小,且具有良好的光稳定性;加速试验中,最大衰减率为17.93%;长期试验中,平均衰减率为9.32%。PQQ·Na2在近水饮品中具有光敏性,光照4周衰减率高达92.29%;长期试验中,平均衰减率为21.50%。此外,pH值对近水饮品中PQQ·Na2的稳定性有显著影响,当pH<4.0时,饮品色泽变化显著。3种杀菌条件(90℃/30 min,121℃/15 min,130℃/15 s)对PQQ·Na2稳定性无显著影响。研究为PQQ·Na2在饮料剂型中的应用提供参考。

饲粮添加吡咯喹啉醌对产蛋后期脂肪肝出血综合征蛋鸡生产性能、蛋品质及血浆和肝脏抗氧化指标的影响

试验旨在探讨饲粮添加吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone,PQQ)对产蛋后期脂肪肝出血综合征蛋鸡生产性能、蛋品质及血浆和肝脏抗氧化指标的影响。试验选取71周龄体重、产蛋率相近的海兰褐蛋鸡240只,随机分为3组,每组8个重复,每个重复10只鸡。对照组,饲喂基础日粮;FLHS模型组,通过饲喂高脂饲粮建立脂肪肝出血综合征模型;PQQ组饲喂添加5 mg/kg PQQ的高脂饲粮,试验期12周。结果显示:①与对照组相比,FLHS模型组蛋鸡产蛋率、采食量显著降低(P<0.05),料蛋比显著升高(P<0.05);相较于FLHS模型组,PQQ组蛋鸡产蛋率、采食量和平均蛋重显著提高(P<0.05),料蛋比显著降低(P<0.05)。②与对照组相比,FLHS模型组鸡蛋蛋壳强度、蛋壳重、蛋壳厚度显著降低(P<0.05);此外FLHS模型组鸡蛋的蛋白高度和哈氏单位显著提高(P<0.05);与FLHS模型组相比,PQQ组鸡蛋蛋壳强度、蛋壳重、蛋壳厚度显著提高(P<0.05)。③与对照组相比,FLHS模型组肝脏明显肿大,边缘钝圆,呈土黄色,肝脏表面有点状出血,肝脏质脆易碎。与FLHS模型组相比,PQQ组肝脏基本恢复正常,与对照组相比无显著差异。④与对照组相比,FLHS模型组肝脏中甘油三酯水平显著提高(P<0.05),PQQ组肝脏中甘油三酯水平显著降低(P<0.05)。⑤与对照组相比,FLHS模型组蛋鸡血浆、肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量无显著差异(P>0.05);与FLHS模型组相比,饲粮添加PQQ对PQQ组蛋鸡血浆、肝脏中GSH-Px和SOD活性及MDA含量无显著影响(P>0.05)。综上所述,饲粮添加5 mg/kg PQQ可显著缓解FLHS引起的蛋鸡产蛋率、采食量下降及料蛋比的升高,改善蛋品质,缓解脂肪肝出血综合征对蛋鸡生产性能的不利影响。

吡咯喹啉醌的生物学功能及在动物繁殖上的应用

吡咯喹啉醌作为一种新型的氧化还原辅酶,广泛存在于微生物、动植物和人体内,因其促生长繁殖、抗氧化、抑制细胞凋亡等生物学功能受到广泛关注。该文综述了吡咯喹啉醌对动物抗氧化能力的影响作用及相关生物学特性的研究进展,以期为其在动物繁殖中的高效利用提供理论参考。

吡咯喹啉醌菌株复合诱变及其高通量筛选

以一株能产生吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)的细菌为原始菌株,首先通过紫外、微波和氯化锂单一诱变,然后再进行紫外⁃微波⁃氯化锂三者复合诱变处理。研究结果表明,紫外照射50 s、微波(350 W)照射60 s和氯化锂浓度为0.4%处理效果最佳,获得突变株C5Y⁃6⁃4,该菌株摇瓶产量达134.9 mg/L,是原始菌株的1.32倍。通过96孔板高通量筛选和高效液相色谱法检测,结果表明,采用复合诱变在一定程度上提高了吡咯喹啉醌的产量,且突变株C5Y⁃6⁃4遗传稳定性好。

