大鼠灌胃菊三七生成吡咯蛋白加合物的药代动力学研究

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole-protein adducts,PPAs)。本文首先利用SD雄性大鼠单次灌胃不同剂量的菊三七醇提物(0.0625、0.25、0.5、2.0和4.0 g·kg-1)后,于2、12、24和48 h眼眶静脉丛取血,并48 h后异氟烷麻醉取肝,用于苏木精-伊红染色,进行肝组织病理分析,考察不同剂量菊三七醇提物与PPAs生成量及菊三七肝毒性的关系。此外,利用SD雄性大鼠单次灌胃0.25和0.5 g·kg-1菊三七醇提物后,于不同的时间点(10、20和30 min、1、2、4、6、12、24和48 h)眼眶静脉丛取血,进行了不同剂量的PPAs的药代动力学研究。实验方案经上海中医药大学动物实验伦理委员会批准(PZSHUTCM190912019)。采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测血清中PPAs含量,并用PK Solutions 2TM软件的非房室模型进行拟合求算药动学参数。结果表明,PPAs含量随菊三七给药剂量增加呈剂量依赖性,且与肝损伤程度相关;PPAs在大鼠体内的消除率随着给药剂量的增加明显减慢。PPAs可作为PAs毒性标志物,其含量的高低及清除的快慢可为PAs减毒策略的开发提供参考。

血清吡咯蛋白加合物对吡咯生物碱相关肝窦阻塞综合征的严重度评估和对抗凝疗效的预测价值

目的探究血清吡咯蛋白加合物(PPA)对吡咯生物碱相关肝窦阻塞综合征(PA-HSOS)的严重度评估和对抗凝疗效的预测价值。方法收集南京大学医学院附属鼓楼医院2018年4月至2019年12月收治的48例PA-HSOS确诊患者资料,包括PPA浓度、门静脉流速、腹水分级、PA-HSOS严重度分级(参考欧洲血液和骨髓移植协作组成人可疑肝窦阻塞综合征新严重度分级标准并进行调整)和抗凝结局。以急性起病(食用含吡咯生物碱植物1个月内出现症状)患者为研究对象,经logistic回归分别拟合PPA联合门静脉流速、腹水分级的PA-HSOS严重度评估模型,计算2种联合模型的logit值,公式分别为logit_(1)=0.034×PPA(nmol/L)+0.055×门静脉流速(cm/s)-3.287,logit_(2)=0.039×PPA(nmol/L)-2.712×2级腹水(有=1,无=0)-0.388×3级腹水(有=1,无=0)-0.899。以在南京大学医学院附属鼓楼医院行初次抗凝治疗的患者为研究对象,经logistic回归拟合PPA联合血清肌酐和肝静脉压力梯度(HVPG)的抗凝疗效预测模型,计算logit值,公式为logit_(3)=0.013×PPA(nmol/L)+0.064×血清肌酐(mol/L)+0.542×HVPG(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)-16.005。评价PPA对PA-HSOS严重度评估效能和对抗凝疗效的预测价值。统计学方法采用受试者操作特征曲线分析。结果48例患者的血清PPA水平为10.81 nmol/L(3.91 nmol/L,32.04 nmol/L),其中PA-HSOS轻度患者33例(68.8%),中度患者3例(6.2%),重度患者0例,极重度患者12例(25.0%)。23例在南京大学医学院附属鼓楼医院行初次抗凝治疗且有完整数据的患者中,8例应答且存活,15例无应答(5例死亡,1例继续行抗凝治疗后缓解,9例转行抗凝-经颈静脉肝内门体静脉分流术治疗后均存活);1例最初未行抗凝治疗的患者,最终因病情进展行抗凝-经颈静脉肝内门体静脉分流术治疗后存活。PPA评估急性起病患者PA-HSOS严重度的曲线下面积(AUC)为0.75,95%置信区间(CI)0.52~0.98(P=0.047);当PPA≥45.519 nmol/L,评估重度以上PA-HSOS的特异度为100.0%,灵敏度为57.1%。PPA与门静脉流速联合评估PA-HSOS严重度的AUC为0.77,95%CI 0.55~1.00(P=0.032);当联合模型的logit值≥0.180时,评估重度及以上PA-HSOS的特异度为71.4%,灵敏度为81.8%。PPA联合腹水分级(1或2级与3级)评估PA-HSOS严重度的AUC为0.85,95%CI 0.63~1.00(P=0.005);当联合模型的logit值≥0.347时,评估重度及以上PA-HSOS的特异度为85.7%,灵敏度为92.0%。PPA与血清肌酐和HVPG联合模型预测抗凝疗效的AUC为0.85,95%CI 0.69~1.00(P=0.009);当logit值≥0.393时,预测抗凝效果的特异度为62.5%,灵敏度为91.7%。结论PPA可用于评估急性起病的PA-HSOS患者的严重度,结合腹水分级可显著提高其效能;PPA结合血清肌酐、HVPG能较好地预测抗凝疗效。