吡咯喹啉醌（PQQ）的研究进展

吡咯喹啉醌是一种与烟酰胺核苷酸、黄素核苷酸不同的新型辅基。近年来，荷兰、日本等学者对它进行了初步研究，而国内研究起步较晚，文章综述了吡咯喹啉醌的发现、分离纯化、鉴定、理化性质以及生理功能，这有利于进一步研究吡咯喹啉醌的分布、产生机理、生物学性质、生理功能及其应用。这将对促进酶学学科的发展具有重要的理论和实践意义。

吡咯喹啉醌连续发酵工艺初探

吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinine, PQQ)的微生物发酵生产中,常用补料分批发酵法,但是其发酵前期菌体生长较慢,发酵后期产量下降较快,整个发酵周期的生产效率较低。为了提高PQQ的发酵生产效率,初步研究了使用生丝微菌(Hyphomicrobium sp.)进行单级连续发酵生产PQQ的工艺。以PQQ补料分批发酵时产率最高的时刻作为连续发酵的起点,分别进行了PQQ的恒浊法连续发酵和恒化法连续发酵的研究。实验结果表明,以0.008 7 h-1的稀释率进行PQQ恒浊法连续发酵更好,发酵液中的菌体浓度能够保持稳定且发酵产量较高。与补料分批发酵相比,恒浊法连续发酵可以提高PQQ的生产效率(80.7%),同时还提高了底物甲醇的转化率(36.5%),具有良好的工业应用前景。

吡咯喹啉醌(PQQ)合成基因对PQQ产量的影响

将携带新辅基吡咯喹啉醌合成基因的克隆载体pRK310 经三亲本杂交,分别导入M.extorquens.AM1 及其突变体3b 和D2 中,可不同程度增加pqq 基因的拷贝数. 在基因复制水平构建了8 个工程菌,使PQQ产量提高了0.84～5.6 倍. 结果表明,结构上成簇的pqq 基因在功能上是密切相关、协调作用的,单个或部分pqq基因对PQQ合成的贡献是有限的,pqq 基因之间的比例和相互作用对PQQ 的合成量是有重要意义的.pqq 基因簇中起转录衰减作用的反向重复序列可能是pqq 基因正常转录所必需的.

1985—2022年吡咯喹啉醌研究的文献计量学和可视化分析

目的探讨吡咯喹啉醌(PQQ)的研究热点与发展趋势,挖掘PQQ的研究及应用价值。方法本研究以Web of Science为检索的数据库,检索1985年至2022年发表的关于PQQ的文献,采用VOSviewer纳入文献的关键词、国家及地区、期刊等,对这些文献进行文献计量学分析。结果共纳入1512篇文献,年发文量整体呈现上升的趋势。发文量排名最高的期刊类别为Biochemistry Molecular Biology;引文期刊Journal of Biological Chemistry总链接强度最大;高频关键词主要包括膳食营养补充剂、线粒体、抗氧化等;国家及地区可视化结果显示中国虽然研究开始的时间较晚,但是与其他国家链接强度较大。结论近年来,对于PQQ的研究热度逐渐上升,其抗氧化作用、改善线粒体功能以及作用靶点可能是未来研究的热点。PQQ仍然具有广阔的发展前景,为医药健康产业注入新的活力。

吡咯喹啉醌对颅脑损伤小鼠的神经保护作用

目的探讨吡咯喹啉醌(PQQ)对颅脑损伤(TBI)小鼠的保护作用及潜在机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、TBI组和PQQ组,每组20只。使用可控皮层冲击方法建立TBI模型。PQQ组伤前30 min腹腔注射溶PQQ(10 mg/kg),假手术组和TBI组腹腔注射等量生理盐水。伤后24 h,采用神经功能评分法评估小鼠神经功能,使用干湿重法检测脑含水量,采用TUNEL染色检测神经元凋亡,采用ELISA法检测脑组织白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,采用免疫印迹法检测脑组织caspase3、Notch受体胞内段(NICD)、发状分裂相关增强子1(HES-1)、小胶质细胞离子钙结合衔接分子1(IBA1)的蛋白表达水平。结果与假手术组比较,TBI组小鼠脑含水量及神经功能学评分均明显升高(P<0.05),脑组织IL-1β及TNF-α含量均明显升高(P<0.05),脑组织TUNEL阳性细胞率明显升高(P<0.05),脑组织NICD、HES-1、IBA-1和活化caspase3达量水平明显增加(P<0.05)。与TBI组比较,PQQ组小鼠脑含水量及神经功能学评分均明显减少(P<0.05),脑组织IL-1β水平及TNF-α水平均明显降低(P<0.05),脑组织TUNEL阳性细胞率明显降低(P<0.05),脑组织NICD、HES-1达量水平明显增加,但脑组织IBA-1和活化caspase3表达水平明显降低(P<0.05)。结论PQQ可减轻TBI小鼠脑水肿、炎症反应和神经元凋亡,改善神经功能,从而发挥脑保护作用,其机制可能与激活Notch信号通路有关。

吡咯并喹啉醌二钠盐对修护皮肤屏障的作用研究

通过人角质形成细胞划痕修护测试、斑马鱼胚胎尾鳍修护促进测试、胶带剥离损伤皮肤屏障修护测试和人体临床测试,对吡咯并喹啉醌二钠盐对修护皮肤屏障的作用进行研究,结果表明,吡咯并喹啉醌二钠盐含量为2.5μg/mL时,对人角质形成细胞划痕有愈合效果;浓度为100μg/mL时,能显著促进斑马鱼胚胎尾鳍再生,并对人体皮肤屏障具有长期修护效果。

新型食品添加剂吡咯喹啉醌的分离纯化工艺研究

为了对新食品添加剂吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline Quinone,PQQ)发酵上清液分离纯化工艺中大孔树脂吸附洗脱步骤进行优化,提升洗脱收率,本文采用XAD-1600大孔树脂对上柱液中PQQ进行吸附和洗脱,对洗脱剂种类进行筛选,对上柱液的pH值、洗脱剂中氯化钠的浓度、洗脱温度和洗脱流速等工艺参数进行优化,计算洗脱收率。结果表明,在PQQ上柱液pH值为3.5,洗脱剂选择磷酸盐缓冲液,磷酸盐缓冲液中氯化钠含量为1.4%,洗脱流速为2 BV·h^(-1),洗脱温度为20℃的条件下,PQQ洗脱收率最高(96.7%)。

新辅基吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成基因研究进展

吡咯喹啉醌（Ｐｙｒｏｌｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ－Ｑｕｉｎｏｎｅ，ＰＱＱ）是氧化还原酶的新辅基。它在细菌体内是由一组排列成簇的相关基因即ｐｑｑ基因控制合成的。根据不同细菌来源ｐｑｑ基因的同源性和对应关系，可将ｐｑｑ基因归为７类：簇基因１～７。在Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ中存在其中四个，ＫｌｅｂｓｉｅｌａＰｎｅｕｍｏｎｉａｅ和ＭｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍＯｒｇａｎｏｐｈｉｌｕｍＤＳＭ７６０中６个，而Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｅｘ－ｔｏｒｑｕｅｎｓＡＭ１中存在全部７个簇基因。簇基因１编码一个由２２～２９年氨基酸组成的小肽，此小肽可能是ＰＱＱ的前体，簇基因２可能涉及ＰＱＱ跨膜转运，簇基因３可能负责ＰＱＱ合成的最后一步酶催化，簇基因５可能涉及ＰＱＱ合成中某种酶的辅因子合成，簇基因６和７可能负责小肽的加工。簇基因４功能还不清楚，但在Ｍ．ｅｘｔｏｒｑｕｅｎｓＡＭ１中簇基因３和４是以融合基因存在的。

食品添加剂吡咯喹啉醌生物合成研究

为了提高吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成工业化生产产量,对吡咯喹啉醌工业化微生物菌种发酵方式进行研究,具有十分重要的应用价值。文章在分析吡咯喹啉醌自然界生产菌种的基础上,对在基因工程和代谢工程方面的应用进行了研究。其结果表明,基因工程和代谢工程对于吡咯喹啉醌工业化生产菌种改造,提高吡咯喹啉醌生物合成效率方面,发挥着极其重要的促进作用,对实现吡咯喹啉醌的高效、低成本生产具有深远的影响。文章对吡咯喹啉醌生产在当下的生物合成研究方向,具有重要的参考价值。

新食品原料吡咯并喹啉醌二钠盐免疫调节作用及机制探讨

目的:研究新食品原料吡咯并喹啉醌二钠盐(PQQ)免疫调节的作用。方法:试验选择BALB/c小鼠100只,随机分为正常对照组、模型对照组、PQQ低、中、高剂量组,每组20只。PQQ各剂量组灌胃给予不同剂量的受试物(0.5、1、2mg/kg),正常对照组和模型对照组灌胃9%NaCl溶液,灌胃体积相同,连续30d。第25d 30d,模型对照组及PQQ各剂量组小鼠腹部注射给予80mg/kg的环磷酰胺(CTX)溶液,正常对照组注射等量的9%Na Cl溶液。试验结束后,小鼠静脉取血,离心制备血清,测定细胞因子白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,并考察各组小鼠免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖情况。结果:与模型对照组比较,PQQ中、高剂量组(1、2mg/kg),能显著提高胸腺指数、脾脏指数,改善CTX对脾淋巴细胞增殖抑制现象,提高细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α含量(P <0.05或P <0.01)。结论:吡咯喹啉醌二钠盐(PQQ)通过保护免疫器官,促进免疫细胞增殖及细胞因子分泌,起到调节免疫的作用。

吡咯喹啉醌产生菌筛选方法建立及菌种筛选

吡咯喹啉醌(PQQ)是一种氧化还原酶的辅酶,具有多种生理功能。扩增得到大肠杆菌葡萄糖脱氢酶(GDH)基因,并利用表达载体pET28a在E.coli BL21(DE3)中进行了表达。纯化了可溶性表达产物,并建立了基于GDH的重组酶法分析PQQ的方法。确定了甲基营养菌筛选模型,从2000余份土样中分离得到一株PQQ高产生菌MP606,在未经培养条件优化及诱变选育的条件下PQQ产量达113mg/L。从该菌培养液中制备得到了产物的结晶,HPLC分析、特征光谱分析以及酶法分析均证实该产物为PQQ。扩增并分析了MP606的16S rDNA序列,结果显示该菌16S rDNA序列与12种甲基营养菌都具有95%以上同源性,其中与食甲基菌属两菌株的16S rDNA序列同源性达99%。

吡咯喹啉醌对NMDA诱发大鼠海马神经元损伤的影响

目的探讨吡咯喹啉醌(PQQ)对N甲基D天冬氨酸(NMDA)诱发海马神经元损伤的影响。方法体外原代培养新生大鼠海马神经元,毒性剂量的NMDA诱致海马神经元损伤,预加PQQ,镜下观察神经元的形态变化,琼脂糖凝胶电泳观察细胞的死亡情况,激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+浓度的变化。结果体外培养8d的海马神经用0.1mmol/LNMDA处理后,细胞内Ca2+快速增加,细胞以坏死和凋亡两种形式死亡,细胞的存活率降低;预先给予PQQ可明显减少细胞内Ca2+的增加,减少细胞死亡。结论PQQ对NMDA诱发的海马神经元损伤具有保护作用。

吡咯喹啉醌对脂肪肝蛋鸡肝损伤的保护作用机制

本试验旨在研究吡咯喹啉醌(PQQ)防治蛋鸡脂肪肝综合征的作用机制。选用29周龄海兰褐蛋鸡288只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮(代谢能11.03 MJ/kg,粗蛋白质16.2%);Ⅱ组为病理模型组,饲喂高能低蛋白质饲粮(代谢能12.75 MJ/kg,粗蛋白质13.0%);Ⅲ和Ⅳ组分别在Ⅱ组的高能低蛋白质饲粮基础上添加0.08和0.16 mg/kg的PQQ。试验期4周。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ组高能低蛋白质饲粮成功诱导了蛋鸡脂肪肝试验模型,表现为肝细胞弥散性脂肪变性,肝脏中甘油三酯、总胆固醇含量显著升高(P<0.05),血浆谷丙转氨酶活性显著升高(P<0.05);2)饲粮PQQ可显著抑制高能低蛋白质饲粮引起的肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量及血浆中谷丙转氨酶活性的升高(P<0.05),达到与对照组相当的水平;3)饲粮PQQ可显著抑制高能低蛋白质饲粮引起的肝脏中超氧化物歧化酶活性降低和丙二醛含量升高(P<0.05);4)饲粮PQQ可显著抑制高能低蛋白质饲粮引起的蛋鸡肝脏线粒体相对含量减少(P<0.05),抑制柠檬酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性降低(P<0.05);5)饲粮PQQ可阻止采食高能低蛋白质饲粮的蛋鸡发生脂肪肝,维持与正常对照组相当的水平,不同剂量PQQ之间未见显著差异(P>0.05)。由此可见,饲粮PQQ可通过改善蛋鸡肝脏线粒体功能、调节脂质代谢和抗氧化功能预防蛋鸡脂肪肝综合征。